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두 가지 항산화유전자를 동시에 발현시킨 형질전환 톨 페스큐 식물체의 환경스트레스에 대한 내성 특성 해명
이상훈, 이기원, 김기용, 최기준, 서성, 곽상수, 권석윤, 윤대진, 이병현, Lee. Sang-Hoon, Lee. Ki-Won, Kim. Ki-Yong, Choi. Gi-Jun, Seo. Sung, Kwak. Sang-Soo, Kwon. Suk-Yoon, 한국초지조사료학회 한국초지학회지 8 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2007, Vol.27 No.2 109-116 (8 pages)
유전자가 엽록체에 동시에 발현하도록 제작한 벡터를 Agrobacterium법을 이용하여 톨 페스큐에 도입하였다. Hygromycin이 첨가된 선발배지에서 내성을 가지며 재분화된 형질전환 식물체를 pot로 이식하여 기내 순화시킨 후, Southern 분석을 실시하여 본 결과, 발현벡터의 T-DNA 영역이 형질전환 식물체의 genome에 성공적으로 도입되었음을 확인하였다. 형질전환 식물체 잎 절편을 산화스트레스와 중금속을 포함하고 있는 용액에 처리하여 엽록체의 손상정도를 조사한 결과, 비형질 전환체에 비해 형질전환체는 강한 내성을 나타내었다.... -
E35S 프로모터 + AtNDPK2 유전자 도입에 의한 버즈풋 트레포일 (Lotus corniculatus L.) 형질전환체 생산
김기용, 장요순, 최기준, 성병렬, 김원호, 서성, 이병현, 곽상수, Kim. Ki-Yong, Jang. Yo-Soon, Choi. Gi-Jun, Sung. Byung-Ryeol, Kim. Won-Ho, Seo. Sung, Lee. Byung-Hyun, K 한국초지조사료학회 한국초지학회지 8 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2006, Vol.26 No.2 83-90 (8 pages)
corniculatus L.) 형질전환체를 개발하기 위하여, AtNDPK 유전자가 E35S 프로모터에 의해 조절되도록 재조합한 발현벡터 pEN-K를 Agrobacterium 형질전환 방법으로 버즈풋 트레포일에 도입하였다. Agrobacterium과 공동배양한 버즈풋 트레포일 캘러스를 $100{mu}g/m1$의 kanamycin 및 $500{mu}g/m1$의 cefotaxim을 첨가한 SH-3-kc 배지에서 배양하며 식물체로 재분화시켰다. 재분화된 버즈풋 트레포일의 genomic DNA를 분리, PCR 및 Southern blot 분석을 실시한 결과, AtNDPK 유전자가 도입된 형질전환체의 경우 agarose gel 전기영동 및... -
캘러스의 형태와 항산화물질 첨가가 톨 페스큐의 식물체 재분화와 형질전환효율에 미치는 영향
이기원, 이상훈, 김도현, 이동기, 원성혜, 이효신, 이병현, Lee. Ki-Won, Lee. Sang-Hoon, Kim. Do-Hyun, Lee. Dong-Gi, Won. Sung-Hye, Lee. Hyo-Shin, Lee. Byung-Hyun 한국초지조사료학회 한국초지학회지 6 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2006, Vol.26 No.2 77-82 (6 pages)
유용유전자 도입을 통한 신품종 톨 페스큐를 개발할 목적으로 Agrobacterium을 이용한 효율적인 식물체 재분화 및 형질전환에 미치는 몇 가지 요인을 조사하였다. 성숙종자로부터 유도된 캘러스를 형태에 따라 3가지 type으로 분류하였고 type II 캘러스는 유백색으로 녹색을 띠며 조직적으로 치밀한 상태이며 식물체로의 재분화효율이 52.6%로 가장 높게 나타났다. 또한 재분화 배지에 $AgNO_3$와 cysteine을 동시에 첨가해 준 경우 무첨가구에 비해 캘러스 유도율은 6.7%, 식물체 재분화율은 12% 씩 각각 증가하였다. 캘러스 type 별... -
