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Pseudomonas putida 유래 Methioninase의 정제 및 생체내 ^11C-Methionine 섭취에 미치는 영향
변상성, 박귀근 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2003, Vol.31 No.4 377-382 (6 pages)
650 M ion exchange column chromatography 및 2차DEAE-Sephadex A-50 ion exchange column chromatography에 의해 정제를 수행한 결과 15.92 units/mg의 정제배율 및 비활성은 92배, 정제 효소의 순도는 SDS-PAGE에 의해 단일 밴드를 나타내었으며, 분자량은 43kDa으로 추정되었다. 래트의 대장암 세포인 RR1022세포와, 사람의 난소암 세포인 SKOV-3 세포에서 RPMI1640 배지와 methionine이 결핍된 RPMI1640 배지를 처리한 결과 정상군에 비해 대조군의 $^{11}$ C-methionine의 섭취 변화가 증가하였다. 종양세포인 RR1022, SKOV-3세포에... -
Enterococcus sp. JA-27에 의한 가용성 전분으로부터 L형 젖산의 생산
김경아, 김미경, 장경린, 전홍기 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2003, Vol.31 No.3 250-256 (7 pages)
제공하기 위하여 회분배양과 유가배양을 실시하였고, 회분배양이 L-lactic acid의 생산수율(0.134 g, L-lactic acid/g, soluble starch)이 더 높게 나타나 효과적이었다. 7 L 발효조 배양시 pH를 control한 결과, L-lactic acid 생산이 삼각플라스크에 비해 1.5배 더 증가하였다. 배지 중의 젖산을 정제하기 위한 방법으로 이온교환 칼럼크로마토그라피(ion-exchange column chromatography)를 사용하였고 일련의 정제 과정을 통하여 배양액 중의 L-lactic acid 정제 수율은 약 85% 정도로 나타났으며 HPLC로 분석한 결과 99.7%의 순도를... -
옥수수 글루텐 효소 가수분해물의 Angiotensin I Converting Enzyme 활성 저해 펩타이드의 정제
오광석, 이동건, 홍정운, 성하진 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2003, Vol.31 No.1 51-56 (6 pages)
옥수수 글루텐을 Flavourzyme, Pescalase, 그리고 Thermolysine/Pescalase 등으로 가수분해하여 얻은 가수 분해물로부터 ACE 활성 저해 펩타이드를 다음과 같은 과정으로 분리, 정제하였다. 10% 에탄올로 평형화된 ODS chromatography를 이용 단백질 분획들을 얻고, Bio-Gel P-2 column과 reverse phase HPLC를 통해 5개의 ACE 저해 펩타이드를 분리, 정제하였다. 그 아미노산 서열은 LPF($IC_{50}$ = 40 $mu$M), GPP($IC_{50}$ = 17.6 $mu$M), PNPY($IC_{50}$ = 30.7 $mu$M), SPPPFYL($IC_{50}$/ = 63 $mu$M), and SQPP($IC_{50}$ =... -
Streptomyces polychromogenes IFO 13072가 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 효소학적 특성
김현수, 성림식, 이경화, 이용직, 이인선, 유대식 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2002, Vol.30 No.2 142-150 (9 pages)
cholesterol affinity column chromatography를 통하여 23.2%의 수율로 정제되었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE에서 단일한 밴드를 보였으며, 분자량은 약 52,000 Da으로 추정되었다. 본 효소의 특성을 검토한 결과, 최적 온도와 최적 pH는 각각 $37^{circ}C$, pH 7.0이었으며, 효소의 안정성은 온도 $25^{circ}C$, pH 6.0~7.0의 범위까지 안정한 것으로 나타났다. 또한 본 효소는 금속이온으로 Hg와 Fe 이온의 존재시 크게 저해를 받았고, dithiothreitol과 mercaptoethanol, Isonicotinic acid와 같은 저해제에 의해서 상당히 실활 되었다.... -
Phytopathogenic fungus Alternaria brassicicola SW-3가 생산하는 항암활성 물질의 분리 정제
나여정, 이방숙, 남궁성건, 정동선 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2002, Vol.30 No.1 51-56 (6 pages)
이용하여 15$^{circ}C$에서 2주간 진탕 배양한 다음, MTT assay를 실시하여 항암활성을 확인하였으며, 배양여액 중의 항암물질은 ethyl acetate로 추출하고, silica gel column chromatography로 정제하여 무색의 oily product를 얻었다(수율 22mg/m1). 분리된 물질은 물이나 hexane에는 녹지 않고, chloroform, ethyl acetate, ethanol 등에는 잘 녹는 특징을 보였으며, , $IR^{1}$H-NMR, $^{13}$C-NMR 등을 통해 구조를 분석한 결과, 최근에 일본에서 분리되어 항암효과가 있는 것으로 알려진 depudecin과 동일한 물질로 추정되었다. 본... -
