홍삼으로부터 홍삼알콜 추출물을 제조하고 부산물로 생성된 홍삼추출잔사로부터 한외 여과를 이용하여 홍삼산성다당체(RGAP, red ginseng acidic polysaccharide)를 대량으로 분리할 수 있는 방법을 개발하였다. 본 방법으로 홍삼추출잔사로부터 분리된 RGAP의 수율은 20.9%이었고, RGAP로부터 지표성분인 활성성분(GFP)의 분리수율은 39.4%이었다. 분리된 RGAP는 macrophage에 의한 NO(nitric oxide)를 생성하여 암세포를 사멸시키는 것으로 나타났다. RGAP를 BALB/c 마우스에 복강투여한 후 분리된 복강 macrophage를 P815 암세포(mastocytoma)와 함께 배양하였을 때 배지내의 NO 농도는 대조군에서 4.3 $mu extrm{m}$이었으나, RGAP 100, 300 mg/kg 투여군에서는 각각 9.8 및 25.3$mu extrm{m}$로 증가하는 경향을 나타내었다. 아울러 암세포인 P8l5세포의 사멸율도 정상대조군일 경우 7.3%이었으나 RGAP 100, 300 mg/kg 투여군에서는 각각 22.7 및 31.8%로 증가하는 경향을 나타내었다. RGAP을 2M의 TFA로 10$0^{circ}C$에서 1시간 가수분해한 후 당 표준품과 TLC로 비교한 결과 당 표준품과 Rf치 및 발색 색깔이 일치하는 4개의 spot, 즉 rhamnose(Rf 0.78, 노란색 ), glucose(Rf 0.61, 녹색), galactose(Rf 0.56, 녹색), glucuronic acid(Rf 0.36, 황갈색)를 관찰할 수 있었다. 가수분해된 RGAP 분해산물을 Gl(glucose)부터 G7(maltoheptaose)까지의 당류와 함께 TLC를 행한 결과 진한 색상을 나타내는 spot은 Rf 0.56~0.61로 G2(maltose, Rf 0.46) 이상의 단당류(monosaccharide)인 것으로 나타났다. RGAP의 일부 이화학적 특성을 조사한 결과 pH는 4.74, 건조감량은 4.72%, 조단백질 함량은 3.30%, 회분은 4.74%이었고 중금속인 Pb는 2.30 ppm이었다.
This study was carried out in order to develop the method for isolation of red ginseng acidic polysaccharide (RGAP) haying immunomodulating antitumor activity from red ginseng by-product. The red ginseng by-product was obtained from red ginseng residues produced in processing of red ginseng ethanol extract. The yield of RGAP isolated by ultrafiltration was 20.9%. The active substance (GFP) was purified by DEAE-sepharose column chromatography RGAP induced nitric oxide (NO) exhibited tumoricidal activities against P8l5 (mastocytoma) tumor cells. Acid-hydrolyzed RGAP fragments were shown four to five spots. These sopts showed the same R$_{f}$ values with sugars designated as rhamnose, glucose, glactose and glucuronic acid. Some physico-chemical properties of RGAP were investigated. pH and dry reduction content at 105$^{circ}C$ were 4.74 and 4.72%, respectively. Crude protein, ash and Pb contents were 3.30%, 4.74% and 2.30 ppm. These results suggest that we will be able to produce RGAP from red ginseng by-product by ultrafiltration in a large scale.e.
