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볏짚 유래 수용성 탄수화물 생산에 있어 cellulase, hemicellulase 및 xylanase 최적혼합조건
조상범, 이상석, 김창현, 류경선, 박희준, 명현, 최낙진, Cho. Sang-Buem, Lee. Sang-Suk, Kim. Chang-Hyun, Ryu. Kyeong-Seon, Park. Hee-Jun, Myong. Hyun, Choi. Nag-Jin 한국생명과학회 생명과학회지 6 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2012, Vol.22 No.1 74-79 (6 pages)
g/l로 낮아질 경우, hemicellulase의 활성은 낮아지지만 cellulase는 높은 활성으로 유지되었다. 효소반응액에 포함된 볏짚의 수준, hemicellulase 및 xylanase의 상호작용을 Box Behnken design과 반응표면모형을 이용하여 분석한 결과 hemicellulase과 xylanase 간의 상호작용이 발견되었으며, 각각의 효소들을 0.55 mg/ml와 0.65 mg/ml로 혼합하는 것이 볏짚의 수준과는 상관없이 가장 많은 수용성 탄수화물을 생산하는 결과를 나타내었다. 따라서, 결과적으로 볏짚의 효소처리를 통한 수용성 탄수화물의 생산에 있어 cellulase가 가장... -
Bacillus alcalophilus AX2000 유래 xylanase 유전자 (XynT)의 Cloning과 염기서열 분석
박영서, Park. Young-Seo 한국생명과학회 생명과학회지 5 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.5 734-738 (5 pages)
염기배열을 분석한 결과 유전자의 크기는 1,020 bp이었고 이는 340개의 아미노산으로 구성된 분자량 40 kDa의 poly-peptide를 coding하고 있었다. 이 염기배열은 AUG 개시 codon으로부터 각각 259와 282 base상류에 TACAAT의 -10 box와 GTTCACA인 -35 box로 추정되는 염기배열이 존재하였으며 ribosome 결합부위가 존재하였다. B. alcalophilus AX2000의 xylanase와 아미노산배열의 유사성이 가장 높은 xylanase는 Bacillus sp. N137과 B. stearothemophilus 21 유래의 xylanase로 각각 $61\%$와 $59\%$의 유사성을 나타내었다. -
Bacillus Pumilus TX703 유래 Xylanase의 활성에 관여하는 아미노산 잔기의 확인
박영서, Park. Young-Seo 한국생명과학회 생명과학회지 8 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.4 633-640 (8 pages)
Bacillus pumilus TX703으로부터 xylanase를 정제한 후 효소의 활성부위를 조사하기 위하여 여러 가지 화학수식제를 사용하여 효소활성의 저해도를 측정하였다. 여러 가지 화학수식제 중에서 carbodiimide와 N-bromosuccinimide가 효소활성을 완전히 저 해시 켜 glutamic acid 또는 aspartic acid 잔기와 tryptophan 잔기가 효소의 활성부위에 관여하리라 추측되었다. 각각의 경우에 효소 실활은 수식제의 첨가농도에 따라 pseudo first-order kinetics 양식을 보여주었으며, car-bodiimide와 N-bromosuccinimide는 각각 비경쟁적 저해와... -
Optimization of Xylanase Production from Paenibacillus sp. DG-22
Lee. Yong-Eok 한국생명과학회 생명과학회지 8 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2003, Vol.13 No.5 618-625 (8 pages)
birchwood xylan에서 가장 높은 생산율을 나타내었다. 조사된 여러 질소 원들 중 효모추출물이 xylanase생산을 위하여 최적이었다. xylanase의 활성은 $Co^{2+},; Cu^{2+},; Fe^{3+},; Hg^{2+};$ 와$; Mn^{2+}$ 이온들에 의하여 억제된 반면 $Ca^{2+},; Mg^{2+},; Ni^{2+},; Zn^{2+}$ 이온들과 DTT에 의해서는 촉진되었다. 수은은 5 mM의 농도에서 xylanase 활성을 완전히 파괴하였다. 자일란 가수분해의 주된 산물은 자일로바이오스, 자일로트라이오스 그리고 자일로 올리고당이었고 이것은 이 효소가 endoxylanase라는 것을 나타낸다. -
Bacillus pumilus TX703 유래 Xylanase 유전자(xynK)의 Cloning과 염기서열 분석
한국생명과학회 생명과학회지 2002, Vol.12 No.2 188-199 (12 pages)
cloning을 위해 제한효소 HindIII로 절단한 B. pumilus TX703의 chromosomal DNA와 pUC19을 ligation시켜 E. coli DH5 $alpha$에 형질전환시킨 후 형질전환체 중에서 xylanase 활성을 나타내는 재조합 plasmid pXES106을 분리하였다. 재조합 plasmid pXES106은 pUC19의 HindIII 부위 내에 2.24 kb의 외래 DNA가 삽입되었고, 이 plasmid DNA를 분리하여 E. coli DH5 $alpha$에 재형질전환시킨 결과 vector 내에 xylanase 유전자가 cloning되었음을 확인하였다. Cloning된 유전자의 염기배열을 분석한 결과 이 유전자의 총 크기는 2,187... -
Xylanase-producing Bacillus subtilis isolated from spent mushroom (Pleurotus eryngii) substrates
