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호알칼리성 Bacillus속 B-17의 형질전환조건
성낙계, 정운상, 고학룡, 정정희 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.3 213-218 (6 pages)
Iysozyme 을 처리하였으며, 원형질체 형성의 최적 온도, PH및 배양시간은 각각 4$0^{circ}C$, 7.0 및 4시간으로 나타났다. 원형질체는 DM3 재생배지에서 재생시켰으며 0.8% agar, 0.5M sodium succinate 농도에서 가장재생이 좋았다. 형질전환시 PEG의 농도는 40%(w/v) PEG 6,000 30%(v/v)가 최적으로 나타났다. 형질전환체의 특성을 조사한 결과, plasmid 안정성은 pUB110이 pBD64보다 더 안정하였으며, 최대 효소활성은 비슷하였지만 효소 분비시간은 pUB110 은 2.5일, pBD64의 경우는 3일로 Bacillus속 K-17의 2일에 비해 약간... -
공여 균주인 알카리 내성 Bacillus속에 도입된 Promoter 의 특성
유주현, 구본탁, 정용준 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.3 188-192 (5 pages)
YA-14의 chromosomal DNA로부터 B. subtilis 207-25 에 cloning된 promoter 유전자들을 그 공여 균주로 재형질전환시킬 수 있었다. 그 결과 promoter 유전자들은 공여 균주내에서 대부분의 특성들이 B. subtilis 207-25 내에서와 유사하였다. 재조합 plasmid p-12, p-l2Bl 및 p-l2B2의 CAT 비활성은 B. subtilis 207-25의 형질전환체보다 약간 높게 나타났으며 반면 pPL708의 CAT 비활성은 Bacillus sp. YA-14에서 오히려 상대적으로. 낮게 나타났다. Chloramphenicol에 의한 induction 정도도 월등하게 높은 것으로 나타나 이를 이용한... -
Transposon Tn5 및 Reverse Field Electrophoresis를 이용한 Caulobuter crescentus의 유전자 분석 연구
구본성, 버트일리 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.3 183-187 (5 pages)
phage를 가지고 있는 plasmid를 장내 세균에 삽입시키면 대부분의 Mu에 민감한 세균들은 zygotic induction이 일어나서 recipient cell 들이 살아남지 못하게 된다. 그러나 Mu 저항성 세균을 사용하면 cell이 죽지않고 recipient내에 삽입되는데 그 정확한 현상은 아직 밝혀지지 않았으나 Mu의 복제에 필요한 host의 기능이 결여된 것으로 추정되고 있다. 또한 reverse field electrophoresis를 사용하여 insertion mutant 나 deletion mutant들 의 염색체 및 거대 분자 DNA의 변이를 쉽게 비교 분석할 수가 있다. 본 실험에서는 Mu phage... -
알카리성 Bacillus sp.의 호알카리성 amylase 유전자의 Bacillus subtilis와 Escherichia coli로의 cloning과 발현
Bae. Moo, Park. Shin-Hae 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.2 160-164 (5 pages)
알카리성 Bacillus sp. AL-8의 알카리성 amylase 유전자를 포함하는 5.7Kb의 EcoRI 단편을 pUB 110을 vector로 하여 amylase를 생산하지 못하는 B. subtilis sta-1에서 발현시켰다. 재조합 plasmid pMB802와 pMB809는 숙주세포인 B. subtilis에서 매우 안정하게 유지되었으며 amylase 생산이 공여균 주에서 보다 1.8배 증가하였다. 형질전환주에서 생산된 amylase는 공여균주와 같은 효소적 성질을 나타내었다. 5.7Kb 단편을 E. coli에 subcloning한 결과 3.7Kb의 EcoRI 단편에 알카리성 amylase 유전자가 존재하였다. -
Pseudomonas속 세균에 의한 방향족화합물 생분해
정윤창, 김경남, 최용진, 양한철, 송준상, 서윤수 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 9 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1989, Vol.17 No.2 100-108 (9 pages)
1040 변이주를 분리하였다. Cam 1040은 탄소원으로 각각 200$mu extrm{g}$/$mell$의 m-toluate, benzoate, camphor 및 phenol이 혼합 첨가된 배지에서 진탕배양했을 때 균체증식에 비례적으로 COD 감소를 나타내었고 첨가 탄소원은 camphor, phenol, benzoate, m-toluate 순서로 분해 이용하였다. Cam 1040 균주는 약 98kb로 추정된 camphor 자화능과 관련된 plasmid를 보유하고 있음을 확인하였다. 또한 Cam 1040 균주에 NAH 2를 도입, salicylate와naphthalene 자화능을 가하므로서 더욱 다양한 기질 분해능을 가진 Cam 1043균주를... -
