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한국에서의 고초균 유전체 연구: Bacillus subtilis 염색체상 180$^{circ}$-185$^{circ}$-부위 53 kb DNA 단편의 염기서열 분석
김사열, 최수근, 정영미, 신병식, 박승환 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 11 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1998, Vol.26 No.1 23-33 (11 pages)
끝 부분에 위치한 sspC와 odhA 유전자의 알려진 염기 서열을 시점으로하여, plasmid rescue와 long-range PCR 방법을 써서 염색체 DNA 단편을 획득하였다. 본 연구팀이 염기서열을 밝힌 염색체 DNA 부위에는 이미 보고된 9개 유전자(sspC, cge cluster, orfE5, orfRMl 및 odhA)를 포함하여 모두 65개의 ORF가 들어 있음이 밝혀졌다. 이 부위에서 얻은 흥미로운 결과 중 하나는 인트론으로 여겨지는 한 ORF의 발견인데 세균의 염색체 상에서 인트론이 발견된 예는 흔치 않다. DNA복제 종결 단백질의 결합이 예상되는 염기서열이 세 곳에서... -
대장균의 전사조절 유전자 nlp의 분자기구 해석
최용락, 정수열, 정정한, 정영기 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 10 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1993, Vol.21 No.3 229-238 (10 pages)
-
저온성 원유분해 세균의 분리동정 및 OCT 프라스미드 특성
김상진, 윤희정 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1993, Vol.21 No.1 66-73 (8 pages)
제거된 균주의 탄화수소 분해능 실험결과 저온성 세균 A. calcoaceticus A1-1의 alkane 화합물 이용능력은 plasmid에 유전정보가 있음을 시사했다. 또한 본 균주의 plasmid 안정성은 세 번째 transfer 후에도 90%정도의 안정성을 보여주었고 항생제 중 ampicillin에 대한 내성을 나타내었고 streptomycin, chloramphenicol, kanamycin, tetracycline에 대해서는 감수성을 나타내었다. 이와같은 결과들은 A. calcoaceticus A 1-1가 매우 안정적이며 항새제 내성과 관련이 있는 유류이용에 관여하는 프라스미드를 갖고 있음을 시사한다. -
Bacillus sp. SSA3 균주의 Expression Vector 개발
조윤래, 김종규, 권대준 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.6 637-641 (5 pages)
DNA을 HindIII로 절단한 단편을 pGR71 plasmid의 CAT gene과 pUC18 plasmid의 $eta$-galactosidase gene의 전방에 삽입시킨 후, E.coli JM109에 형질전환하였다.E. coli JM109의 chloramphenicol 내성 clones으로부터 6 recombinant plasmid를 선별하였다. 이들 선별된 plasmid는 Bacillus sp. SSA3의 expression vector로 사용시 각 재조합 plasmid 중에 삽입된 promoter의 염에 대한 영향의 정도를확인하기 위해 10% NaCl이 첨가된 LB medium상에서 배양하였을 때, 이들 중 Bacillus sp. SSA3의 4 clones은 융합 CAT gene의 발현이... -
DNA Probe에 의한 $Km^r$ 유전자의 전이 추적
이성기, 김치경 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.4 483-490 (8 pages)
다양하였다. LB에서 얻은 conjugant들의 plasmid에 대하여 $Km^r$ DNA probe로 Southern analysis를 한 결과, plasmid의 재배열이 다양함에도 불구하고 conjugant들의 $Km^r$ plasmid는 donor에서와 같은 위치에서 hybridization signal이 나타났다. 그러나 AW에서 50시간 conjugation시켰을 때 DKI의 pDK101과 DKC601의 pDT529, 그리고 AW에서 30시간 conjugation 시켰을 때 DKC600의 pDK101은 전혀 나타나지 않고, 소실되었다. 또 전이된 $Km^r$ plasmid의 크기는 AW와 FW의 수질에 따라 약간 변화되어 나타났다. 그러므로 DNA probe에... -
Bacillus stearothermophilus로 부터 Endo-xylanase 유전자의 클로닝 및 Escherichia coli에서의 발현
조상구, 박성수, 박영인, 최용진 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1992, Vol.20 No.3 271-279 (9 pages)
