용규(Solanum nigrum)에 함유된 여러 성분 중 항암 활성이 있는 물질을 분리 및 규명하고자 용규를 MeOH로 추출하고 이 추출물을 $CH_2Cl_2$, EtOAc, n-BuOH, $H_2O$로 유기용매 계통분획 하였다. 이 분획물 중 $H_2O$ 획분이 가장 뛰어난 세포 독성 효과를 보였으며 이를 다시 용매별($H_2O$, 40% MeOH, 60% MeOH, MeOH)로 Diaion HP-20 column chromatography하여 4개의 fraction으로 나누었다. 이 fraction 중 $H_2O$ fraction에서 가장 뛰어난 세포 독성효과를 보였으며 몇 차례의 column chromatography를 행하여 얻어진 활성 획분을 GC-MS 및 FAB-MS 분석하였다. 분자량이 416이었으며 GC-Mass를 통하여 library search를 행한 결과 분자식 $C_{28}H_{48}O_2$인 Des-N-26-methylenedihydrotomatidine으로 확인되었다. Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine과 비슷한 구조를 가지고 있는 tomatine과 tomatidine의 HT29 세포에 대한 세포독성효과를 확인한 결과, tomatine보다는 활성이 낮았으나 tomatidine 보다는 40 ${mu}g/ml$ 이상의 농도에서 높은 세포독성 효과를 나타내었다. Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine은 지금까지 학계에 보고되어 있지 않은 물질로, 본 연구에서 최초로 용규에서 Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine을 분리하였고, 암세포에 대한 세포 독성 효과를 보고하였다. Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine의 정상세포에서의 세포 독성 및 작용 기전 등의 추가 연구를 통해 천연 생리 활성 물질 소재로 활용 가능할 것으로 사료된다.
To identify and isolate anticancer active compounds from Solanum nigrum, S. nigrum was extracted with MeOH and then fractionated with various organic solvents ($CH_2Cl_2$, EtOAc, n-BuOH, and $H_2O$). The cytotoxic effects of the MeOH extracts from S. nigrum and its organic solvent-soluble fractions were also tested in HT29 cells. All the MeOH extracts of S. nigrum and its organic-solvent extracts induced cytotoxicity in the HT29 cells. Among the extracts, $H_2O$ was the most effective. The $H_2O$ extract was purified further by repeated silica gel, Sephadex LH-20, Diaion HP- 20, and RP-18 column chromatography. An active anticancer compound, Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine, was isolated with a molecular weight of 416 and a molecular formula of $C_{28}H_{48}O_2$. Analysis of the cytotoxic effects of Des-N-26-methylene-dihydrotomatidine on the HT29 cells compared to those of tomatine and tomatidine are similar in its structure, is higher than tomatidine above the 40 ${mu}g/ml$ concentration, but lower than tomatine. This is the first study to describe the anticancer activity of Des-N-26-methylene-dihydrotomatidin, isolated from S. nigrum. Des-N-26- methylene-dihydrotomatidine seems to have potential as a natural bioactive compound.
