- 수계바이러스검출에 PCR을 이용하기 위한 효과적인 농축기법
- ㆍ 저자명
- 이승훈,김상종
- ㆍ 간행물명
- 미생물학회지
- ㆍ 권/호정보
- 1999년|35권 1호|pp.41-46 (6 pages)
- ㆍ 발행정보
- 한국미생물학회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
수계에 분포하는 장바이러스를 검출하기 위해 민감도가 높고 검출시간이 빠른 PCR법을 이용하였다. 바이러스입자를 보다 순수하게 농축하기 위해 몇 가지 바이러스농축법을 비교조사하고 그것의 변형을 통하여 개선된 방법을 확립하였다. 비교한 농축방법중 흡탈착/Polyethyleneglycol(PEG) 침전법과 플록화/촉속원심분리법을 통해 10 PFU $ml^{-1}$ 까지 검출이 가능하여 다른 방법에 비해 효과적임이 판명되어Te. Sephadex resin을 이용한 부가적인 시료정제 과정을 통해 시료의 순도를 높일 수 있어검출한계를 10배정도 낮추었다. 서정된 검출법을 통해 한강수계에서 장바이러스의 분포를 조사한 결과 조사한 시료중 한강의 지천에서는 75%, 본류에서는 20%의 시료에서 바이러스가 검출되었다. 본 조사결과 흡탈착/PEG 침전법-PCR 검출기법이 수계의 바이러스 오염도를 간편하고 신속하게 검출하는데 매우 유용하였으며 국내 수계에도 바이러스 오염이 광범위함을 확인하였다.
In detecting pathogeuic viruses in water sample, polymerase-chain-reaction (PCR) amplification was uscd. In order lo obtain the intact viral particlc, five concentration techniques were compared and an improved procedure was developed with some modifications. Among them, adsorption-elution~EG precipitation and flocculatio~~iultracentriEugation were more efficient than others with thc detection limit of 10 PFU $ml^{-1}$. By the additional step removing inhibitory compounds for PCR reaction, the purity of the concentrated sample was improved and the detection limit was lowered by one order (to 1 PFU $ml^{-1}$. To examine the availability of the optimized procedure for field surveys, the distributions of enterovirus in Han River were estimated using the novel procedure. Seventy-five percentage (618) of sewagc samples and twenty percentage (2110) of river water samples were positive for enterovirus. These results indicate that adsorption-elutionPEG precipitation by PCR method is useful for the prompt and handy monitoring of viral contaminaiton in water environment and pathogenic viruses are widely distributed in water environments of Seoul.