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화학적 처리방법에 의한 효모의 세포벽 제거
문정혜, 김중균 한국생명과학회 생명과학회지 6 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 1998, Vol.8 No.2 197-202 (6 pages)
효모를 먹이로 하는 filter-feeder들의 소화력을 높이고자, algae의 대용물로서 가치가 있는 Kluyveromuces fragilis효모를 화학적 처리방법에 의해 세포벽을 바괴시켰다. 화학적 처리방법의 최적조건은 0.2 M Tris-buffer에 용해시켜 만든 1M 의 $Na_2EDTA$와 0.3 M의 2-mercaptoethanol을 처리한 후 $30{circ}C$배양기에서 1시간 배양하는 조건에서 얻어졌다. 이때, 약 30%의 protoplast yeast를 실시함으로써, 그 생성률을 약 2배이상 올릴 수 있었다. -
겨울우산버섯의 원형질체 분리와 유전자 형질전환
유선화, 김명길, Ryu. Sun-Hwa, Kim. Myung-Kil 한국미생물학회 미생물학회지 4 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2014, Vol.50 No.4 372-375 (4 pages)
본 연구에서는 백색부후균인 겨울우산버섯의 원형질체 분리 조건과 유전자 형질전환 방법을 확립하였다. 겨울우산버섯 균사에 세포벽 분해효소로 0.5% Usukizyme을 처리하여 ml당 $1{ imes}10^7/ml$개의 원형질체를 확보할 수 있었다. 형질전환체의 선별을 위해 hygromycin에 대한 저항성을 갖는 유전자(hph)를 선택표지로 이용하여 형질전환용 벡터(pHYgpt)를 제작하였다. 40% polyethylene glycol 용액과 aurintricarboxylic acid와 heparin, supermidine을 첨가하여 형질전환을 수행 한 결과 벡터 $1{mu}g$ 당 100-160개의 수율로... -
Rhizopus속의 histones에 관한 연구
민병례, 이은영 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1990, Vol.28 No.2 128-133 (6 pages)
고등한 진핵생물에서 nucleosome 구성에 중요한 역할을 하는 histone 단백질이 하등한 진핵생물에서도 존재하는지의 여부를 알아보기 위하여 실험을 하였다. 하등한 균류에 속하는 Rhizopus 속의 5종(R. acidus, R. arrhizus, R. formosaensis. R R. japoηicus, R. oryzae)을 재료로 하여 15% polyacrylamide acid-urea gel과 18% P이yacηlam ide SDS-gel을 이용하여 전기영동하였다. 분자량을 비교하기 위하여 marker protein으로 Cytochrome C와 함께 15% polyacrylamide SDS-gel을 이용하였으며 모든 gel에서 standard로써 calf... -
Brevibacterium lactofermentum의 원형질체 융합에 의한 유전자 재조합
이혜경, 최순영, 윤윤경, 이영하, 민경희 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1990, Vol.28 No.2 98-103 (6 pages)
원형질체 융합에 사용할 genetic selection marker로써 자외선 조사와 NTG 처리에 의해 Brevibacteriurn lactofermeηturn S SWA(arg trp)와 B. lactofermenturn SWB(met ser)를 분리하였다. 이 균주릎 배양하여 증식기에 penicillin G를 처리한 후, 0.4 M sucrose를 첨가한 lysis fluid에서 lysozyme을 $400mu extrm{g}$/ml의 농도로 16시간 처리 하였을 때, B. lactofermenturn SWA는 99.98%, B. lactofermentum SWB는 99.93%의 원형질체 형성률을 나타내었다. 윈형질체 융합에서는 100 mM $CaCl_{2}$, 30%의 PEG 6,000과 fusion... -
Cellulomonas 속 종간 원형질 융합체의 특성
배무, 임정화 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1990, Vol.28 No.1 47-54 (8 pages)
