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섬유소 분해효소를 생성하는 Aspergillus wentii와 Aspergillus nidulans의 원형질체 융합
성낙계, 이상원, 강신권, 노종수, 정영철 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1990, Vol.18 No.5 460-465 (6 pages)
Asp.wentii와 Asp.nidulans의 원형질체 재생은 2-DG가 30$mu g$/ml 첨가된 포자현탁액을 4시간 전배양 할 때 적당하였고 ergosterol, myoniositol, casamino acid, BSA가 함유된 CBE 재생용 배지에서 효과적이었으며, 30 이상 재생률을 나타내었다. 원형질체 융합은 10mM $CaCl_2$가 함유된 pH7.5의 30PEG 4000으로$37^{circ}C$ 에서 10분간 처리했을 때 가장 양호하였으며, 융합빈도는 $8.2 imes 10^{-4}$을 나타내었다. 가장 우수한 융합주인 FWN-56은 CMCase, avicelase, $eta$-glucosidase 및 xylanase를 동시에 분비하였으며... -
Streptococcus faecalis DS 5 Plasmid pAM $eta_1$의 Lactobacillus casei YIT 9018로의 전이
허정원, 김정호, 정기철, 이용규, 김창렬 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1990, Vol.18 No.3 317-321 (5 pages)
Lactobacillus casei YIT 9018에 광범위 숙주영역을 갖고 있는 Streptococcus faecalis DS5 의 plasmid pAM $eta_1$ DNA를 이용하여 전이, 도입하고자 유당발효능결손변이주를 이용하여 원형질체융합, 접합, 형질전환을 검토하였던 바 얻어진 결과는 다음과 같다. L.casei와 S.faecalis 균주의 conjugation 은 membrane filter mating(Milipore, 0.45$mu extrm m$, front side)의 경우 $6.9 imes 10^7$으로 가장 높은 전이율을 나타냈으며 protoplast fusion이나 transformation에 의해서는 fusant나 transformant를 선별할 수 없었다. -
Corynebacterium 세균의 이종간 원형질체 융합에 의한 재조합주의 유전학적 분석과 L-glutamate와 L-glutamine 생성
백선영, 이혜경, 최순영, 김종욱, 이세배, 임번삼, 민경희 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1990, Vol.18 No.3 296-300 (5 pages)
자외선 조사와 NTG를 처리하여 Brevibacterium flavum 10AHR(arg his $Rif^r$)과 Corynebacterium glutamicum 11TS(trp $Sm^r$의 돌연변이주를 분리하였다. B.flavum 10AHR과 C.glutamicum 11TS를 300$mu g$/ml의 lysozyme으로 18시간 처리하여 원형질체를 형성하고, 융합시 30의 PEG 6,000으로 처리하였을 때 가장 높은$3.7 imes 10^{-6}$의 융합빈도를 나타내었다. -
호알칼리성 Bacillus속 B-17의 형질전환조건
성낙계, 정운상, 고학룡, 정정희 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.3 213-218 (6 pages)
위해 호알칼리성 Bacillus속 K-17을 host로, pUB110과 pBD64를 vector로 사용하여 Bacillus속 K-17의 protoplast 형질전환조건을 검토하였다. 원형질체의 형성은 200$mu extrm{g}$/$mell$의 Iysozyme 을 처리하였으며, 원형질체 형성의 최적 온도, PH및 배양시간은 각각 4$0^{circ}C$, 7.0 및 4시간으로 나타났다. 원형질체는 DM3 재생배지에서 재생시켰으며 0.8% agar, 0.5M sodium succinate 농도에서 가장재생이 좋았다. 형질전환시 PEG의 농도는 40%(w/v) PEG 6,000 30%(v/v)가 최적으로 나타났다. 형질전환체의 특성을 조사한 결과,... -
속간 원형질체 융합에 의한 섬유질 기질로부터 L-Lysine 생산균주 개발 -융합조건 및 융합체의 성질 -
성낙계, 정덕화, 박법규, 정영철, 전효곤 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.3 175-181 (7 pages)
flavum 및 Corynebacterium glutamicum을 각각 이속간 원형질체 융합을 하여 융합조건과 융합체의 성질을 조사하였다. 각각의 parental protoplast를 동량으로 혼합한 후 30% PEG 6000으로 3$0^{circ}C$, 30분간 융합시킨 결과 1.9$ imes$$10^{-6}$~2.1$ imes$$10^{-6}$의 융합빈도를 얻었고, 134주의 융합체 중 유전적 안정화가 판명되고 CMC 기질로부터 L-lysine 생성능이 인정된 FCB 3 및 FCC 19를 최종 선별하였다. FCB 3 및 FCC 19는 친주보다 DNA 함량이 높을 분 아니라 G+C 함량도 융합전 친주의 G+C 총함량의 약 1/2에 해당하여... -
