- 고정화(固定化) Glucose Oxidase의 반복(反復) 사용성(使用性) 연구(硏究)
- Studies on the Repeat-Usage of Immobilized Glucose Oxidase
- ㆍ 저자명
- 김성기,Kim. Sung-Kih
- ㆍ 간행물명
- 한국생화학회지
- ㆍ 권/호정보
- 1981년|14권 4호|pp.353-361 (9 pages)
- ㆍ 발행정보
- 생화학분자생물학회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
혈당(血糖)을 비롯한 탄수화물의 분해물 중의 글루코우즈를 측정하는데 사용되는 glucose oxidase를 고정화(固定化)시켜 반복해서 사용할 수 있는 조건을 검토하였다. GOD를 고정화 시킬 때의 가용성 GOD의 단위가 1~2일 때 그 잔여활성은 80 % 정도였고 가용성 GOD의 단위의 증가에 비례하여 잔존활성은 증가되지 않았다. 고정화 GOD의 bead의 크기가 0.3 mm로 작을 때 그 잔존활성은 85.5 %로 높았고 bead가 커질수록 그 잔존활성은 점점 저하되었다. GOD의 pH에 대한 안정성은 가용성 GOD를 pH 5.5에 10시간 처리했을 때, 60 %의 잔존활성을 보였고 고정화 GOD는 5.5~6.5에서 약 80 %정도 높은 활성을 보였다. GOD의 열에 대한 안정성은 가용성 GOD는 $35{sim}50^{circ}C$에서 10시간 처리해도 안정하였고 고정화 GOD는 $60^{circ}C$에서도 안정하였으나 그 이상의 온도에서는 모두 활성이 급격히 상실되었다. 고정화 GOD를 매일 일회씩 30회 계속하여 반복 사용하여도 활성에 변화가 없었다. 고정화 GOD를 실온에서 건조하여 보관할 경우 활성이 저하되었으나 phosphate 완충액 또는 냉동건조시킨 후 $-5^{circ}C$에 보관할 경우 큰 변화가 없었다. 고정화 GOD를 이용하여 글루코우즈는 일정하게 측정되었다.
Glucose oxidase (GOD) was immobilized by polyacrylamide entrapment to use respeatedly for the determination of glucose in blood and hydrolyzates of polysaccharides. The retained activity of immobilized GOD was about 80 % when 1~2 unit of the native GOD was applied for immobilization, but the GOD activity was not retained in proportion to increment of GOD unit. The immobilized GOD had 85.5% of the ratained activity for 0.3 mm of bead diameter. The enzyme activity, however, decreased as size of of bead increased. In pH stability of the enzyme, the residual activity of the native GOD was 60% when the enzyme was pretreated at pH 5.5 for 10 hr, while the residual activity of immobilized one was about 80% when at pH 5.5~6.5. The GOD had higher thermal stability when the native enzyme was preincubated at $35{sim}50{circ}C$ for 10 hr and immobilized one at $35{sim}60{circ}C$. There was no significant decrease of the immobilized enzyme activity by using repeatedly in batch reactor one time per day for 30 times. The retained activity of immobilized GOD decrease remarkably when the product was stored at room temperature for 4 months in dry state. Lyophilized enzyme and the enzyme in phosphate buffer solution at $-5{cirs}C$ showed a tendency to decrease depending on the storage period. The linear curve was obtained by determination of various concentrations of D-glucose by the immobilized GOD.