리그닌 생합성관련 유전자의 발현조절에 의한 고품질 목초 개발
우현숙, 윤정우, 이병현, Woo. Hyun-Sook, Yun. Jung-Woo, Lee. Byung-Hyun 한국초지조사료학회 한국초지학회지 8 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2006, Vol.26 No.1 1-8 (8 pages)
유전자의 발현을 억제시킨 형질전환 오차드그래스를 개발하기 위하여 Dgcomt 유전자를 RNAi 발현벡터에 도입한 후, Agrobacterium 형질전환시스템을 이용하여 오차드그래스에 도입하였다. PCR, Southern 및 Northern 분석 결과 RNAi 발현벡터가 genome에 도입되었으며, Dgcomt 유전자의 발현이 상당한 수준으로 저하되었음을 확인하였다. Dgcomt 유전자의 발현억제는 식물체의 목질화와 더불어 증가되는 lignin의 축적량을 감소시킬 것으로 기대되며 향후 소화율이 증가된 고품질 신품종 목초의 개발에 유용하게 활용될 것으로 판단된다. -
내열성 유전자 DgP23을 도입한 형질전환 오차드그라스의 생산
김기용, 장요순, 박근제, 최기준, 성병렬, 서성, 차준영, 손대영, Kim. Ki-Yong, Jang. Yo-Soon, Park. Geun Je, Choi. Gi Jun, Seong. Byung Ryul, Seo. Sung, Cha. Joon-Yung, 한국초지조사료학회 한국초지학회지 8 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2005, Vol.25 No.4 267-274 (8 pages)
고온 내성 오차드그라스를 개발하기 위하여, 재조합 DgP23 유전자에 CaMV 35S 프로모터를 붙여 발현벡터를 제작, Agrobacterium 형질전환 방법으로 오차드그라스 형질전환체를 생산하였다. Genomic DNA를 분리하여 PCR 및 Southern blot 분석을 실시한 결과, PCR 분석에서 DgP23 유전자의 DNA band가 관찰되었고, Southern blot 분석에서도 X-ray film 상에 hybridization signal이 관찰되어, 오차드그라스 genome에 DgP23 유전자의 도입이 확인되었으며, wild type 및 empty vector control에서는 DNA band 및 hybridization signal이... -
Ascorbate Peroxidase 유전자의 도입에 의한 식물의 형질전환
이인애, 이효신, 배은경, 김기용, 이병현, 손대영, 조진기 한국초지조사료학회 한국초지학회지 6 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2002, Vol.22 No.2 101-106 (6 pages)
위하여 딸기 유래의 cytosolic ascorbate peroxidase 유전자(ApxSC7)를 Agrobacterium tume-faciens LBA4404를 매개로 형질전환 시켰다. Hygromycin으로 선발된 캘러스로부터 재분화 된 식물체는 야생형과 비교하여 형태적으로 차이를 나타내지 않았다. PCR 및 Southern blot 분석을 통하여 형질전환 식물체의 염색체 내에 ApxSC7 유전자가 integration 되었음을 확인하였다. 담배 잎으로부터 total RNA를 분리하여 Northern blot 분석을 실시한 결과, 도입된 유전자가 형질전환 식물체 내에서 지속적으로 발현된다는 것을 확인하였다. -
Glutathione Reductase 유전자의 도입에 의한 오차드그래스의 형질전환
이효신, 배은경, 김기용, 원성혜, 정민섭, 조진기 한국초지조사료학회 한국초지학회지 6 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2001, Vol.21 No.1 21-26 (6 pages)
