쥐 간의 catechol-o-methyltransferase(COMT)를 정제해서 그 특성을 조사하였다. 이 효소는 산성용액 침전, ($(NH_4)_2SO_4$침전, Sephadex G-100젤 크로마토그라피법 및 DEAE-셀룰로즈 이온교환수지로 정제하였다. COMT는 23%의 회수율로 147배 정제되었다. 정제된 효소로 SDS-PAGE를 실시했을때, 하나의 주된 단백질 때와 몇개의 연한 단백질 띠를 나타내었다. p-Nitrocatechol에 대한 COMT의 $K_m$ 값은 3.8 ${mu}M$이며, SAM에 대해서는 283 ${mu}M$의 값을 가졌다. 효소활성의 최적 pH는 phosphate buffer에서 7,8로 얻어졌으며, $50^{circ}C$에서 최고의 효소 활성을 보였다. 효소의 적절한 활성을 위해서는 마그네슘 이온이 필요하며, 2 mM 이상의 농도에서는 효소활성이 포화되었다. 높은 이온 강도에서는 효소활성이 감소되었다. SDS-PAGE로부터 COMT의 분자량은 25,700으로 얻어졌다. Sulfhydryl group에 특이하게 반응하는 시약인 iodoacetic acid로 효소를 처리했을 때 효소 활성도가 감소되었다.
Catechol-O-methyltransferase (COMT; E.C. 2.1.1.6) from rat liver was purified and characterized. The purification steps involved acid precipitation, ammmonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 gel filtration chromatography, and DEAE-cellulose ion-exchange chromatography. COMT was purified 147-fold with 23% recovery. On the SDS-PAGE, the final preparation showed one major band and a few minor bands. The $K_m$ value of COMT for p-nitrocatechol was 3.8 ${mu}M$ and that for SAM was 283 ${mu}M$. Magnesium ion was required for the optimal enzyme activity and the pH optimum was 7.8 with phosphate buffer. Maximum activity was exerted at $50^{circ}C$. High ionic strength resulted in inactivation of the enzyme. The molecular weight was estimated as 25,700 by SDS-PAGE. When COMT was treated with a sulfhydryl group modifying reagent, iodoacetic acid, the inhibition of the enzyme activity was observed.
