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Construction, Expression, and Purification of N-Terminal Variants of Lumazine Protein from Photobacterium leiognathi
강경숙, 김소영, 최지선, 김영두, 로버트 포쿠, 남기석, 이찬용, Kang. Kyoung-Suk, Kim. So-Young, Choi. Ji-Sun, Kim. Young-Doo, Pokoo. Robert, Nam. Ki-Seok, Lee. Chan Y 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2013, Vol.49 No.2 205-210 (6 pages)
돌연변이(Site Directed Mutagenesis)와 중합효소 연쇄 반응(Polymerase Chain Reaction)을 통해 제조하였다. 위의 유전자들이 포함된 재조합 플라스미드를 대장균에 형질 전환시켜 과발현시키는 최적의 조건을 찾았으며, 발현된 야생형 및 돌연변이 아미노-말단 영역 루마진 단백질을 6X-His tag system을 이용하여 정제 하였다. 흡광 및 형광 분광광도계를 이용한 실험 결과 이들 단백질들은 리간드인 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine과 결합하여 형광성을 보유함을 보였다. 따라서 이들은 형광성을 지니게 되는 최소 크기의 루마진... -
ErmSF의 N-Terminal End Region에 존재하는 $^{60}RR^{61}$의 23S rRNA Methylation에서의 역할
진형종, Jin. Hyung-Jong 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2008, Vol.44 No.3 193-198 (6 pages)
ErmSF는, 235 rRNA의 A2058에 methylation 시켜서 macrolide-lincosamide-streptogramin B ($MLS_B$)계 항생제의 부착을 저해함으로써 항생제의 활성을 억제하는 내성인자 단백질인 ERM 단백질의 하나로, 다른 ERM 단백질과는 달리 긴 N-terminal end region을 가지고 있고 이 부위의 25%를 arginine이 차지하고 있다. 특히 $^{58}RARR^{61}$ 부위에 arginine이 모여 있어서 여기에 존재하는 R의 역할을 알아보기 위해 1-57, 1-59 그리고 1-60과 1-61이 제거된 결손 변이 단백질을 대장균에 발현하고 그 활성을 성장곡선을 작성하여... -
Synechocystis sp. PCC 6803의 에너지 대사 결함 돌연변이 균주에서의 Poly(3-hydroxybutyrate) 축적량 증진
김수연, 최강국, 박연일, 박영목, 양영기, 이영하, Kim. Soo-Youn, Choi. Gang Guk, Park. Youn Il, Park. Young Mok, Yang. Young Ki, Rhee. Young Ha 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2005, Vol.41 No.1 67-73 (7 pages)
본 연구에서는 남세균인 Synechocystis sp. PCC 6803 (Syn6803)을 대상으로 transposable element Tn5를 이용하여 획득된 1,200여 돌연변이주로부터 모균주에 비하여 PHB 축적량이 크게 증진된 균주를 선별하고, Tn5 삽입에 의해 결함을 나타낸 유전자를 확인함으로써 Syn6803에서의 PHB 생합성에 영향을 주는 세포내 생리학적 요인을 조사하고자 하였다. 모균주인 야생형 균주의 경우 질소원이 제한된 $BG11_0$ 배지에서의 PHB 생합성량이 건체량의 $4\%$ (w/w) 수준인데 반하여, $10-34\%$의 생합성량을 보이는 25개의 돌연변이 균주를... -
Saccharomyces cerevisiae의 감수분열 특이적 Protein Kinase인 Ime2의 역할
임선희, 탁연수, 선우양일, Leem. Sun-Hee, Tak. Yon-Soo, Sunwoo. Yang-Il 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1999, Vol.35 No.4 258-265 (8 pages)
연구는 IME2 유전자가 protein kinase 로서 감수분열기의 어떤 과정에 직접 관여하는가를 조사하기 위하여 먼저 PCR mutagenesis를 통하여 온도감수성 ime2 변이주를 분리하였다. 전체 62개의 온도감수성 변이주 중에서 온도에 따른 포자형성능과 감수분열기 재조합 빈도에 대하여 명확한 차이를 나타내는 3종류의 변이주들(ts ${cdot}$ ime2-11, ts ${cdot}$ ime2-12와 ts ${cdot}$ ime2-13)을 선택하였다. 이러한 3종류의 온도감수성 변이주를 이용하여 제한온도에서 감수분열기 초기과정 중 결손을 조사하기 위해, FACScan analysis를... -
효모 ABF1 단백질의 DNA Binding 부위에 대한 구조 기능 연구
조기남, 이상경, 김홍태, 김지영, 노현모, 전구홍, Cho. Gi-Nam, Lee. Sang-Kyung, Kim. Hong-Tae, Kim. Ji-Young, Rho. Hyune-Mo, Jung. Gu-Hung 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.2 102-108 (7 pages)
분리된 ABF1이 ARS1에 결합하는 능력을 지니고 있음을 확인하였다. DNA 결합에 관련된 부위를 찾기 위하여, 비전형적인 zinc finger motif가 위치하는 자리에서 pMAHW의 ABF1 유전자에 His-61을 다른 아미노산으로 치환하였다. DNA binding 부위로 추정되는 ABF1 단백질의 중간지역에 Leu-353, Leu-360를 다른 아미노산으로 치환하였다. Site-specific mutagenesis 를 통해 만들어진 mutant를 gel retardation analysis와 complementation test를 통해서 비전형적인 zinc finger motif이외에 다른 DNA binding motif가 있는 것을 알... -
$lambdaP_{R}$ 프로모터 열린복합체 형성에 미치는 DNA melting 부위 염기서열의 영향
정현채, 노정혜 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1990, Vol.28 No.1 19-26 (8 pages)
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Transposon Tn5를 이용한 Slow growing Rhizobium japonicum의 돌연변이 유도
김성훈, 이윤, 선대규, 유익동 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1988, Vol.26 No.4 305-311 (7 pages)
coli WA 803/pGS9과의 conjugation을 통한 transposon mutagenesis를 실시하였다. 이때 C conjugation을 통한 Tn5 전이 빈도는 $1.0 imes 10^{-5}-5.0 imes 10^{-7}$ 범위 이였으며, 얻어진 transconjugant들은 spectinomycin (($100{mu}$g/ml)과 kanamycin ($50{mu}$g/ml)을 함유한 yeast extract-mannitol 배지에서 8-10일 배양후 colony를 형성하였다. 또한 transconjugant들은 genome상에 Tn-5를 함유하고 있음을 hybridization-을 통하여 확인하였다. 한편 nodule은 형성 하나 질소고정 활성이 없는 돌연변이주 R. japonicum RMa 75...


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