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대장균과 포유류 세포 내에서 parkin의 발현 양상에 관한 연구
남민경, 박혜민, 최주연, 박효진, 정광철, 강성만, 임향숙, Nam. Min-Kyung, Park. Hye-Min, Choi. Ju-Youn, Park. Hyo-Jin, Chung. Kwang Chul, Kang. Seong man, Rhim. Hya 한국생명과학회 생명과학회지 7 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.6 916-922 (7 pages)
이상의 순도를 가지는 완전한 크기의 Parkin을 정제할 수 있었다. 또한, 여러 tag을 갖는 Parkin plasmid를 제작하였을 뿐만 아니라, 이들을 HEK293 세포에 transfection하여 Parkin의 발현 양상을 비교 분석하였다. 그 결과 Parkin의 N-말단에 pretense에 민감한 절단 부위가 존재한다는 사실을 확인하였다. 본 연구에서 정립한 Parkin 정제법과 포유류 세포에서 Parkin의 발현 양상에 대한 결과는 Parkin의 기질을 탐색하고,그들이 Parkin의 효소 활성 및 기능에 미치는 영향을 조사하기 위한 다양한 연구에 활용할 수 있을 것이다. -
호흡기질환 환자로부터 분리된 Mycoplasma pneumoniae의 tetracycline과 erythromycin에 대한 저항성 변이
장명웅, 박인달, 김광혁, 송갑영, 김성원, Chang. Myung-Woong, Park. In-Dal, Kim. Kwang-Hyuk, Song. Gap-Young, Kim. Sung-Won 한국생명과학회 생명과학회지 8 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.6 863-870 (8 pages)
M. pneumoniae 123 균주에서 plasmid DNA는 확인되지 않았다. 분리된 M. pneumoniae 123 균주 중에서 57($46.3\%$) 균주가 tetracycline에 저항성인 tetM유전자를 가지고 있었으며, 235 rRNA domain V에 erythromycin에 저항성 변이를 일으킨 균주가 60($48.8\%$)이었다. erythromycin에 저항성 변이를 일으키지 않은 63균주 중에서 tetM 유전자를 가지고 있는 균주는 36($57.1\%$)이었으며, erythromycin에 저항성 변이를 일으킨 60균주 중에서 21($35.0\%$ 균주가 tetM 유전자를 가지고 있었다. 본 연구로써 국내에서 tetracycline과... -
Bacillus alcalophilus AX2000 유래 xylanase 유전자 (XynT)의 Cloning과 염기서열 분석
박영서, Park. Young-Seo 한국생명과학회 생명과학회지 5 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.5 734-738 (5 pages)
후 형질전환체 중에서 xylanase 활성을 나타내는 재조합 plasmid pXTY99를 분리하였다. 재조합 plasmid pXTY99은 pUC19의 PstI 부위 내에 7kb의 외래 DNA가 삽입 되 었다. Cloning된 xylanase 유전자(xynT)의 염기배열을 분석한 결과 유전자의 크기는 1,020 bp이었고 이는 340개의 아미노산으로 구성된 분자량 40 kDa의 poly-peptide를 coding하고 있었다. 이 염기배열은 AUG 개시 codon으로부터 각각 259와 282 base상류에 TACAAT의 -10 box와 GTTCACA인 -35 box로 추정되는 염기배열이 존재하였으며 ribosome 결합부위가 존재하였다. B.... -
Saccharomyces cerevisiae에서 Paenibacilius macerans 유래 cycloinulooligosaccha-ride fructanotransferase의 발현
김현철, 김정현, 전숭종, 최우봉, 남수완, Kim. Hyun-Chul, Kim. Jeong-Hyun, Jeon. Sung-Jong, Choi. Woo-Bong, Nam. Soo-Wan 한국생명과학회 생명과학회지 6 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2005, Vol.15 No.3 317-322 (6 pages)
유전자(cft)를 Saccharomyces cerevisiae SEY2102에 발현시키기 위해 대장균과 효모의 shuttle vector인 pYES2.0에 subcloning 하였다. 구축된 pYGECFTN (8.6 kb) plasmid를 S. cerevisiae SEY2102에 형질전환하였고, uracil이 결핍된 SD 배지에서 선별하였다. cft 유전자는 선별된 형질전환체(S. cerevisiae SEY2102/pYCECFTN)에서 GAL1 promoter 조절하에 성공적으로 발현되어 cyclofructan(CF)을 생성함을 TLC로 확인하였다. 그러나, 균체 외로의 효소 분비는 이루어지지 않았고 cytoplasm보다 periplasmic space에 많이 존재하였다 S.... -
형질전환된 Escherichia coli변이주에서 Sodium citrate를 이용한 고농도 L-Threonine 생산
이만효, 김병진, 정월규, 최선욱, 박해룡, 황용일 한국생명과학회 생명과학회지 6 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2004, Vol.14 No.5 868-873 (6 pages)