섬유소를 분해할 수 있는 Cellutomonas flavigena NCIB 12901 과 Cellulomonas bibula NCIB 8142의 종간 원형질체 융합을 하고 그로부터 얻은 융합체의 특성을 조사하였다. C. bibuta의 원형질체는 lysozyme(600Ieιllulomoηas libula NCIB 8142의 종간 원형 섣처l 융 한응 하고:1로부터 얻은융합셰익 특성을 조사하였다 . C bibula의 원형선셰는 lysozyme $600{mu}{ extrm{g}}$/ml)를 6시간 처리하여 얻었으며, 삼투안정제로는 O.5M sorbitol의 최저이었고 원형질체 재생률은 6.7%였다. 원형질체 융합은 25mM $CaCl_{2}$를 포함하는 40%... -
Trichoderma koningii의 종내 원형질 융합체의 분석
박희문, 홍순우 한국미생물학회 미생물학회지 10 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1989, Vol.27 No.2 98-107 (10 pages)
Trichoderma koningii ATCC26113으로부터 얻어진 영양요구성 돌연변이주간의 종내 원형질체 융합을 시도하여 생성된 융합체의 유전자형을 완전평판배상에서 분석하였다. 생성된 융합체 중 모균고 다른 독립영양형 균주에서 섬유소 분해능이 증진된 융합체를 얻었으며 이들이 이배체(혹은 이수체)임을 확인하였다. 또한 이들 이배체(혹은 이수체)의 독립영양청 잡종의 원형 질체 융합을 통하여 유전자의 교환 및 재조합에 의하여 자연분리되므로써 형성됨을 확인하였다. -
유당 자화 효모간의 원형질체 융합
최원기, 전순배, 이용규, 배석, 이진종, 이향 한국미생물학회 미생물학회지 9 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1988, Vol.26 No.3 188-196 (9 pages)
유당함유 울질로부터 알코올을 생산하기 위해 Saccharomyces cerevisiae X 2180-1 A, Candida pseudotropicalis ATCC 8619와 CBS 607 사이에 속간 및 종내 원형질체 융합을 시도하였다. S. cerevisiae X2180-1A(ade rho)와 C. pseudotropicalis CBS 607 (his met)간의 속간 융합율은 $1.0 imes 10^{-5}$ C. pseudotropicalis ATCC 8619와 CBS 607 사이의 종내 융합율은 $3.9 imes 10^{-6}$ - $1.0 imes 10^{-4}$ 이었다. 이는 bovme serum albumin, myoinositol 그리고 ergosterol을 처리하지 않고 얻어진 원형질체 융합율과 비교해서... -
Bovine serum albumin, Myoinositol과 Ergosterol에 의한 Candida pseudotropicalis의 원형질체 재생 및 융합증진
전순배, 배석 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1987, Vol.25 No.4 274-281 (8 pages)
Candida pseudotropicalis의 영양요구성 돌연변이 균주들에 대한 원형질체 형성, 재생 그리고 융합에 있어서 bovine serum albumin (BSA), myoinositol 그리고 ergosterol의 증진효과를 연구하였다. 원형질체 형성율은 영양요구성 균주의 type에 따라 48%-98%였다. O. 5mg/ml의 myoinositol과 0.1mg/ml의 ergosterol을 배양액에 첨가하고 4mg/ ml의 BSA을 원형 질체 형성 완충용액에 첨가했을 때는 50~100%의 원형절체 형성윷을 얻었다. 영양요구성 균주의 생장배지에 myoinositol과 ergosterol을 동시에 첨가하고 원형질체 형성... -
Candida pseudotropicalis의 원형질체 융합: 원형질체 형성 및 재생과 융합 조건
전순배, 정기철, 배석 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1986, Vol.24 No.3 243-250 (8 pages)
Candida pseudotropicalis CBS 607에서의 야생형과 영양요구성 돌연변이 균주에 대한 원형질체 형성 및 재생과 상보적 영양요구성 균주간의 융합에 관해서 연구하였다. 야생형과 his tidine 혹은 adenine요구성 균주에서 원형질체 형성율은 96-100%이였으나 methionine과 tryptophan요구성 균주는 각각 52%와 72%였다. Myoinositol (0.5 mg/ml)을 첨가한 배지에서 전배양한 methionine과 tryptophan조 구성 균주는 원형질체 형성시 bovine serum albumin (BSA, 4 mg/ml)을 첨가하면 96-98%의 원형질체 형성율이 얻어졌다. 원형질체 재생...