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표고와 운치의 원형질체 융합균주의 항암작용
곽은경, 김하원, 심미자, 현진원, 김병각 한국응용약물학회 The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmaco 6 Pages
한국응용약물학회 The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmaco 2000, Vol.8 No.3 235-240 (6 pages)
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영지와 표고의 융합체의 면역활성 증강작용
문철, 현진원, 김하원, 심미자, 김병각 한국응용약물학회 The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmaco 7 Pages
한국응용약물학회 The journal of applied pharmacology : the official journal of the Korean Society of Applied Pharmaco 2000, Vol.8 No.2 199-205 (7 pages)
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효모세포의 전기융합 및 융합세포의 RAPD-PCR을 이용한 유전적 분석
김승, 김재성, 박인성, 조문구, 박열, 전홍성, 최봉석, 박세은, 최한석, 김명곤, 김성준, Kim. Seung, Kim. Jae-Sung, Park. In-Sung, Cho. Moon-Gu, Park. Yeal, Chun. Hong-Sung, Choi. B 한국응용생명화학회 한국응용생명화학회지 6 Pages
한국응용생명화학회 한국응용생명화학회지 2006, Vol.49 No.3 186-191 (6 pages)
: 1의 비율로 혼합하여 1.5 MHz/50 pV의 고주파를 가하였을때 paired protoplast가 형성되었으며, 615 $V/256;{mu}sec$의 고전압을 가한 결과 약 25% 정도의 융합체를 얻을 수 있었다. 선별된 융합주의 내당성과 내염성을 각각의 모균주와 비교하여 실험한 결과 50%의 glucose와 15%의 NaCl을 함유한 배지에서 모두 생육이 가능하여 각각의 균주 특성을 가지고 있음을 확인하였고, 또한 융합주를 $4^{circ}C$에서 5개월간 보관했을 때 약 28%정도가 모균주로 복귀되었지만, 72%의 융합안정성을 나타내므로 비교적 안정한 상태를 확인할 수... -
토마토 뿌리조직으로부터 두 단계 삼투압 처리에 의한 원형질체의 분리
신대섭, 한민우, 김영기, Shin. Dae-Seop, Han. Min-Woo, Kim. Young-Kee 한국응용생명화학회 한국응용생명화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국응용생명화학회지 2004, Vol.47 No.2 192-196 (5 pages)
이온채널의 활성을 포함한 세포의 생리활성을 측정하기 위하여 토마토의 뿌리조직으로부터 원형질체를 분리하였다. 일반적으로 널리 사용되는 원형질체 분리법은 뿌리조직의 경우 효율이 좋지 않았다. 따라서, 다양한 조건을 변화시키며 분리효율을 조사하던 중 두 단계의 삼투압 처리로 원형질체 분리효율이 높아짐을 확인하였다. 첫 단계로 뿌리조직을 300 mM sorbitol을 포함하는 용액에서 30분간 배양한 후, 700 mM sorbitol과 세포벽 분해효소를 포함하는 용액으로 옮겼을 때, 원형질체 형성은 급격히 증가하였다. 이러한 분리방법의... -
Biopolymer 생산성 Bacillus속 균주의 원형질체 형성과 재생
임무현, 김성호, Yim. Moo-Hyun, Kim. Seong-Ho 한국응용생명화학회 한국농화학회지 9 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1999, Vol.42 No.1 20-28 (9 pages)
Biopolymer를 생산하는 Bacillus속의 균주개량의 목적으로 biopolymer를 생산하는 균주인 Bacillus subtilis K-1과 유당 이용능이 있는 Bacillus coagulans의 원형질체 형성과 재생에 관하여 조사하였다. 영양요구성과 항생제 내성의 marker가 부여된 두 변이주의 원형질체 형성조건에서 Bacillus subtilis mutant SM-2의 경우, 대수기 중기에 penicillin G(1.0 unit/ml)를 첨가한 다음 1.5시간 반응 후 삼투압 안정제로서 0.4 M sucrose와 $25;{mu}g/ml$의 lysozyme이 함유된 lysis fluid(LF, pH 7.0)내에서 $37^{circ}$, 40분간... -
Biopolymer 생산성 Bacillus 속 균주의 세포융합과 융합주의 세포특성
임무현, 김성호, Yim. Moo-Hyun, Kim. Seong-Ho 한국응용생명화학회 한국농화학회지 8 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1999, Vol.42 No.1 12-19 (8 pages)
