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해양방선균으로부터 Haloperoxidase의 검색과 특성
조기웅, Cho. Ki-Woong 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2008, Vol.44 No.2 116-121 (6 pages)
생리.생화학적 특성은 Streptomyces 속과 유사하며 생산되는 haloperoxidase는 세포 조 추출물로부터 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, gel permeation chromatography, Hydroxyapetite chromatography 그리고 hydrophobic interaction chromatography를 통하여 42%의 수율과 purification fold 70으로 정제하였다. 본 효소의 최적 반응 pH는 7이고 pH 8에서 더 높은 안정성을 보여 $60^{circ}C$에서 1시간 반응에 효소활성의 50%가 생존한다. 또 cyanide와 azide 이온에 의해 강한 저해현상을 보인다. -
남극에서 분리한 저온성 세균 유래 단백질 분해 효소
조기웅, 방지헌, 홍혜원, 박승일, 이윤호 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2002, Vol.38 No.4 254-259 (6 pages)
최적 생육을 보이는 저온성 균주를 남극해양에서 분리하여 생화학적 특성 및 165 rRNA 염기서열로부터 Shewanella sp.에 속하는 균주로 동정하고 Shewanella sp. L93으로명명하였다. 본 균주에서 생산되는 저온성 세포외 단백질 분해 효소(extracellular protease)를 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, 일차 gel permeation chromatography, BioScale Q2 ion exchange chromatography 및 gel permeation chromatography를 통하여 purification fold 19.3, yield 0.7 %로 정제하였고 그 특성을 조사하였다. -
배양조건과 정제방법 개선을 통한 탄저균 방어항원의 생산
김성주, 조기승, 최영길, 채영규 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2001, Vol.37 No.1 21-27 (7 pages)
Bacillus anthracis Sterne 34F$_2$균주로부터 PA를 생산하기 위해 RM배지를 변형하였다. NaHCO$_3$를 8 g/l에서 10 g/l로, glucose를 5 g/l로 첨가하여 새로운 배지조성에서 탄저균을 배양한 후, 배양액을 hydroxyapatite를 이용하여 농축하였다. 농축된 조단백질을 hydroxyapatite column chromatography, DEAE-Sepharose CL-4B column chromatography 및 Toyo-pearl gel filtration chromatography를 사용하여 PA를 정제하였다. 변형된 RM 배지를 사용해 얻은 PA 양은 8.6 mg/l 이었다. -
Saccharomycopsis속과 Saccharomyces속의 잡종형성 균주에서 생산하는 ${alpha}$-amylase의 특성
양영기, 문명님, 임채영, 이영하, 김정호, Yang. Young-Ki, Moon. Myeng-Nim, Lim. Chae-Young, Rhee. Young-Ha, Kim. Jeong-Ho 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1999, Vol.35 No.4 315-321 (7 pages)
후 ammonium sulfate 침전, DEE-Sephacel column chromatography, Sephacryl S-200 column chromatography 등의 정제과정을 통해 9.7%의 회수율로 약 10.6배 정제 된 효소를 얻을 수 있었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE 전기영동을 통해 단일 band를 보여 주었으며, SDS-PAGE 와 Sephacryl S-200 column chromatography를 통해서 53kDa으로 나타났다. 정제효소의 최적 활성 온도는 40${circ}C$이고, 안정성은 40~45${circ}C$로 나타났다. 최적 활성 pH는 5.5이었고, pH 5.0~7.0 정도에서 pH안정성이 80%정도 유지되었다. 가용성 전분에 대한... -
Streptomyces diastatochromogens로부터 제한효소 SdiI의 분리정제
배무, 송은숙, Bae. Mu, Song. Eun-Suk 한국미생물학회 미생물학회지 4 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.4 297-300 (4 pages)
토양에서 분리한 방선균에서 제한효소 활성을 조사하여 그 가운데 Streptomyces diastatochromogenes로부터 제한효소 활성을 확인하였다. 이 균주의 제한효소 SdiI을 균체 15g으로부터 streptomycin sulfate침전, ammonium sulfate 침전, hydroxylapatite colume chromatography, Sephacryl S-200 HR column chromatography, hydroxylapatite column chromatography의 단계를 거쳐 분리하였고, SDS-polyacrylamide gel-electrophoresis에 의하면 소단위체 분자량은 약 35,000Da으로 추정되었다. -
