사람태반 조직에서 세포질과 mitochondria 분획을 분리하였으며 세포질의 $alpha$-glycerophosphate 탈수소 효소 (G3P:$NAD^+$ 2-Oxidoreductase, EC 1.1.1.8)의 활성도는 Gonzalez-Cerozo and Dalziel 방법으로 mitochondria의 $alpha$-glycerophosphate 탈수소 효소 (G3P: Cytochrome Oxidoreductase, EC 1.1.95.5)의 활성도는 Dawson and Thorne의 방법으로 각각 측정 하였다. 세포질에 있는 NAD 의존성 효소와 mitochondria에 있는 FAD 의존성 효소의 분포를 관찰하였으며, NAD 의존성 $alpha$-glycerophosphate 탈수소 효소를 ammonium sulfate에 의한 침전, Sephadex G-100gel 여과 및 DEAE-cellulose column chromatography를 행하여 정제하였다. 정제된 효소로 몇 가지 이화학적 성상을 관찰하였으며 그 결과는 다음과 같다. 1. 태반조직의 NAD 의존성 효소의 비활성도는 신선한 조직 1g당 0.59이며 mitochondria에 있는 FAD 의존성 효소의 비활성도는 1.98로 NAD 의존성 효소보다 약 3.3배 높다. 이상과 같이 세포질 및 mitochondria의 두 구획의 활성이 높은 점으로 보아 $alpha$-glycerophosphate shuttle이 원활히 운행 된다고 생각된다. 2. 사람태반 조직의 NAD 의존성 효소는 isozyme이 없다. 3. NAD 의존성 효소의 최적 pH는 9.0이며 최적 온도는 $55^{circ}$이다. 4. NAD 의존성 효소의 $alpha$-glycerophosphate 및 $NAD^+$ 의 Km 값은 반응온 $25^{circ}$, pH 10.0에서 각각 3.9 mM 및 1.05 mM이다. 5. NAD 의존성 효소는 세포질에 약 75%가 FAD 의존성 효소는 mitochondria 분획에 약 86%가 함유되어 있다.
Alpha-glycerophosphate dehydrogenase of human term placenta has been studied. Human term placenta was fractionated by differential centrifugation into cytoplasmic and mitochondria fractions. The activity of cytoplasmic $alpha$-glycerophosphate dehydrogenase (G3P: NAD 2-oxidoreductase, EC 1. 1. 1. 8) was assayed according to the method of Gonzalez-Cerozo and the activity of mitochondrial $alpha$-glycerophosphate dehydrogenase (G3P: cytochrome oxidoreductase, EC 1. 1. 99. 5) was determined by the procedure of Dawson and Thorne. Partial purification of NAD-linked $alpha$-glycerophosphate dehydrogenase was achieved by ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-100 and DEAE-cellulose column chromatography, and the properties of the enzyme were studied. The results obtained are as follows: 1. Unusually high rate of $alpha$-glycerophosphate oxidation was found both in cytoplasm and in mitochondria. The present finding strongly suggests that the $alpha$-glycerophosphate shuttle system operates actively in human term placenta. 2. The present studies revealed that cytoplasmic NAD-linked $alpha$-glycerophosphate dehydrogenase has only one molecular form. 3. The optimal temperature of cytosolic NAD-linked enzyme is about $55^{circ}$. 4. The optimal pH for cytoplasmic NAD-linked enzyme is about 9.0. 5. The apparent Km of cytosolic NAD-Iinked $alpha$-glycerophosphate dehydrogenase at pH 10.0 is 3.9 mM for glycerophosphate and 1.05 mM for $NAD^+$.
