소의 제4위점막으로부터 펩시노오젠 mRNA를 부분정제 하였다. 이것은 pBR322-SV 40 하이브리드 플라스마드 DNA 프라이머 위에 소의 펩시노오젠 cDNA을 합성할 때 주형으로 삼았으며, 링커 DNA로서 고리화하고 E. coli (DH 1)의 형질전환에 사용하였다. 얻어진 형질전환 세포는 $^{32}P$-표지 poly($A^+$)RNA를 사용하여 in situ differential 하이브리드 형성반응으로 스크린하였다. 스크린된 600의 형질전환 세 포 가운데, 8 클론이 differential 양성으로 나타났고, 그 중 하나가 약 900 염기쌍으로 된 insert를 가지고 있었으며, 하이브리드-선택 번역반응으로 펩시노오젠을 합성하는 mRNA 임이 밝혀졌다. 이 cDNA를 probe로 사용하여 소의 주요 펩시노오젠 mRNA의 크기를 알아보았다.
Bovine pepsinogen mRNA was partially purified from fourth stomach mucosa of cow. This preparation was used as the template for synthesis of cDNA on a pBR322-SV 40 hybrid plasmid DNA primer which was then circularized with linker DNA and used to transform E. coli. The resulting transformants were screened by in situ differential hybridzation using $^{32}P$-labeled poly($A^+$)RNA. Of 600 transformants screened, 8 were found to hybridize differentially; 1 of these contained an insert of about 900 base pairs and hybrid-selected a mRNA which directed synthesis of pepsinogen in a cell-free translation system. Using this cDNA as a probe, we studied the size of the major pepsinogen mRNA.
