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Molecular Analysis of a Prolonged Spread of Klebsiella pneumoniae Co-producing DHA-1 and SHV-12 ${eta}$-Lactamases
Yoon. Young-Kyung, Cheong. Hye-Won, Pai. Hyun-Joo, Roh. Kyoung-Ho, Kim. Jeong-Yeon, Park. Dae-Won, Sohn. Jang-Wook, Lee. Seung-Eun, Chun 한국미생물학회 The journal of microbiology 6 Pages
한국미생물학회 The journal of microbiology 2011, Vol.49 No.3 363-368 (6 pages)
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Effects of Genetically Different 2. 4-D-degradative Plasmids on Degradation Phenotype and Competitiveness of Soil Microorganisms
Hong. Seok-Myeong, Ahn. Young-Joon, Park. Yong-Keun, Min. Kyung-Hee, Kim. Chi-Kyung, Ka. Jong-Ok 한국미생물학회 The journal of microbiology 7 Pages
한국미생물학회 The journal of microbiology 1995, Vol.33 No.3 208-214 (7 pages)
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샤페론 단백질 동시 발현기술을 이용한 수용성 CMP-Neu5Ac Synthetase 생산
최화영, 이령, 조승기, 이원흥, 서진호, 한남수, Choi. Hwa Young, Li. Ling, Cho. Seung Kee, Lee. Won-Heong, Seo. Jin-Ho, Han. Nam Soo 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 4 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2014, Vol.42 No.2 190-193 (4 pages)
사용되는 CMP-Neu5Ac를 합성하는데 관여하는 주요 효소이다. Escherichia coli K1에서 유래한 CMP-Neu5Ac synthetase 유전자 (neuA)는 평소 E. coli BL21(DE3)에서 비수용성으로 생성되는데, 이를 수용성 단백질로 생산하고자 여러 가지 샤페론 단백질 동시 발현기술을 이용하였다. 이를 위해, GroEL-ES와 DnaK-DnaJ-GrpE를 암호화하는 pG-KJE8 plasmid와 neuA를 동시 형질전환 시켰고 0.01 mM IPTG와 0.005 mg/ml의 L-arabinose로 유도하여 $20^{circ}C$에서 발현시켰다. 그 결과, E. coli에서의 수용성 CMP-Neu5Ac Synthetase 생산이... -
Saccharomyces cerevisiae와 Pichia pastoris에서 Bovine Pancreatic Deoxyribonuclease I의 과발현과 특성
조은수, 김정환, 윤기홍, 김연희, 남수완, Cho. Eun-Soo, Kim. Jeong-Hwan, Yoon. Ki-Hong, Kim. Yeon-Hee, Nam. Soo-Wan 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2012, Vol.40 No.4 348-355 (8 pages)
I 유전자를 AOX1 promoter, $MF{alpha}$, AOX1 terminator 에 삽입하여 재조합 plasmid인 pPEXI (8.8 kb)를 구축하였다. 재조합 plasmid인 pGAL-$MF{alpha}$-DNaseI과 pPEXI를 각각 S. cerevisiae와 P. pastoris 숙주세포에 형질전환시켰다. 형질전환된 효모세포들을 galactose와 methanol 배지에서 $30^{circ}C$, 48시간 배양하면 bp-DNase I은 대부분이 배양 상등액으로 과발현되었다. P. pastoris 형질전환체는 배양 상등액에서 45.5 unit/mL의 DNase I 활성을 보였으며, 반면에 S. cerevisiae 형질전환체는 37.7 unit/mL의 DNase I... -
Pichia pastoris에서 Zobellia galactanivorans 유래 재조합 $eta$-Agarase의 고효율 분비생산
석지환, 박희균, 이상현, 남수완, 전숭종, 김종현, 김연희, Seok. Ji-Hwan, Park. Hee-Gyun, Lee. Sang-Hyeon, Nam. Soo-Wan, Jeon. Sung-Jong, Kim. Jong-Hyun, Kim. Yeon-H 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2010, Vol.38 No.1 40-45 (6 pages)
1, methanol inducible) promoter 하류에 Saccharomyces cerevisiae mating factor alpha-1 secretion signal($MF{alpha}1$)를 연결하여 $MF{alpha}1$-AgaB를 구축하였다. 구축된 plasmid pPIC-AgaB(9 kb)를 Pichia pastoris genome에 HIS4 gene 위치에 integration하였고, colony PCR을 통해 확인하였다. Methanol 첨가 배지에서 자란 형질전환체는 iodine solution의 첨가에 의해 red halos를 보였으며, P.pastoris에서 agaB의 효율적 분비 발현을 확인하였다. SDS-PAGE와 zymographic analysis에서 $eta$-agarase의 분자량은 약 53... -
김치유산균용 발현벡터 pSJE6c 개발과 이를 이용한 외래 유전자 발현
이강욱, 박지영, 이지연, 이황아, 백창운, 조현덕, 김주연, 권건희, 천지연, 김정환, Lee. Kang-Wook, Park. Ji-Yeong, Lee. Ji-Yeon, Lee. Hwang-A, Baek. Chang-Un, Jo. Hyeon-Deok, Ki 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 10 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2009, Vol.37 No.4 389-398 (10 pages)
고유 프로모터를 지닌 유전자들도 각각 pSJE에 도입하였다. 재조합 plasmid들을 electroporation 방법으로 Lactobacillus brevis 2.14 균주에 도입하고 재조합균주들의 생육곡선과 효소역가 그리고 slot blot으로 전사체 농도를 측정하였다. 결과를 보면 PSJE6c에 클로닝 된 유전자들이 pSJE상의 유전자보다 효소역가들이 약 1.5배에서 2배 정도로 높았다. 전사체 농도 측정 결과도 pSJE6c 들에서 더 많은 전사체가 생성됨을 보여주었다. 이상 결과들은 효율적인 발현벡터들의 사용을 통해서 김치유산균에서 외래유전자 발현 효율을 높일... -
Saccharomyces cerevisiae에서 Pseudoalteromonas carageenovora 유래 Arylsulfatase 유전자의 표층 발현
조은수, 김현진, 정소아, 김정환, 김연희, 남수완, Cho. Eun-Soo, Kim. Hyun-Jin, Jung. So-A, Kim. Jeong-Hwan, Kim. Yeon-Hee, Nam. Soo-Wan 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2009, Vol.37 No.4 355-360 (6 pages)
carageenovora 유래 arylsulfatase 유전자(astA)의 효모표면발현 plasmid pCTAST(7.1 kb)를 구축하여 S. cerevisiae EBY100에 형질전환하였고, 선별된 형질전환체들을 YPDG 배지에서 배양했을 때 4-methylumbelliferyl sulfate를 분해하여 형광을 보였다. 이는 효모에서 arylsulfatase가 활성형으로 생산되었음을 의미하였다. S. cerevisiae EBY100/pCTAST를 플라스크 배양했을 때 arylsulfatase 활성은 galactose가 완전히 소모된 배양 48시간째 최대 활성인 1.2 unit/mL로 나타났으며 배양 상등액에서는 활성이 나타나지 않았다. 효모...


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