Pseudomonas carboxydovorans에는 2.8 kb의 small plasmid (pYK 100)가 존재하는데, 이 plasmid에는 plasmid가 curing된 세균에서 유도되는 일산화탄소산화효소의 변형과 관계된 유전자가 존재하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 AluI, MboI, NruI, SstII, HinfI, NcoI, AvaI, HaeII, HincII 등의 제한효소를 사용하여 이 plasmid의 제한효소 지도를 만들었다. 제한효소 중에서 MboI과 NruI, SstII, HinfI, NcoI, AvaI, HaeII 자리는 AluI 자리를 기준으로 하여 이들 효소를 복합적으로 사용, 여러번의 절단실험을 하여 결정하였고, HincII 자리는 AluI, HincII, SstII, HinfI을 복합적으로 사용하여 얻은 pYK100 DNA 조각과 HincII로 부분절단한 pYK100 DNA 조각의 크기를 비교분석, AluI 자리를 기준으로 그 위치를 결정하였다. 그리고 P. carboxydovorans에는 세포 하나에 약 두개의 pYK100가 존재하고 있는 것으로 밝혀졌다.
The small plasmid pYK100 (2.8 kb) of Pseudomonas carboxydovorans is known to carry gene(s) for modification of carbon monoxide dehydrogenase in plasmid-cured cells of the same strain. The plasmid was physically mapped with several restriction endonucleases AluI, MboI, NruI, sstII, HinfI, NcoI, AvaI, HaeII, and HincII. The cleavage sites for MboI, NruI, SstII, HinfI, NcoI, AvaI, and HaeII were determined by multiple digestion mapping of these sites with regard to the AluI site. A HindI fragment map was obtained by analysis of pYK100 digested with combinations of AluI, HincII, SstII, and HinfI in conjunction with partial digestion mapping of HincII sites in relation to the AluI site. The copy number of pYK1000 was determined to be around two per cell using pBR322 as a standard.
