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해양에서 분리한 Streptomyces sp. BH-405 배양액의 항산화 효과
류병호, 이영숙, 양승택 한국생물공학회 한국생물공학회지 6 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 2000, Vol.15 No.2 150-155 (6 pages)
후 silica gel column(100$ imes$10 cm) chromatography로 분획한 획분을 POV로 측정한 결과 fraction 3에서 향산화 활성이 가장 높았다. 항산화 활성이 높은 fraction 3 획분을 다시 preparative TLC와 column chromatography로 더욱 정제하여 band 2를 얻었다. Band 2의 항산화 효과를 알아보기 위해 기존의 항산화제와 비교한 결과 이-$alpha$-tocopherol, BHA보다 산화억제 효과가 높았으며 DPPH에 의한 수소 공여능은 실험결과가 우수하였다. 한편 band 2는 쥐 간의 microsome에 있어서 유리기의 소거기능이 있었고 NADPH 및 Fenton... -
Lipomyces starkeyi JLC26에서 유래된 Carbohydrase의 특성
전선미, 김도만, 김도원, Jun. Sun-Mee, Kim. Do-Man, Kim. Do-Won 한국생물공학회 한국생물공학회지 5 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1999, Vol.14 No.6 713-717 (5 pages)
ATCC 74054를 UV로 돌연변이하여 선발한 JLC26의 효소적인 특성을 알아보았다. 효소는 70% ammonium sulfate로 침전시키고, CM-Sepharose column chromatography로 부분 정제하였다. 이때 얻어진 각 효소 specific activity는 amylase 활성의 경우는 5367 unit/mg이었고 dextranase 활성의 경우는 3045 unit/mg이었다. 효소의 최적 pH와 온도는 5.5와 37$^{circ}C$였으며, pH 2.5-5.5와 4-55$^{circ}C$에서 안정성을 보였다. 부분 정제된 효소는 amylase와 dextranase 활성을 동시에 보이는 100 KDa의 크기를 가지는 하나의 단백질이었다.... -
방선균 Streptomyces sp. No.4가 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 특성
김현수, 고희선 한국생물공학회 한국생물공학회지 6 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1999, Vol.14 No.3 322-327 (6 pages)
cholesterol affinity column chromatography를 통하여 28.3%의 수율로 정제 되었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE에서 단일한 밴드를 보였으며 분저량은 약 60,000 dalton으로 추정되었으며, HPLC분석 결과 단일의 peak로 검출되었다. 본 효소의 특성을 검토한 결과, 금속 이온으로 Hg와 Cu의 존재시 크게 저해를 받았고, dithiothreitol 과 mercaptoethanol과 같은 저해제에 의해서 상당히 실활되었다. 본 cholesterol oxidase의 Michaelis 상수는 cholesterol을 기질로하여 Lineweaver-Burk plot분석에서 1.38mM로 추산되었다. 정제효소의... -
해양세균 Bacillus cereus ASK202가 생산하는 $eta$-Agarese의 특성
김봉조, 황선희, 김학주, 강양순, 하순득, 공재열 한국생물공학회 한국생물공학회지 7 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1999, Vol.14 No.1 96-102 (7 pages)
Superose 6HR 10/30 column chromatography등에 의해 분리.정제한 결과 최종적으로 31.5 배의 정제도 27.8 %의 수율, 3,780 umt/mg의 specific actIvity을 지닌 정제된 효소를 얻을 수 있었다. 또한 HPLC상에서 정제된 효소가 90,000 daltons의 분자량을 지닌 단백질임을 확인하였다. 정제된 한천분해효소의 최적 pH 및 온도는 각각 6.0과 $40^{circ}C$. 였으며, pH 5.0 ~ 10.0 및 $30^{circ}C$에서 장기 보존하였을 경우 효소활성이 안정적으로 유지 됨을 확인하였다. 또한 정제된 한천분해효소 용액은 $Zn(NO_3)_2$의 첨가에 의해 약... -
창난젓에서 분리한 Rhodococcus sp. 3T6-5Mj가 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 특성
박상현, 김한수, 이윤수, 권익부, 전억한 한국생물공학회 한국생물공학회지 8 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1998, Vol.13 No.2 195-202 (8 pages)
