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하폐수의 자연환경에서 R Plasmid와 재조합 유전자의 전이특성(II) -전이율의 비교-
이성기, 김치경 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.5 454-460 (7 pages)
자연계로부터 분리한 Gram 음성세균과 함께 유전자 조작기법으로 kanamycin (Km)과 chloramphenicol (Cm)에 대한 내성유전자를 재조합한 균주들에서 그 내성유전자의 전이율을 conjugation 방법으로 몇 가지 상이한 수질환경에서 비교 연구하였다. 자연계로부터 분리한 DK1 균주와 재조합한 DKC601이나 DKH103을 donor로 하고 recipient 및 기타 조건을 같게 했을 때, donor가 가지고 있던 Km$^{${gamma}$}$</TEX> 유전자의 전이율은 자연환경의 하천수에서 보다 실험실 환경의 멸균한 하폐수에서 더 높았고, 실험실 환경에서는... -
하폐수의 자연환경에서 R plasmid와 재조합 유전자의 전이특성( I ) -$Km^rCm^r$유전자의 클로닝-
김치경, 이성기 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.5 447-453 (7 pages)
EcoRI site가 16개, PstI site가 32개, SalI site가 6개씩 있었다. pDK101 plasmid 와 vector로 사용한 pKT230을 E. coli으로 처리하여 얻은 절편들로부터 Km$^{${gamma}$}$</TEX>Cm$^{${gamma}$}$</TEX> 유전자를 가지는 pDT309와 pDTS29 등의 chimeric piasmid를 제조하였다. 이들을 다시 E. coli C600과 E. coli HB101 에 형질전환 시킴으로써, DKC601, DKC602, DKH 102 그리고 DKH103 등의 재조합 균주를 얻었다. 이들 재조합 균주에서는 모두 Km$^{${gamma}$}$</TEX>Cm$^{${gamma}$}$</TEX>유전자가 잘... -
방향족 탄화수소 분해 Plasmid의 n-Alkane 자화성 Pseudomonas putida에로의 전이
Kho. Yung-Hee, Chun. Hyo-Kon, Cho. Kyong-Yun, Bae. Kyung-Sook 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.1 51-55 (5 pages)
자화하는 P. putida KCTC 2405에 접합에 의해 각각의 이동은 가능하나 두 플라스미드는 불화합성에 기인하여 본 균주내에 공존할 수 없었다. TOL plasmid에서 불화합성 체계는 남겨두고 tol 유전자만 이 CAM plasmid내로 transposition 되어 형성된 CAM::TOL* 플라스미드는 NAH 플라스미드와 P. putida KCTC 2405에서 공존할 수 있어 m-toluate, naphthalene, camphor 및 n-alkane(C8-C24)를 분해할 수 있는 P. putida 3SK 균주를 육종하였다. CAM::TOL* 플라스미드는 선택성 배지에서 안정하였으나 비선택성 배지에서는 불안정하였다. -
Bunker-C유 집식배양으로부터 해양세균 Plasmid의 분포
Park. In-Sick, Park. Jung-Youn, Jin. Deuk-Hee, Hong. Yong-Ki 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.4 270-274 (5 pages)
gel 전기영동상에서 조사하여 보았다. 우선 오염되지 않은 해수로부터 분리한 세균들의 Plasmid 분포(22%)와 만성적으로 유류오염이 예상되는 각 항구의 세균 plasmid 분포(25%)에는 조금 차이는 있었으며 enrichment culture중에는 29%정도로서 plasmid 분포비율이 증가하였다. 각종 탄화수소 화합물들에 성장하는 세균중 약33%는 plasmid룰 함유하고 있었으며, 또 약 62%정도는 Gram 음성균이었다. Plasmid 함유 세균중 23% 정도는 2종 이상의 plasmid를 갖고 있으며, 41%의 plasmid는 20kb 이상의 크기를 가지고 있는 것으로 나타났다. -
Zymomonas mobilis Plasmid Vector의 숙주세포 내에서의 안정성에 관한 연구
이상기, 박은숙, 황덕주, 박무영 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1987, Vol.15 No.5 328-333 (6 pages)
고효율 에타놀 생성 균주인 Zymomonas mobilis의 plasmid vector가 숙주세포 내에서 안정하게 유지되는지의 여부를 회분 및 연속배양 방법을 통하여 조사하였다. Z. mobilis 숙주세포는 전이된 plasmid의 크기와 배지의 조성에 따라 증식속도에 영향을 받음을 알 수 있었고 작은 크기의 plasmid를 비 선택성 (non-selective) 배지에서 배양한 경우 더 빠른 성장을 보였다. 또한 사용한 4종류의 plasmid vector 모두 숙주세포 내에서 30세대 이상에 걸쳐 93% 이상의 높은 안정성을 나타내면서 독립적으로 증식함이 확인되었다. -
