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911.

Saccharopolyspora erythraea IFO 13426으로부터 Autoregulator Receptor Protein Gene의 Cloning

김현수, 이경화, 조재만 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 7 Pages

한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2003, Vol.31 No.2 117-123 (7 pages)

김현수, 이경화, 조재만 저

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후, plasmid를 분리하여 BamHI을 처리하여 2% agarose gel에 전기영동한 결과, pUC19 (2.7kbp)외에 receptor gene PCR 산물이 120bp위치에 존재하는 것을 확인하였다. 형질전환된 plasmid로 PCR을 수행하여 염기배열을 결정한 후 해석한 결과 Streptomyces sp. 유래의 receptor gene과 유사함을 확인하였다. 따라서 Saccha. erythraea IFO 13426에는 항생물질인 erythromycin의 생산에 관여한다고 추정되는 autoregulator receptor protein을 코드하는 유전자가 존재할 것으로 예상되어 120 bp의 PCR product를 probe로 이용하여 Southern...
912.

외래 알파아밀라제의 Saccharomyces cerevisiae에서의 생산과 분비효율의 증진

최성호, 김근 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 6 Pages

한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2003, Vol.31 No.1 36-41 (6 pages)

최성호, 김근 저

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$alpha$-amylase cDNA gene의 native signal sequence를 효모의 PRB1 promoter와 invertase leader sequence로 대치한 plasmid vector pCNN(AMY)를 제작하였다. 효모세포에서 생성된 $alpha$-amylase의 세포외로의 분비율은 mouse o-amylase의 native signal sequence인 경우는 약 89.4%이었으며 invertase leader sequence로 치환된 경우는 96.3%로 분비효율이 증진되었다. 야생주인 K8l/pCNN(AMY)와 호흡결여변이주인 K81/pCNN(AMY)p-의 혐기적 조건하에서의 배양 결과 $alpha$-amylase 생산량이 K8l/pCNN(AMY)보다 K81/pCNN(AMY)p-가...
913.

저온성균 Sporosarcina psychrophilia로부터 Aspartate Transcarbamylase 유전자의 클로닝 및 염기서열 분석

성혜리, 안원근, 김사열 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 8 Pages

한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2002, Vol.30 No.4 312-319 (8 pages)

성혜리, 안원근, 김사열 저

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plasmid를 분리하여 pSMI과 pSM2라고 명명하였다. 두 plasmid의 염기배열을 결정한 결과 pSM2 insert DNA는 pSMl insert DNA 부분을 포함하는 2,606 nucleotide 단편이었다. 염기서열을 분석하였을 때 이것은 1개의 완전한 open reading frame(ORF)과 2개의 부분 ORFs를 포함하고 있었다. 두 번째 위치한 완전한 ORF는 Bacillus caldolyticus aspartate transcarbamylase(pyrB)와 아미노산 서열 수준에서 59% 상동성을 보였고, 첫 번째와 세 번째 위치한 부분적 ORFs는 각각 Bacillus속의 uracil permease(pyrP)와 dihydoorotase(pyrC)와...
914.

Saccharomyces cerevisiae 내에서 Bacillus stearothermophilus NO2 CGTnse 유전자의 발현

유동주, 박현이, 전숭종, 권현주, 남수완, 김병우 한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 4 Pages

한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 2002, Vol.30 No.3 206-209 (4 pages)

유동주, 박현이, 전숭종, 권현주, 남수완, 김병우 저

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항구적 promoter인 adh l promoter를 함유한 pVT103-U(6.9Kb)에 도입하여 재조합 plasmid pVT-CCTS (9.0Kb)을 구축하고 효모 숙주 S. cerevisiae 2805에서 발현시켰다. 재조합 균주의 항구적 발현계인 2805/pv7-CGTS의 최적 발현조건은 YP배지에 dextrose 2%, pH 5.5, 30"C에서 최적 발효조건이었으며, CCTase의 최대 발현량은 48시간 배양시 0.624unit/mL을 나타내었다. B. stearothermophilus의 signal peptide가 재조합 효모에서도 높은 분비효율을 나타내어서 발현된 효소의 87%가 세포 외로 분비 생산되었다.산되었다.
915.

재조합 효모의 유가배양에서 Exoinulinase생산을 위한 Promoter의 선별

김이경, 고지현, 김연희, 김성구, 남수완 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 2001, Vol.29 No.4 206-211 (6 pages)

김이경, 고지현, 김연희, 김성구, 남수완 저

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나타났다. 이상의 plasmid 안정성과 exoinulinae 발현수준을 고려하여 ADH1 및 PGK 발현계를 선정하여 유가배양하였다 Yeast extract와 포도당을 간헐적으로 공급한 유가배양 결과, 두 발현계에서 약 30 g-DCW/1의 균체농도를 얻었지만, ADHI promoter 계에서는 3.70 unit/ml 의 최대 exoinulinase 활성과 96%의 plasmid 안정성을 보여TRh 반면에 PGK promoter 계는 각각 2.70 unit/ml/와 80%를 나타내었다. 따라서 plasmid 안정성과 긴 배양시간을 고려할 때 비선택적 영양배지를 사용하는 고농도세포 유가배양에서 ADH1 promoter가...
916.