Aspergillus sp. F184가 생산하는 Xanthine Oxidase 저해제에 관한 연구
박시형, 윤상웅, 박정민, 옥승호, 유주현, 배동훈 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 2000, Vol.28 No.2 92-96 (5 pages)
HP-20 adsorption column chromatography, ethyl acetate 추출, silica gel column chromatography, 결정화 등을 실시하여 xanthine oxidase에 대한 저해물질을 분리, 정제하였다. 본 저해물질의 구조를 NMR 및 MS 스펙트럼을 측정하여 분석한 결과 5,6-epoxy-2-hydroxy-3-methyl-2-cyclohexene-1,4-dione으로서 terreic acid로 동정되었다. Terreic acid의 xanthine oxidase에 대한 저해활성을 조사한 결과 IC50가 1.1$ imes$10-7M로서 기존의 저해제인 allopurinol과 유사하였다. 이에 terreic acid에 의한 xanthine oxidase 저해활성은... -
생물방제균 Pseudomonas sp. 3098이 생산하는 Chitinase의 정제 및 특성
이종태, 김동환, 도재호, 김상달 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.6 515-522 (8 pages)
길항미생물로 분리.동정된 Pseudomonas sp. 3098이 생산하는 chitinase를 황산암모늄 침전, DEAE-cellulose column chromatography, Bio-Gel P-100에 의한 겔여과, 1차 및 2차 hydroxyapatite column chromatography 과정을 거쳐 회수율 5.8%,정제도 15.7배의 정제효소를 얻었고, 효소의 순도는 SDS-PAGE로 확인하였으며, 분자량은 45kDa으로 추정되었다. 정제된 chitinase의 최적 온도와 pH는 45$^{circ}C$와 5.0이었고, 정제효소는 pH 5.0~9.0 사이에서 안정하였고, 5$0^{circ}C$, 3시간 및 6$0^{circ}C$, 30분까지는 비교적... -
황기 종자의 천연 항진균성 단백질의 분리정제 및 특성검정
구본성, 류진창, 정태영, 김교창 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.5 379-386 (8 pages)
본 연구에서는 천연 항균물질의 개발 이용을 위해 황기 종자로부터 인체에 무해한 천연 항균 단백질을 ion exchange chromatography 및 gel filteration을 이용하여, 순수 분리하고 특성을 조사하였다. 황기종자로부터 추출한 천연 항균 단백질은 Aspergillus ocraceus, Penicillium expensum, P. digitatum, Botrytis cineria의 포자 발아 및 효모인 Candida albicans의 생육을 현저하게 저해하였으며 ammonium sulfate 포화도가 0.4일 때 단백질의 침전량이 122.6 $mu extrm{g}$/$mell$로 가장 많았고 항균력도 15.2 mm로 가장 높게... -
곰팡이에서 분리한 Helicobacter pylori 항균물질의 분리 및 구조규명
남궁준, 연승우, 백남수, 김태한, 김영호, 김창진, 김기원 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.2 137-142 (6 pages)
및 EtOAc로 추출하였고, 얻어진 추출액을 silica column chromatography와 LH-20 gel chromatography를 수행하여 활성분획을 농축하였고 HPLC를 사용하여 항균 활성을 나타내는 단일물질 IDA를 분리 정제하였다. 항균 활성물질 IDA의 구조를 MS, NMR 분석등을 통해 추정한 결과 곰팡이의 2차 대사산물인 cytochalasan의 전형적 구조를 갖는 분자식 $C_{32}H_{36}N_2O_5$의 chaetoglobosin A라는 물질로 판명되었다. 항균물질 IDA의 항균력을 paper disk법으로 실험한 결과 그람양성 균주중에서는 S. aureus SG 511, 285와 503 3주에서만... -
항생물질을 생산하는 Clostridium sp. KH-431의 동정 및 항생물질의 정제
홍수형, 김미정, 박용복, 이재근, 하지홍 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1993, Vol.21 No.1 41-46 (6 pages)
생산을 위한 최적 배양조건에 대해 고찰한 결과 PY배지를 기초배지로 사용하고 sorbitol, yeast extract, d-biotin 그리고 $CaCl_2$를 영양원으로 첨가하였을 때가 양호한 것으로 나타났다. 배지초기 pH 및 배양온도 배양시간에 대한 최적조건은 각각 pH7과 $30^{circ}C$, 108시간으로 나타났다.20$ell$ 의 배양액으로부터 solvent extraction, silica gel column chromatography를 거쳐 얻은 sample을 재결정한 결과 KG-431B는 순수한 결정상태로 얻어졌으나 KG-431A의 완전정제에는 많은 문제점이 뒤따른 바 현재 다른 정제방법의...


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