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알칼리내성 Bacillus sp. YA-14 유래의 Pectate Lyase 유전자를 함유한 재조합균주로부터 효소의 정제 및 특성
한혜정, 김진만, 박희경, 배동훈, 유주현 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.6 655-662 (8 pages)
Ya-14 유래의 pectate lyase 유전자를 함유한 재조합균주로부터 affinity method, CM-cellose column chromatography와 gel filtration을 통해 효소를 정제하였으며 정제효소의 수율은 10.2, 정제도는 258배였다. 효소의 최적활성 pH는 10.0이었고 pH4.0-10.0까지의 범위에서 안정성이 있었으며, 최적활성온도는 $60^{circ}C$이고 $50^{circ}C$까지 열안정성이 있으며, SDS-PASGE에 의해 추정된 분자량은 43KDa 이었다. 아미노산 조정 분석 결과 polar, basic 아미노산의 함량이 높고 특히 Ser, Gly, Tyr의 함량이 높았으며, 정제효소의... -
Streptomyces sp. S56이 생산하는 Endoinulase의 정제 및 특성
김수일, 하영주 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.5 551-558 (8 pages)
정제하여 물화학적으로 성질을 조사하였다. 조효소는 DEAE-cellulose column chromatography 및 Sephadex G-200 gel filtration에 의하여 정제하였으며, 정제된 효소는 polyacrylamide gel 전기영동결과 단일 band로 나타나서 전기영동상 순수하게 분리되었다. 정제효소의 최적 pH는 5.5-6.0, 최적온도는 $50^{circ}C$였으며, 최적 온도에서의 열안정성은 1시간 처리후 42%의 잔류활성을 보였다. 정제효소는 금속이온 중 $Mn^{2+}$에 의해서는 활성이 증가되었으나, $Ag^{+}$, $Hg^{+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Fe^{3+}$, $Mo^{6+}$ 에... -
Streptomyces S-217에 의한 Trypsin 저해물질의 생산 및 정제
류병호, 이주화, 신동분, 김동석 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.5 534-542 (9 pages)
0.9, peptone의 배지와 초기 pH는 7.0 배양시간은 66시간 및 온도30$^{circ}C$의 조건에서 제일 높았으며, 무기염의 효과는 크게 영향이 없었다. 정제는 column chromatography와 HPLC에 의하여 정제하였다. 정제된 trypsin 저해물질의 초대파장은 $lambda_{max}$ 215nm이었고, 용해도는 물에는 95, methanol과 dimethylsulfoxide에서는 70% 및 75%이었다.Trypsin 저해물질 복합체 형성시간은 10분 정도였으며, trypsin 효소의 50% 저해농도($IC^{50}$)는 15$mu$g/ml 이었다. 저해물질의 pH 안정성은 $100^{circ}C$ 10분간 열처리시... -
대장균에서 발현되는 Clostridium thermocellum의 섬유소 분해 효소의 특성
정경화, 이진호, 이용택, 김하근, 박무영 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.5 505-510 (6 pages)
섬유소 분해 효소 유전자를 pUC9 플라스미드를 이용하여 대장균에 클로닝하였고, 지금까지 클로닝 된 C.thermocellum의 섬유소 분해 유전자들과 제한효소 양상을 비교하여 새로운 유전자임을 알 수 있었다. 대장균에서 섬유소 분해 효소를 열처리와 column chromatography에 의해서 정제를 하였고, 분자량은 40, 000이었다. 이 효소는 pH 5.0과 $65^{circ}C$에서 CMC에 대해서 최대 활성을 보였고 최종 산물인 포도당과 cellobiose에 의한 활성의 저해는 크게 나타나지 않았다. CMC에 대한 이 효소의 $K_{m}$ 과 $V_{max}$값은 각각... -
Bacillus cereus에 의한 Pullulanase의 생산 및 특성
정만재, 임계숙, 조대선, 우정숙 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.4 409-416 (8 pages)
casein, nutrient broth, egg albumin의 첨가는 효소의 생산을 크게 증가시켰다. 황산암모늄분획, CM-cellulose와 DEAE-cellulose column chromatography에 의하여 효소를 정제하였고 정제효소의 specific activity는 29.09U/mg protein, 수율은 17.1이었다. 정제효소는 polyacrylamide disc gel electrophoresis에 의하여 single band를 나타내었고, SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis에 의하여 추정된 분자량은 61,000, 등전점은 pH7.0, 최적온도는 $40^{circ}C$, 최적 pH는 6.5, $35^{circ}C$ 이하에서 안정하였고, pH 안정... -