환경 스트레스에 의해 야기되는 활성 산소종에 의한 피해에 내성을 가지는 목초의 개발을 위하여 오차드그래스의 배반 조직 유래의 캘러스에 배추유래의 cytosolic glutathione reductase 유전자(BcGRl)를 Agrobucterium tumefaciens EHA101을 매개로 형질전환시켰다. Hygromcin으로 선발된 캘러스로부터 재분화된 식물체는 야생형과 비교하여 형태적으로 차이를 나타내지 않았다. PCR 및 Southern blot 분석을 통하여 형질전환 식물체의 염색체 내에 BcGRl 유전자가 integration 되었음을 확인하였다. 오차드그래스의 잎으로부터 total... -
BcHSP17.6 유전자 도입에 의한 알팔파의 형질전환
김기용, 성병렬, 임용우, 최기준, 임영철, 장요순, 서성, 윤세형, 박근제 한국초지조사료학회 한국초지학회지 6 Pages
한국초지조사료학회 한국초지학회지 2001, Vol.21 No.3 151-156 (6 pages)
내열성 유전자인 BcHSP17.6를 갖도록 제작한 발현벡터 pBKH4를 Agrobacterium tumefaciens LBA 4404에 도입후, Agrobacterium과 알팔파 캘러스의 공배양을 통해 감염시킨 캘러스를 $100{mu}g/m{ell}$의 kanamycin과 $500{mu}g/m{ell}$의 cefotaxim을 첨가한 SH-kc배지에서 배양하며 형질전환된 캘러스를 선발하였다. 식물체 재분화는 SH- nk-c, SH-sp-c, SH-11b-c, SH-1BA 배지에서 약 4개월간 배양하여 재분화를 완성하였으며, 재분화된 알팔파의 genomic DNA를 분리한 후, PCR 분석 및 Southern blot 분석을 실시하여 알팔파의... -
포장생육 잔디 포복경을 이용한 잔디 형질전환에 있어서 살균방법의 영향
안나영, 알람 이프테칼, 김용구, 배은지, 이광수, 이병현, Ahn. Na-Young, Alam. Iftekhar, Kim. Yong-Goo, Bae. Eun-Ji, Lee. Kwang-Soo, Lee. Byung-Hyun 한국초지조사료학회 한국초지조사료학회지 5 Pages
한국초지조사료학회 한국초지조사료학회지 2013, Vol.33 No.2 100-104 (5 pages)
25분간 처리 했을 때 포복경 절편체의 생존율이 높았으며, 0.1% $HgCl_2$로 처리시 800 mbar의 진공처리를 5분간 실시했을 때 가장 효과적이었다. 또한 Agrobacterium과 공동배양 시 2.5 mg/l의 amphotericin B를 첨가해 준 배지에서 배양했을 때 가장 높은 생존율을 나타내었다. AmB의 처리는 Agrobacterium의 생장에 영향을 미치지 않았다. 또한 살균된 포복경으로 부터 신초의 재분화에도 영향을 미치지 않았으며 곰팡이 오염만을 효율적으로 억제하는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 포장에서 대량으로 생육시킨 잔디 포복경을... -
NDP Kinase 유전자를 과발현시킨 형질전환 톨 페스큐 식물체의 저온 스트레스에 대한 내성 특성
이상훈, 이기원, 김경희, 윤대진, 곽상수, 이병현, Lee. Sang-Hoon, Lee. Ki-Won, Kim. Kyung-Hee, Yun. Dae-Jin, Kwak. Sang-Soo, Lee. Byung-Hyun 한국초지조사료학회 한국초지조사료학회지 8 Pages
한국초지조사료학회 한국초지조사료학회지 2009, Vol.29 No.4 299-306 (8 pages)
2 유전자가 항상적으로 발현하도록 제작한 벡터를 Agrobacterium법을 이용하여 톨 페스큐에 도입하였다. Hygromycin이 첨가된 선발배지에서 내성을 나타내며 재분화된 형질전환 식물체를 pot로 이식하여 기내순화 시킨 후, Southern blot 분석을 실시하여 본 결과, NDP kinase 2 유전자가 형질전환 식물체의 genome에 정상적으로 도입되었음을 확인하였다. 프로테옴 분석을 통하여 도입유전자의 조절을 받는 항산화관련 유전자들의 발현이 유도되었음을 확인 할 수 있었다. 형질전환 식물체 잎 절편을 산화스트레스 중의 하나인 저온...