구름버섯은 항종양작용이 인정되었으며 근자에는 AIDS virus에 대한 억제효과가 보고되고 있다. 이와 같은 약효를 인정받고 있는 구름버섯 균주간의 세포융합이나 구름버섯과 타 유효한 버섯과 세포융합을 시행함으로써 더욱 효능이 우수하거나 다양한 균주의 약효를 한 균주내에서 기대할 수 있는 새로운 균주의 개발이 가능하다. 이러한 목적으로 구름버섯의 원형질체융합을 시행하기 위하여, 원형질체분리, 재생 및 두 영양요구주의 융합에 관하여 실험하였다. 균사체를 2.5일간 셀로판지위에서 배양하여 Novozym 234와 cellulase Onozuka R-10이 각각 15 mg/ml와 10 mg/ml 포함되어 있는 0.6M sucrose 용액에 넣어 $30^{circ}C$에서 3-4.5시간 반응시킬 때 원형질체 수득률이 가장 높았다. 삼투압 안정제로 0.6M sucrose는 원형질체 형성과 재생에서 최적조건이었다. 0.6M sucrose를 포함하는 고체배지에서의 재생빈도는 3.48%이었으며 UV 조사시 생존률은 0.02-7.4%이었다. 원형질체융합은 $30^{circ}C$에서 10분 동안 polyethylene glycol(M.W. 4,000)을 이용하여 시행하였는데 그 융합빈도는 1.86%이었다.
To establish basic techniques for protoplast fusion of Coriolus versicolor several factors affecting protoplast formation and regeneration were investigated. Protoplast isolation was at maximum with 2.5-day cultured mycelia of C. versicolor treated with the combination of two enzymes, Novozym 234 (10 mg/ml) and cellulase Onozuka R-10 (15 mg/ml), for 3-4.5 hours at $30^{circ}C.$ As an osmotic stabilizer for stabilizing the protoplast, 0.6 M sucrose was the best for formation and regeneration of the protoplast from the mycelia of the fungus and the regeneration frequency was 3.48%. Protoplast fusion was made by a modified method of Peberdy using PEG (M.W. 4,000). The fusion frequency between two mutants of C. versicolor was 1.86% and the fusion products showed differences in growth rate and colony morphology.