토양 미생물 HSL613이 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 특성
이홍수, 이승철, 권태종, 정태화 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.4 401-408 (8 pages)
효소는 CH2 concentrator에 의한 농축, DEAE-cellulose chromatography, Superose 12 column FPLC로 정제하였고, 비활성이 약 31배나 증가하였다. 이 효소는 $50^{circ}C$, pH 6.0에서 최대 활성을 나타냈고 30-$45^{circ}C$ 범위에서는 안정하였다. pH에 대한 안정성은 pH 6.0-11.0까지 광범위한 안정성을 보였으며, Km 값은 cholesterol에 대해서 $3.65{ imes}10^{-3}$M이며 분자량은 59,500 dalton으로 추정 된다. 또한 $Ca^{2+}$, $Ba^{2+}$, $Fe^{2+}$, Brij 35에 의해서는 효소의 활성이 저해되지 않았지만, $Hg^{2+}$, $Ag^{2+}$... -
Streptomyces sp. 182-27 균주가 생산하는 아미노산 대사길항물질의 정제와 특성
박부길 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.3 335-343 (9 pages)
동정하기에는 많은 type culture와의 비교분류를 하여야만 하므로 여기서는 다만 기균사의 포자형성과 세포벽 성분의 조성, 형태학적 성상 등으로 보다 Streptomyces sp.로만 동정하였다. 182-27 균주의 배양조건을 검토하고 최적조건에서 대량 배양하여 그 배양여액으로부터 이온교환수지, silica gel column chromatography 등에 의하여 활성 물질을 분리 정제하였으며 배양액 약 20$ell$에서 약 20mg의 백색분말을 얻었다. 182-27 물질은 그의 이화학적 성질로 보아 아미노산 유연물질로 추정할 수가 있으나 그의 화학구조는 아직... -
Bacillus sp. E1이 생성하는 Cyclodextrin Glucanotransferase의 정제 및 특성
박천석, 우의전, 국승욱, 서병철, 박관화, 임훈 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.2 156-163 (8 pages)
생산균주 선발배지를 이용하여 국내 토양으로부터 CGTase 활성이 우수한 Bacillus sp. E1균주를 분리하였다. FPLC를 이용하여 gel filtration과 anion exchange column chromatography를 한 결과 순수 정제된 단일 단백질을 얻을 수 있었으며, 정제된 효소의 최적 작용 pH 범위는 6에서 8까지 였고, 온도는 $60^{circ}C$에서 최적을 나타냈다. 정제된 단백질의 분자량은 114,000, 등전점은 4.3이었다. 생성된 cyclodextrin은 $eta$와 $gamma$-cyclodextrin이 주였으며, 특이하게도 $alpha$-cyclodextrin은 거의 생성되지 않았다. 작용... -
Streptomyces nigrifaciens GMT-4967이 생산하는 항생물질 MT-497의 분리와 화학적 특성
이영선, 안순철, 윤병대, 민태익, 이정형, 이현선, 안종석, 민태익 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.6 604-609 (6 pages)
토양에서 분리한 Streptomyces nigrifaciens GMT-497호무터 G(+) bacteria에만 강한 항균활성을 갖는 항생물질 MT-497을 용매추출, silica column chromatography와 재결정화를 통하여 분리 정제하였다. MT-497의 UV, 융점, 원소분석, IR spectrum, $^1H-NMR$과 구성아미노산 분석을 통해 actinocin chromophore와 threonine, proline, methyl valine, sarcosine, aspartic acid로 구성된 peptide을 갖는 actinomvcin계열의 항생물질로 동정하였다. -
Aeromonas caviae No. S-76이 생산하는 Pullulanase의 정제, 특성 및 Maltosyl-$eta$-Cyclodextrin의 합성
손천배, 김명희, 이명자 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.4 362-367 (6 pages)
Pullulanase 생산균으로서 토양으로부터 분리한 Aeromonas caviae No.S-76을 진탕배양하여 얻은 조효소액을 ammonium sulfate 침전, DAEA Sephadex A-50 column chromatoraphy, Sephadex G-150 column chromatography에 의하여 정제하였다. 이때 수율은 21이었고 50배의 정제도를 가진 효소단백질을 얻었다. 정제효소는 SDS-polyacrylamide slab gel 정기영동에 의하여 분자량 118,000의 단일단백질이었고, 등전점은 4.3, 작용 최적온도는 $50^{circ}C$, 작용 최적 pH는 8.0이었다. 또한 이효소는 $45^{circ}C$ 이하, pH 6.0-90. 범위에서...


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