Zymomonas mobilis의 Plasmid Vector 제조에 관한 연구
Hwang. Duk-Ju, Rhee. Sang-Ki, Pack. Moo-Young 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1987, Vol.15 No.5 319-327 (9 pages)
pBR 325의 chloramphenicol 저항유전자를 포함한 재조합 plasmid인 pHZ22를 개발하고 이 plasmid vector가 숙주세포인 Z. mobilis ATCC31821에서 독립적으로 replication됨을 확인하였다. 또 하나의 항생제 저항표지로서 RP4의 tetracycline 저항유전자를 분리하여 pHZ22에 도입함으로써 pHZT224를 제조하였는데 이 plasmid vector도 Zymomonas로 conjugation에 의해 전이되어 안정하게 유지 되었다. 본 연구를 통하여 개발된 plasmid vector는 Z. mobilis와 E. coli에 공히 작용하는 shuttle vector 로서 외부 유전자를 Zymomonas에... -
진핵생물 유전자 조작을 위한 효모 vector계 이용에 관한 기초연구 -생효모 형질전환 최적조건과 숙주별 plasmid안정성에 관하여 -
기우경, 조성환, 김범규, 조무제 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1986, Vol.14 No.2 125-131 (7 pages)
및 vector에 따라 lithium염 처리에 의한 생효모형질전환 최적 조건을 얻기 위하여 5종의 효모 숙주(S. cerevisiae Dl3-lA, DKD-5D, DBY-746, MC-16 및 S2022D)에 3종의 효모plasmid vector(YRp 7, YEp 13 및 YIp 5 )의 형질전환 실험과 아울러 이들 각 형질전환체내에서 도입된 plasmid들의 안정성을 조사하였다. lithium 염의 경우 LiCl가 Li-acetate에 비하여 좋은 효과를 보였으며 LiCl처리에 의한 최적 형질전환 조건은 각 숙주-vector계에 있어서 공히 균체 배양 시간은 16시간 (5.4 $ imes$ $10^6$ - 2.4$ imes$$10^8$cells/$m{ell... -
Streptococcus facalis var. liquefaciens에 존재하는 Plasmid DNA의 특성
강국희, 이명기, 박연희 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1985, Vol.13 No.4 417-422 (6 pages)
각각의 대략적인 분자량은 6.8M-dal, 5.2Mdal, 2.6Mdal, 2.1Mdal로 측정되었다. 이 균주를 novobiocin으로 처리하여, 각각 다른 2개의 plasmid가 소실된 2개의 변이주를 얻었다. 이들 균주는 당발효성, 온도감수성, gelatin 용해성, 단백질응고성은 wild type과 동일하였으나 이중 한 균주가 lincomycin과 erythromycin에 대한 감수성을 나타내었다. 따라서 본 실험에서 검출한 4개의 plasmid는 당발효성 등의 특성과는 관련이 없는 것으로 추정할 수 있으며, pSK₂와 pSK₄의 두 plasmid 중 하나는 항생물질 저항성에 관련된 것으로... -
유산균 Plasmid DNA의 신속 간편한 분리방법
배형석, 백영진, 김영기, 유민, 박무영 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1985, Vol.13 No.3 289-296 (8 pages)
alkaline-detergent lysis 법으로 분리되었다. 유산간균은 효소 처리 때 mutanolysin의 농도를 30$mu extrm{g}$/$mell$로 하고 37$^{circ}C$에서 5-10분간 반응되었을 때 plasmid DNA가 아주 잘 추출되었다. 유산구균의 경우는 그 최적 조건이 조금 달랐다. 본 방법은 L. casei, L. acidophilus, L. helveticus, S. lactis, S. faecalis, S. faecium과 S. cremoris 균주로부터 plasmid DNA를 신속하게 분리하는데 사용할 수 있었다. 본 방법을 이용하여 배양액 $1.5mell$로부터 분리된 plasmidsDNA가 gel상에서 쉽게 확인될 수 있었다. -
Liposome 봉입과정에서의 Plasmid DNA의 안정성
Ahn. J.S., Pack. M.Y. 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 3 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1985, Vol.13 No.3 199-201 (3 pages)
플라스미드 YEp13과 pMA56을 두가지 다른 방법으로 liposome속에 봉입시켰다. 이 두가지 방법에 따르면 플라스미드 DNA는 6$0^{circ}C$에 1.5시간 동안 노출되거나, 4$^{circ}C$에서 2-5분 동안 sonication 처리를 받아야 한다. 일단 봉입된 플라스미드를 다시 뽑아낸 다음, 그들에 대한 물리적인 구조와 유전적 전환능력을 조사했다. 그 결과 이 두 플라스미드 DNA는 liposome 봉입과정을 통해 아무런 손상을 입지 않았음이 밝혀졌다.