Purification and Cellular Localization of Extracellular Nuclease of Serratia marcescens Expressed in Escherichia coli
김외연, 이훈실, 서숙재, 조무제, 이상열, 김재원, Kim. Woe-Yeon, Lee. Hoon-Sil, Suh. Sook-Jae, Cho. Moo-Je, Lee. Sang-Yeol, Kim. Jae-Won 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.2 147-154 (8 pages)
Matrex green gel과 heparin agarose gel column chromatography법으로 약 50배 정제한 효소는 분자량이 29KDa였으며, 전기영동 상에서 단일 띠를 보였다. 이 단백질을 이용하여 polyclonal antibody를 만들고, 면역조직화학법으로 세포내의 분포를 조사하였다. Nuclease는 주로 세포막에 존재하였고, 이를 토대로 효소가 세포질에서 합성된 후 세포막으로 빠르게 이동함을 알 수 있었다. 이 결과는 세포의 막분획에서 효소의 활성의 대부분이 회수되며, 면역블럿 방법으로 효소의 대부분이 세포막에서 검출된다는 결과와 일치하였다. -
Micrococcus luteus에서 정제한 Isocitrate Lyase의 특성
정기택, 서승교, 우철주, 박임동, 정병태, 박영호 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1993, Vol.31 No.3 230-236 (7 pages)
Sephadex G-200 column chromatography 과정을 통하여 분리 정제하였으며 정제된 효소의 분자량과 효소학적 특성을 조사하였다. 정제된 isocitrate lyase 는 상기 정제 과정을 통하여 10.2%의 회수율과 38.8 의 정제도를 나타내었으며, 전기영동시 단일밴드를 얻을 수 있었고, SDS-PAGE 에 의해 측정된 분자량을 약 60,000이며 1개의 subunit 로 나타났다. 본 효소의 최적 pH 는 7.5이었으며, 최적 온도는 $40^{circ}C$ 부근이었고 $45^{circ}C$까지는 안정하였다. 2가 금속염의 첨가시$ Mg^{2+}$ 를 제외한 다른 금속이온들은 효소활성을... -
효모 Pichia burtonii Y257-7에 의한 ${alpha}$-Glucosidase 저해제의 생산 및 식후 혈당 상승 억제 효과
김영헌, 신자원, 이종수, Kim. Young-Hun, Shin. Ja-Won, Lee. Jong-Soo 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2014, Vol.42 No.3 219-224 (6 pages)
syringe filter unit로 여과한 후 Sephadex G-50 column chromatography와 연속 용매 추출을 실시하여 부분정제한 후 일반 쥐와 당뇨유발 쥐를 이용하여 항당뇨 효과를 조사하였다. 정상 쥐와 streptozotocin으로 당뇨를 유발시킨 당뇨유발 쥐에 Pichia burtonii Y257-7이 생산하는 ${alpha}$-glucosidase 저해제의 부분정제물을 전분과 함께 500 mg/kg, 1000 mg/kg 농도로 경구 투여한 결과, 시판 혈당강하제인 acarbose보다는 효과가 낮았지만 농도 의존적으로 정상 쥐와 당뇨유발 쥐 모두에서 혈당 상승 억제 효과를 확인할 수 있었다. -
Eisenia bicyclis 에탄올 추출물로부터 분리한 Dieckol의 Lipase 저해 Mode
정슬아, 김꽃봉우리, 김동현, 조지영, 김태완, 안동현, Jung. Seul-A, Kim. Koth-Bong-Woo-Ri, Kim. Dong-Hyun, Cho. Ji-Young, Kim. Tae-Wan, Ahn. Dong-Hyun 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2013, Vol.41 No.1 112-118 (7 pages)
대황 ethyl acetate 분획은 $IC_{50}$ 값이 1.31 mg/ml으로 에탄올 추출물보다 높은 lipase 저해활성을 나타내었다. Silicagel column chromatography를 이용하여 ethyl acetate 분획으로부터 얻은 sub-fraction 중 EA1 fraction이 $IC_{50}$ 값 0.54 mg/ml로 가장 높은 저해활성을 보였으며 더 나아가 HPLC를 이용하여 8개의 sub-fraction으로 분리하였다. HPLC fraction 중 fraction 5가 $IC_{50}$ 값 0.37 mg/ml로 높은 lipase 저해활성을 보였다. 이 fraction 5는 분자량 741.1로 $C_{36}H_{22}O_{18}$ 화합물인 phlorotannin... -
Mortierella sp. 유래 ${alpha}$-Galactosidase의 기질특이성
박귀근, Park. Gwi-Gun 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2011, Vol.39 No.3 245-251 (7 pages)
sp. 유래 효소 정제는 CM-sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-100 column에 의해 수행하여 SDS-전기영동에서 단일밴드를 확인하였고 분자량은 57kDa로 결정되었다. melibiose, raffinose 및 stachyose의 세 종류의 기질에 대한 특이성에서는 Mortierella sp. 유래 정제 ${alpha}$-galactosidase는 세 종류 기질의 비환원말단에 위치하고 있는 galactose를 모두 유리하는 특이성이 있음을 확인하였다. Bacillus sp. 유래의 $Gal^3Man_4$에 대해서 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 반응말기에서는 galactose,...