Naphthalene을 분해하는 Pseudomonas putida N3의 분리 및 특성
고영희, 하일호, 배경숙 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.3 199-204 (6 pages)
균을 분식 배양과 연속식 배양에 의해서 토양과 폐수로부터 분리하였다. 이 균은 Pseudomonas putida로 동정되었으며, 최적 pH와 온도는 각각 7.0과 3$0^{circ}C$ 이었다. 분리된 균은 1,5-dihydroxynaphthalene을 naphthalene보다 더욱 잘 이용하였으며 benzoate와 salicylate도 이용하였다. 또한 catechol dl meta-분해경로를 통해서 분해되었으며, ampicillin, chloramphenicol, kanamycin, streptomycin에 대해서 강한 저항성을 지니고 있었으며, naphthalene의 분해에 관여하는 약 110kb 크기의 plasmid를 1개 지니고 있었다. -
고효율 효모 유전자 운반체의 개발
김태국, 최철용, 노현모 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 8 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.6 476-483 (8 pages)
CEN3 (centromere), 2 $mu$m OR (yeast plasmid의 origin of replication)의 DNA 절편을 재조합하여 만든 유전자 운반체들의 형질전환력, 안정도 및 운반체 수를 효모균주 SHY4(cir$^+$)와 NNY1(cir$^{circ}$)에서 비교 조사하였다. CEN3를 갖는 유전자 운반체는 매우 안정하나 세포당 수가 하나로 매우 낮으며 2 $mu$m OR과 ARS1 을 동시에 갖는 유전자 운반체는 안정할 뿐만 아니라 세포당 수도 높으며 균주내에 존재하는 2 $mu$m 플라스미드는 2 $mu$m OR을 가지는 유전자 운반체의 복제에 영향을 준다는 사실을 알 수 있었다. -
아닐린 생분해 균주의 분리 및 특성
조경연, 하일호, 배경숙, 고영희 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 6 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.5 421-426 (6 pages)
분리 균주중 10, 균주에 대하여 동정 시험하여 본 결과 9균주는 Pseudomonas 속이었고 한 균주는 Acinetobacter 속이었다. 전체 29균주중 plasmid를 갖고 있는 균주는 모두 5종이었으며 이들 5균주중 4균주는 meta 경로를 통하여 아닐린을 분해 이용하였고 나머지 한 균주는 ortho 경로를 통하여 아닐린을 분해하였다. meta 경로 이용 균주의 하나인 Pseudomonas acidovorans 4A1은 230kb 크기의 plasmid를 갖고 있었으며, 접합실험과 curing 실험을 통하여 이 plasmid에 아닐린 분해 유전 정보가 수록되었을 가능성을 확인할 수 있었다. -
알카리 내성 Bacillus속 Promoter의 특성
유주현, 구본탁, 박영서, 정용준, 배동훈, 오두환 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 5 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.5 343-347 (5 pages)
토양에서 분리한 알칼리 내성 Bacillus속의 chromosomal DNA로부터 promoter를 cloning하여 선별된 재조합 plasmid p-12내 의 promoter를 subcloning을 하였다. 그 결과 cloning된 promoter 내에는 서로 다른 두 가지의 promoter가 존재하는 것을 확인할 수 있었고 이로부터 각각의 promoter를 함유한 재조합 plasmid p-l2B1, p-l2B2를 제조하였다. 또한 CAT 비활성 측정에 의해 각 promoter의 활성을 비교해 본 결과 p-l2B1의 promoter는 p-l2B2의 promoter에 비해 상대적으로 높은 활성을 가지고 있었다. CAT 비활성을 생육시기에 따라... -
알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 Pectate Lyase 유전자의 클로닝과 발현
Yu. Ju-Hyun, Park. Yoon-Suk, Kim. Jin-Man, Kong. In-Soo, Chung. Yong-Joon 한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 4 Pages
한국미생물생명공학회 산업미생물학회지 1988, Vol.16 No.4 316-319 (4 pages)
토양으로부터 분리한 알카리내성 Bacillus sp. YA-14의 Pectate lyase(PL) 유전자를 E. coli에 cloning하여 제조한 재조합 plasmid pYPC29는 삽입 된 1.6kb 단편내에 PL 유전자를 함유하고 있었으며, 이 외래 DNA가 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA에서 유래된 것임을 Southern hybridization을 통하여 확인하였다. 재조합 plasmid pYPC29는 E. coli내에서 안정하게 존재하였으며 이를 함유한 재조합체의 전체 PL 활성 중 약 70%가 periplasmic space에 존재하였다.