Biopolymer를 생산하는 Bacillus subtilis K-1과 유당 이용능이 있는 Bacillus coagulans를 융합시켜 획득된 융합주에 의해 생산된 biopolymer의 특성 변화, 생산성 향상의 연구의 일환으로 두균주의 융합을 시도하였고 융합주의 특성을 조사하였다. 원형질체 융합은 33% PEG(Mw. 6,000), 1% PVP, 10 mM $CaCl_2$이 함유된 fusion fluid(FF)에서 5분간 반응하였고, 항생제가 함유된 선별배지에 중층 후, 3일간 배양했을 때 Bacillus subtillus coagulans 변이주 들간의 융합빈도는 $4.6{ imes}10^{-5}{sim}1.8{ imes}10^{-7}$이었다.... -
${gamma}-Poly(glutamic;acid)$ 생산성 균주 Bacillus licheniformis 9945a의 형질전환 미 돌연변이 유도
정완석, 고영환, Chung. Wan-Seok, Ko. Young-Hwan 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1997, Vol.40 No.3 173-177 (5 pages)
그래서 점액질을 분비하지 않는, B. licheniformis의 자연발생적 변이주를 우선 분리하였다. Mini-Tn10을 함유한 plasmid pHV1248을 protoplast transformation법에 준해서 이 변이주에 도입하여 형질전환체를 분리하였다. pHV1248을 함유한 형질전환체를 점액성의 야생형질로 복귀시킨 후에, 가열처리함으로써 무작위 돌연변이를 유도하였다. Arginine, lysine 또는 tryptohan을 생육인자로 요구하는 돌연변이주들이 replica plating method에 의해서 분리되었고, 이 들 영양요구성 변이주는 mini-Tn10이 염색체 DNA상에 삽입됨으로써... -
Liposome을 이용한 Ti Plasmid의 꽃담배 원형질체내 도입
임명호, 정재동, 김인수, Lim. Myung-Ho, Jeong. Jae-Dong, Kim. In-Soo 한국응용생명화학회 한국농화학회지 6 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1994, Vol.37 No.5 343-348 (6 pages)
A. tumafaciens C58로부터 $^3H-thymidine$으로 표지한 Ti plasmid를 분리하여 lyophilization-rehydration법으로 octadecyl rhodamine B로 표지한 liposome에 내포시켰다. Liposome조제에 사용한 지질은 phosphatidylserine(PS)을 사용한 PS liposome과, PS와 cholesterol(Chol)을 같은 mole비로 섞은 PS-Chol이었다. 꽃담배 원형질체는 0.1% macerozyme과 1.5% cellulase를 처리하여 유리시키고 불연속성 농도구배 원심분리로 정제하였다. $^3H-Ti plasmid$를 포함하고 있는 liposome$(1;{mu}mole;PS)$을 5 mM $Ca^{2+}$과 10% PEG로... -
Marker gene의 직접삽입에 의한 transgenic plant의 제조 및 전기융합
홍경애, 류기중, 소인섭, 김양록, 유장걸, Hong. Kyung-Ae, Riu. Ki-Jung, So. In-Sup, Kim. Yang-Lok, U. Zang-Kual 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1993, Vol.36 No.6 562-566 (5 pages)
제라니움(Pelargonium zenale hybrids)의 원형질체에 외래유전자를 전기충격에 의해 직접도입시키는 조건을 methylene blue 염색법을 이용하여 조사하였다. 그 결과 1.77 kV/cm의 직류전압을 $40{mu};sec$ 동안 가해 주는 것이 제일 효과적이었으며 이때의 원형질체 생존율은 70% 염색율은 58%이었다. 정제한 pBin19 plasmid를 전기충격법으로 원형질체에 삽입시킨 뒤 kanamycin이 포함된 배지에서 배양하였으며 원형질체의 세포분열은 KM8P 액체배지에서 제일 높았다. 윈형질체의 최적 전기융합 조건은 교류 주파수 1 MHz를 40 V/cm에서... -
식물 원형질체에서의 marker gene 삽입
유장걸, 류기중, 소인섭, 홍경애, U. Zang-Kual, Riu. Key-Zung, So. In-Sup, Hong. Kyung-Ae 한국응용생명화학회 한국농화학회지 5 Pages
한국응용생명화학회 한국농화학회지 1993, Vol.36 No.6 557-561 (5 pages)
Polyethylene glycol(PEG)법 또는 electroporation법으로 제라니움 원형질체에 neomycin phosphotransferase II(nptII) 유전자를 옮기고, 세포내에 도입된 nptII DNA의 존재유무와 발현여부를 조사하였다. Polymerase chain reaction(PCR)을 이용하여 검토한 결과, PEG법을 사용했을 때나 electroporation법을 사용했을 때 모두 세포내에 도입된 nptII DNA가 있음이 확인되었다. 또 이들 세포의 추출물을 전기영동하여 neomycin phosphotransferase 활성을 조사한 결과, 효소활성을 보이는 band가 검출되어 marker gene 으로 도입된 notII...