조지중, 홍수영, 하준, 조용운, 김홍출, 갈상완, 윤한대, 조수정, Cho. Ji Jong, Hong. Su Young, Ha. Jun, Cho. Young Un, Kim. Hong Chul, Gal. Sang Wan, Yun. Han Dae, Cho. 한국버섯학회 한국버섯학회지 8 Pages
한국버섯학회 한국버섯학회지 2008, Vol.6 No.3 138-145 (8 pages)
채취한 버섯폐배지로부터 그람양성이며 내생포자를 형성하는 간균을 분리하여 이를 CS9라 명명하였다. 분리균 CS9는 통성혐기성균으로 운동성이 있으며 xylanase를 생성하였다. 분리균의 최적 생육조건은 $40^{circ}C$, pH 6.0이었고, 지방산 조성분석 결과 세포벽을 이루는 주요지방산은 anteiso-C15:0, anteiso-C17:0, iso-C17:0이었으며, DNA G+C함량은 45 mol%로 Bacillus 속의 G+C함량인 43-46 mol%의 범위에 속하는 것으로 확인되었다. 분리균의 16S rDNA 염기서열을 분석한 결과, 분리균 CS9은 Bacillus subtilis YB1 균주와... -
Paenibacillus woosongensis의 Xylanase 유전자 클로닝과 특성분석
윤기홍, Yoon. Ki-Hong 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2012, Vol.48 No.2 141-146 (6 pages)
glycosyl hydrolase family 11에 속하며 Paenibacillus의 xylanase와 85-89% 상동성을 보였다. Xylanase 유전자를 T7 promoter로 과잉발현한 결과 그 발현량이 높지 않았으며, 균체내 외에서 모두 효소활성이 관찰되었다. 재조합 대장균의 균체파쇄상등액을 사용하여 효소 반응특성을 조사한 결과 pH 5.5와 $60^{circ}C$에서 최대 반응활성을 보였다. 한편 xylanase의 기질로 xylan과 xylooligosaccharides를 사용하였을 때 xylose와 xylotriose가 주된 최종 반응산물로 관찰되었으며 xylobiose는 분해하지 못하였으나 이보다 중합도가 큰... -
Paenibacillus donghaensis JH8에서 세포외 Xylanase의 특성
임채성, 오용식, 노동현, Lim. Chae-Sung, Oh. Yong-Sik, Roh. Dong-Hyun 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2011, Vol.47 No.1 81-86 (6 pages)
약 55 miliunit에 도달하였다. 세포외성 xylanase의 최적온도와 pH는 각각 $40^{circ}C$와 pH 6.0이였다. Xylanase의 활성은 $Ca^{2+}$ 및 $Mn^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Al^{3+}$, EDTA의 존재에 의해 억제되었고, $K^+$, $Ag^+$, DTT에 의해 활성화되었다. 이 xylanase는 $40^{circ}C$에서 120분간 활성을 유지하며 안정하였지만, $60^{circ}C$에서는 30분에서 거의 모든 활성을 잃어버리는 특성을 보여주었다. 농축된 배양 상등액의 zymography 분석시 42 kDa의 주 밴드와 68과 120 kDa에 두 개의 아주 희미한 밴드를 나타내었다. -
꿀벌(Apis mellifera)의 장내 세균인 Bacillus sp. HY-20이 분비하는 Xylanase의 특성
이란희, 김도영, 한미경, 오현우, 함수진, 박두상, 배경숙, 석대은, 신동하, 손광희, 박호용, Lee. Lan-Hee, Kim. Do-Young, Han. Mi-Kyoung, Oh. Hyun-Woo, Ham. Su-Jin, Park. Doo-Sang, Ba 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2009, Vol.45 No.4 332-338 (7 pages)
꿀벌(Apis mellifera)의 장으로부터 xylan분해능이 우수한 세균 HY-20을 분리하였고, Bacillus 속으로 동정하였다. 분리균주 HY-20의 세포 외 GH11 xylanase (XylP) 유전자 (687-bp)는 25,522 Da의 분자량과 9.33의 pI 값을 갖는 228개의 아미노산으로 구성된 단백질을 인코딩하는 것으로 확인되었으며, 지금까지 특성규명이 이루어지지 않은 B. pumilus xylanase (GenBank accession no.: AY526092)의 아미노산 서열과 97%의 상동성을 보였다. pET-28a(+)/xylP를 포함하고 있는 Escherichia coli BL21 균주에서 과발현 된 His-tagged... -
Bacillus circulans 기원의 Cellulolytic Xylanase 유전자의 대장균에서의 클로닝 및 발현
이동석, 김지연, 김한복 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2000, Vol.36 No.3 196-202 (7 pages)
Bacillus circulans ATCC21367의 Cellulolytic Xylanase 유전자를 pUC19을 vector 로 하여 대장균내에서 클로닝 하였다. 재조합 plasmid pXL180은 B. circulans 로부터 유래 된 0.5 kb와 1.3 kb Pst I 절편으로 이루어진 총 1.8 kb 삽입 절편을 포함 하고 있었다. 1.3 kb 절편의 상류영역에 있는 0.5 kb 절편은 클로닝된 유전자의 정상 발현뿐만아니라 과잉 발 현에 대해서도 필수 불가결함을 확인하였다. 형질전환체는 모균 B. circulans에 의해 생산된 것보다 135배 이상 많은 xylanase를 생산하였다. 클로닝된 효소의 최적 pH와...