C. glutamicum 유래의 pyruvate carboxylase의 유전자를 plasmid pPYC의 형태로 E. coli MT201에 도입하였다(E. coli MT/PYC). 그렇지만 E. coli MT/PYC을 배양한 결과로부터 E. coli MT201와 비교할 때 균체증식 및 생산량이 모두 감소하는 경향을 보였으며, 이를 해결하기 위하여 플라스크배양을 통하여 포도당과 sodium citrate를 1.5:3.5의 비율로 배지 중에 첨가하였을 때 이들 문제가 개선되는 것을 관찰하였다. 상기 비율의 탄소원 조건하에서 5liter 발효조를 이용한 유가식 배양에서 배양 75시간째에 L-threonine의 생산량 및... -
Bacillus subtilis에서 Bacillus stearothermophilus CGTase의 구성적 발현
허선연, 김중균, 권현주, 김병우, 김동은, 남수완 한국생명과학회 생명과학회지 5 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2004, Vol.14 No.3 391-395 (5 pages)
B. stearothermophilus NO2의 CGTase 유전자 (cgtS)를 구성적 $P_{JH}$ promoter 하류에 subcloning 하여 재조합 plasmid pIH-CGT1 (8.14 kb)을 구축하고 B. subtilis DB431에 형질 전환하였다. B. subtilis DB431/pJH-CGT1를 5가지 배지(LB, 2${ imes}$LB, 5% molasses+2% CSL, CS, LBG)로 flask 배양하여 균체증식과 CGTase발현량 및 분비국재성을 조사하여 최적 배지를 결정하였다. 그 중 〔5% molasses+2% CSL〕 배지에서 9시간에 1.8 unit/$mell$의 CGTase가 발현$.$생산되었다. 이 결과를 토대로 3. subtilis DB431/pJH-CGT1를... -
Antibody 제작을 위한 human serine palmitoyltransferase 유전자의 발현
한국생명과학회 생명과학회지 2004, Vol.14 No.2 315-319 (5 pages)
RT-PCR을 행하여 cDNA library를 얻은 다음 SPTLC1 및 SPTLC2의 특이적인 primer 들을 이용하여 PCR을 행하였다. SPTLC1 및 SPTLC2 DNA를 hexahistidine fusion 단백질을 발현시킬 수 있는 pRset vector에 cloning하여 pRsetB/SPTLC1 및 pRsetA/SPTLC2를 얻고 염기서열을 확인하였다. 재조합 plasmid를 발현세포인 BL21 cell에 형질전환시킨 다음 ampicillin 및 chroramphenicol 배지에서 선별하여 재조합세포를 얻었다. 1 mM IPTG로서 발현을 유도하였으며 세포 단백질을 SDS-PAGE로 분리한 다음 His-tag antibody로 western blotting을... -
배양세포의 Type에 따른 Constitutive Androstane 수용체 (CAR)의 CYP2B PBRU 전사활성 효과: Hep G2와 COS 세포의 비교
한국생명과학회 생명과학회지 2003, Vol.13 No.3 324-332 (9 pages)
Hep G2 세포에서도 명백히 단백질의 발현을 관찰할 수 있었다. 또한, Hep G2와 COS세포 모두에서 endogenous RXR의 발현이 일어남을 확인하였고 RXR expression plasmid를 transfection시켰을 때 두 세포 모두에서 단백질의 발현이 현저하게 증가되었다. Constitutive Androstane Receptor (CAR)에 의한 CYP2B의 PBRU 활성효과를 다르게 분화된 세포에서 차이가 일어나는지를 비교하기 위하여 CAR에 의해 매개되는 PBRU의 transactivation효과를 Hep G2와 COS세포에서 조사하였다. Hep G2 세포에서는 transfection된 CAR의 발현에 의해... -
Bacillus pumilus TX703 유래 Xylanase 유전자(xynK)의 Cloning과 염기서열 분석
한국생명과학회 생명과학회지 2002, Vol.12 No.2 188-199 (12 pages)
chromosomal DNA와 pUC19을 ligation시켜 E. coli DH5 $alpha$에 형질전환시킨 후 형질전환체 중에서 xylanase 활성을 나타내는 재조합 plasmid pXES106을 분리하였다. 재조합 plasmid pXES106은 pUC19의 HindIII 부위 내에 2.24 kb의 외래 DNA가 삽입되었고, 이 plasmid DNA를 분리하여 E. coli DH5 $alpha$에 재형질전환시킨 결과 vector 내에 xylanase 유전자가 cloning되었음을 확인하였다. Cloning된 유전자의 염기배열을 분석한 결과 이 유전자의 총 크기는 2,187 bp였고 이는 409개기 아미노산을 coding 하는 open reading frame... -
유류분해균 Providencia rettgeri 4A3의 분리 및 원유분해 특성
김상우, 유주순, 이상철, 조영수, 이영춘 한국생명과학회 생명과학회지 7 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2001, Vol.11 No.6 530-536 (7 pages)
원유분해능이 강력한 해양균주를 얻고자 유류오염 지역 으로부터 crude oil을 탄소원으로 이용하는 십수종을 분리하였다. 분리된 균주중 원유분해 및 성장속도면에서 우수한 균주를 선별하여 형태학적, 생화학적 및 생리학적 특성을 조사한후 Providencia rettgeri 4A3로 동정하였다. 4A3균주의 원유분해를 위한 최적 배양조건은 배양온도 26$^{circ}C$로 비교적 낮은 온도였으며, 초기 pH는 7.0이었다. 또한, 이 균주는 2.0% 염분농도에서 최대의 성장을 보여주어 해양 유래의균주임을 확인하였다. 4A3균주의 유화활성은 26$^{circ}C$,...