Cellulomonas속 원형질체 재생과 종간 융합조건
배무, 조보연 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.4 303-309 (7 pages)
Cellulose를 이용할 수 있는 Cellulomonas속 균주의 종간 세포의 융합방법을 확립하기 위해 원형질체 재생 및 융합조건에 대해 검토하였다. Cellulomonas속 균주의 원형질체는 osmotic stabilizer를 포함하는 재생배지에서 유동성 한천배지로 중층하여 재생시켰고 재생 확인은 주사전자현미경으로 하였다. 원형질체 융합은 항생물질 내성과 영양요구성 돌연변이주의 유전자 표지에 확인하였다. Lysozyme을 처리하여 형성된 C. flavigena 원형 질체의 세포벽 재생은 osmotic stabilizer로 0.4M sorbitol을 포함하는 재생배지에서 약 15%... -
Saccharomyces cerevisiae D-71과 Zygosaccharomyces rouxii SR-S의 세포융합으로 육성한 융합주의 특성
이종수, 김찬조 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.4 297-302 (6 pages)
고온발효성인 Sacch. cerevisiae D-71과 내삼투압성인 Zygosacch. rouxii SR-S를 세포융합시킨 후 유전적으로 안정한 융합주 FS-RN1를 선별하여 각종 특성을 조사하였다. FS-RN-1은 이를 4$^{circ}C$에서 6개월 보관했을 때 5.8%의 친주복귀율을 보여 유전적으로 안정하였고 친주에 비하여 세포체적이 컸고 DNA 함량이 많았으며 유도기가 다소 길었다. 또한 FS-RN1은 TTC 정색 시험에서 홍색을 띠었고 5% NaCl 함유되어 있는 간장국가수분해액의 한천배지에서 포자를 형성하였다. FS-RN1의 NaCl에 대한 내성은 친주의 중간이었으나 탄소원... -
Penicillium verruculosum의 원형질체 형성과 재생
Chung. Ki-Chul, Park. Chang-Ryeol 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.2 156-162 (7 pages)
섬유소 분해효소를 생산하는 P. verruculosum F-3 의 세포융합에 관한 연구의 일환으로 균사체로부터의 원형질체 형성과 재생 최적조건을 검토하였다. 세포벽 분해효소로 유효한 각종시판효소제제중 0.5%(w/v) Novozym 234가 가장 효과적이었고 PDY 배지로 3$0^{circ}C$ 20시간 배양한 균사체 400mg을 3$0^{circ}C$ 1시간 반응시 가장 많은 원형질체가 형성되었다. 원형질체 형성을 위한 최적 삼투압 조절제는 0.7M sorbitol(pH5.6)이었고 원형질체 재생을 위한 최적 삼투압 조절제는 0.6M MgSO$_4$(pH 5.6)이었으며 RCM에서의 재생율은... -
Saccharomyces cerevisiae D-71과 Zygosaccharomyces rouxii SR-S의 원형질체 형성과 융합
이종수, 김찬조 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.2 142-149 (8 pages)
고온에서 고농도 기질을 발효할 수 있는 효모를 육성하고자 8%의 NaCl 내성을 갖은 고온발효성인 Saccharomyces cerevisiae D-71 과 Ca-pantothenate 를 절대요구하는 내삼투압성인 Zygosaccharomyces rouxii SR-S를 친주로 하여 원형질체 형성과 융합조건을 검토하였다. Sacch. cerevisiae D-71은 YEPG 배지에 12시간 배양한 세포를 0.1mM EDTA와 0.5M sorbitol를 함유한 인산완충액(pH7.5)에 현탁시켜 1%의 2-mercaptoethanol로 10분간 전처리한 후 Zymolyase-20T 4.0mg/$mell$를 가하여 3$0^{circ}C$에서 50분간 반응시켰을 때 96%... -
Brevibacterium flavum의 동종간 및 Corynebacterium glutamicum과의 이속간 원형질체 융합 및 개량균주의 L-Lysine 생합성의 대사제어
박청, 임번삼, 전문진 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1987, Vol.15 No.2 104-111 (8 pages)
Lysine 생산균주를 개량하기 위한 시도로서 Brevibacterium flavum ATCC 21528R 과 Brevibacterium flvum ATCC 21529S의 동종간 및 Brevibacterium flavum ATCC 21528R 과 Corynebacterium glutamicum ATCC 13058S 와 의 이속간 원형질체 융합을 실시하였다. 이들 균주들에 대한 원형질체 형성의 최적조건을 조사하고 재생과 융합에서의 plasma expander의 효과를 검토하였다. 융합주 No. CH23과 No. CH41은 최적 배양조건 하에서 L-lysine 생산성이 모균에서보다 각각 21%와 8.9% 향상된 것이었다. L-Lysine 생합성 회로상의...


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