클로람페니콜 내성 플라스미드 pKH7의 Pre 단백질의 염기서열 결정

문경호, 박봉동, 이동석, 이백락 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 3 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.6 566-568 (3 pages)

문경호, 박봉동, 이동석, 이백락 저

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917.

재조합 Alkaline Protease를 대량 생산하는 Aspergillus oryzae 균주개발

이병로, 유기원, 최원균, 최동성, 임한진, 성창근 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.5 450-455 (6 pages)

이병로, 유기원, 최원균, 최동성, 임한진, 성창근 저

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A. oryzae의 alkaline pretense 유전자 alpA를 고발현시키는 plasmid pTAalp를 제조하고 이 plasmid로 A. oryzae M-2-3 균주를 형질전환시켰다. 16개의 형질전환체를 얻어 이들의 protease생산성을 skim milk 분해에 의한 halo 형성능에 의하여 확인하였다. 또한 protease 생산성이 증가한 형질전환체는 pTAalp가 multi-copy로 염색체 안에 integration되어 있음을 Southern blot에 의하여 확인하였고, 이들의 배양액을 polyacrylamide gel전기영동에 의하여 분석한 결과, 형질전환체 No. 14에서는 전체 분비단백질의 80-90%가 alkaline...
918.

Saccharomyces cerevisiae에서 Trichoderma Endoglucanase의 발현과 분비

신동하, 김재범, 김병우, 남수완, 신지원, 정대균, 정춘수 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.5 406-412 (7 pages)

신동하, 김재범, 김병우, 남수완, 신지원, 정대균, 정춘수 저

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Trichoderma sp. C-4 유래의 endoglucanase 유전자(egl6)를 ADH1 promoter 하류에 연결하여 구성적 발현 plasmid인 pVT-C4를 제작하였다. 이를 3종의 S. cerevisiae숙주세포(YNN27, 2805, SEY2102)에 형질전환시켜 각 숙주세포당 80개의 형질전환체를 시험배양하여, 균체증식과 endoglucanase 발현량이 뛰어난 형질전환 효모 균주를 선별하였다. 3종의 재조합 효모를 YPD 배지에서 회분 배양했을 때, YNN27 균주가 가장 낮은 균체농도(OD$_{600}$=19)를, 2805 균주가 가장 높은 균체농도(OD$_{600}$=33)를 보였으며, 총 발현된...
919.

Brevibacterium lactofermentum에서 ddh 유전자의 증폭에 의한 L-Lysine의 생산

김옥미, 박선희, 이승언, 배준태, 김현정, 이별나, 이갑랑 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.5 400-405 (6 pages)

김옥미, 박선희, 이승언, 배준태, 김현정, 이별나, 이갑랑 저

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및 pEB2를 제조하였으며, 제조된 shuttle vector에 ddh 유전자를 ligation하여 재조합 plasmid pRK1 및 pRK2를 구축하였다. B. lactofermentum에서 ddh 유전자를 증폭시키기 위하여 재조합 plasmld를 B. lactofermentum으로 도입하여 DDH 활성을 측정한 결과 대조균보다 7배 정도 증가하였다. 또한 lysine 생성량의 비교 분석에서는 재조합 plasmid를 함유한 균주의 경우 48시간 이후부터 control 균주보다 lysine 생성량이 증가하기 시작하여 72시간 때에는 최대치를 나타내었으며 그 이후는 오히려 감소하였다. 최대치를 나타낸 72시간...
920.

Urease gene의 전이에 의한 길항세균 Bacillus sp. SH14의 길항능력 증가

최종규, 김상달 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages

한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.2 122-129 (8 pages)

최종규, 김상달 저

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강력한 호알칼리성 Bacillus pasteurii의 urease 생산유전자를 E. coli-Bacillus shuttle vector인 pEB203에 subcloning하였고, 이어서 pGU 366으로 명명된 이 recombinant plasmid를 선발된 항진균성 길항균주 B. subtilis SH14에 PEG-induced protoplast transformation 방법으로 도입, 발현시켰으며, 최적조건을 조사하여 90분간의 lysozyme 처리과정 후 1.5 $mu extrm{g}$/$mell$의 DNA와 40% PEG4000의 첨가로 약 6.5$ imes$$10^{-4}$의 형질전환율을 얻을 수 있었다. 아울러 암모니아 생성능이 부가된 생물방제균 B. subtilis...

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