및 내열성 xylanase를 생산하는 토양분리균인 Bacillus stearothermophilus의 chromosomal DNA와 pBR322 plasmid DNA의 HindIII 절단 DNA 단편을 ligation 시켜 E.coli HB101들 형질전환, 약 5천개의 형질전환체를 얻었으며 이들 중에서 세개의 xylanase 양성 형질전환체를 분리하였다. 상기 세 xylanase 양성 형질전환체들로부터 분리한 제조합 plasmid(pMG11, pMG12 및 pMG13)는 다 같이 xylanase 활성과 관계되는 B.stearothermophilus 유래의 동일 4kb 외래 DNA를 가지고 있었으나, pMG13은 외래 DNA의 삽입 방향만이 다름을... -
대장균을 이용한 Phenylalanine 생산에 있어서 온도조절형 발현 Vector의 안정성
강상모, 박인숙 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.5 433-438 (6 pages)
Phenylalanine 고생산용 plasmid pSY130-14는 $lambda$-phage 유래 온도감수성을 가지고 있으므로 $cI_{857}$ repressor와 PL과 PR을 온도를 올려 phenylalanine의 생산을 유도한다. pSY130-14를 갖는 E.coli AT2471은 kanamycin 무첨가, $38.5^{circ}C$, 48시간에서 약 30%로 plasmid가 없어지며 첨가에서 안정성이 떨어졌다가 배양시간과 더불어 올라갔는데, 이것은 생육에 피요한 kanamycin gene과 ori만이 남는 것으로 생각된다. -
Cephalosporium acremonium의 자율복제 기점의 특성
이경, 강대욱, 황인규, 민태익, 윤병대, 황인규 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.3 215-221 (7 pages)
YIp5를 사용하여 Cephalosporium acremonium ATCC 2033으로부터 Saccharomyces cerevisiae SHY3에서 발현되는 자율복제 기점 (ARS)를 분리하였다. 자율복제 기점을 갖는 40종의 vector 가운데 가장 안정성 (stability)이 높은 plasmid를 pCY-2라 명명하였으며 pCY-2는 C.acremonium에서 유래하는 3.7kb의 단편을 갖고 있었다. 또 Southern hybridization과 재형질전환을 통해 pCY-2가 효모내에서 자율적으로 복제되고 있다는 것을 확인하였다. 또한 pCY-2는 형질전환율과 안정성에 있어 효모의 ARS를 갖는 YRp7 vector보다 우수하였다. -
OCT 플라스미드를 갖는 원유 분해세균에 의한 Octane 분해능
최순영, 김창숙, 황문옥, 민경희, 이명혜 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.1 82-87 (6 pages)
원유 분해세균에 의한 원유 분해능을 조사한 결과, Xanthomonas camperstris M12, Xanthomonas sp. M28, Acintobacter lwoffi G1, Klebsiella pneumoniae L25, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 등의 순서로 나타났다. Xanthomonas maltophilia M12, Xanthomonas sp. M28, 그리고 Pseudomonas maltophilia N246 균주 모두 pctane 분해시의 온도는 $30^{circ}C$에서 최적이었으며, 최적 pH는 X.camperstris M12와 Xanthomonas sp. M28이 7.0-7.5 이었고, P.maltophilia N246이 7.5-9.0이었다. N246 균주의 최적 NaCl농도는 3.0-3.5... -
일반 E.coli에서 tac Promoter에 의한 온도감수성 $cI_{857}$ Repressor의 대량생산
강상모, 권태종, 정호권 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 7 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1991, Vol.19 No.1 45-51 (7 pages)
것을 검토하였다. $cI_{857}$ 유전자를 포함하는 DNA 단편을 plasmid PUC12를 이용하여 대량생산후, HphI으로 부분 분해하여 $cI_{857}$ 구조 유전자만을 취하고, tac promoter 하류에 삽입시켰다. 그리고 $lambda$ phage $cI_{90}$에 의해 $30^{circ}C$에서는 용원성을, $42^{circ}C$에서는 용균성을 보이는 균주를 선택함으로 tac promoter 하류에 cI857 구조 유전자가 삽입된 pDR540-$cI_{857}$을 선택할 수가 있었다. 이 plasmid는 $lacI^q$ JM103 뿐만 아니라 각종 E.coli에서 $cI_{857}$-repressor 단백질을 균체 단백질당 약...