Rhodococcus sp. 3T6-5Mj 균주의 배양액으로부터 0.2${mu}m$ membrane filter을 통과시키고, 아세톤 침전, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography의 약음이온 교환수지,cholesterol affinity column chromatography를 통과시켜서 콜레스테롤 산화 효소를 25.6units/mg의 비활성도, 15%의 회수율,88배로 정제할 수 있었다. 본 균주가 생산하는 콜레스테롤산화효소의 분자량은 SDS-PAGE로 측정한 결과 약,52,000 daltons 정도로 추정되었다. 그리고 이 효소의 Km값은 콜레스테롤을 기질로 측정하였을 때 $3.2{ imes}10^{-4}M$ 이었다.... -
Cacao Bean Husk 추출물로부터 Glucosyltransferase 저해 활성 물질의 분리 및 구조 동정
권익부, 안봉전이신영 한국생물공학회 한국생물공학회지 7 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1996, Vol.11 No.5 536-542 (7 pages)
얻어진, gluco-syltransferase(Gtase) 저해 활성 분획을 분리하였 다. 이를 다시 MCI-gel CHP-20와 Sephadex LH 20의 column chromatography법으로 분리, 정제하였으며, 이로부터 얻어진 2개의 GTase 활성 저해 물질에 대한 구조 해석을 행하였다. 분리.정제된 2개의 GTase 저해 활성 물질은 anisaldehyde-$H_2SO_4$ 및 FeCb에서 각각 갈색 및 청색 반응을 하며, 또 TLC상에서 dimer의 flavan-3-ol $R_r$값을 나타내는 단일 물질이었다. NMR(PMR, C CMR) 빛 mass spectrum으로 두 정제 분획에 대 한 화학 구조를 분석한 결과, G Tase... -
재조합 Saccharomyces cerevisiae로부터 인체 리포코틴-I의 분비 생산 및 정제
김병문, 정봉현 한국생물공학회 한국생물공학회지 6 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1995, Vol.10 No.3 343-348 (6 pages)
SEY2102에서 발현 분비시키고 각 분획으로 나누어 LCI양을 비교한 결과 protoplast 68.6 %. periplasmic 24 %, culture supernatant 7.4%로 분포하였다. pYGLPT5로 형질전환된 S. cereviswe 2102를 유가 배양한 결과, 최종적인 LCI의 생산량은 약 $500mg/ell$ 였다. LCI은 N 말단 부근에 $CA^{++}$ 결합부위가 있으므로 이를 이용하여 hydroxylapatite column chromatography로 정 제하 였다. 배지로 분비된 34kDa LCI을 ultrafiltration 과 hydroxylapatite column chromatography 의 두 단계로 순도 99% 이상으로 정제할 수 있었다. -
인뇨로부터 유용단백질의 통합 분리정제 공정
김기용, 정광회문흥모 한국생물공학회 한국생물공학회지 8 Pages
한국생물공학회 한국생물공학회지 1993, Vol.8 No.3 287-294 (8 pages)
분리하 기 위한 목적으로 효과적인 통합 분리정제 공정이 고안되었다. Ultrafiltration 방법을 이용한 농축과정 과 pH침전법을 전처리 단계로 사용하였고, 이어서 g gel filtration과 흡착, 이온교환, 친화, 그리고 역상 C column을 선택적으로 혼합한 chromatography를 수행하였다. 이 공정으로 정제한 urokinase, epiderm mal growth factor, albumin은 각각 SDS-polya acrylamide gel 전기이동상에서 단일의 단백질 띠로 이동하였고, 자신의 단백질 활성을 유지하고 있었다. 이들 세 가지 목적 단백질의 전체 수율은 각각 48 %... -
용규(Solanum nigrum)에서 HT29 세포에 대한 신규 항암 활성 단일 물질 분리
윤희정, 정종헌, 현숙경, 김병우, 권현주, Yun. Hee Jung, Jung. Jong Hun, Hyun. Sook Kyung, Kim. Byung Woo, Kwon. Hyun Ju 한국생명과학회 생명과학회지 8 Pages
한국생명과학회 생명과학회지 2014, Vol.24 No.3 234-241 (8 pages)
60% MeOH, MeOH)로 Diaion HP-20 column chromatography하여 4개의 fraction으로 나누었다. 이 fraction 중 $H_2O$ fraction에서 가장 뛰어난 세포 독성효과를 보였으며 몇 차례의 column chromatography를 행하여 얻어진 활성 획분을 GC-MS 및 FAB-MS 분석하였다. 분자량이 416이었으며 GC-Mass를 통하여 library search를 행한 결과 분자식 $C_{28}H_{48}O_2$인 Des-N-26-methylenedihydrotomatidine으로 확인되었다. Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine과 비슷한 구조를 가지고 있는 tomatine과 tomatidine의 HT29 세포에 대한...