냉각이 개 정자의 기능(생존력, 활력, 첨체고유성)과 형태(기형율)에 미치는 영향을 알아보기 위해 23마리 개의 정소상체에서 정자를 회수하여 다음과 같은 실험에 사용하였다. 정자를 3% BSA가 첨가된 0.3M glucose(G-BSA)에 희석한 후 실험 1에서 서로 다른 온도, 0, 10, $37^{circ}C$에 30분동안 냉각하여 $37^{circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력, 생존력, 첨체고유성을 검사하였다. 실험 2에서 $0^{circ}C$와 4$^{circ}C$에서 정자를 서로 다른 시간 (5, 10, 15, 30분)동안 노출시켜 $37^{circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력 및 생존력을 검사하였다. 또한 sugars가 개정자의 기능과 형태에 미치는 영향을 알아보기 위해 여러 종류의 sugars (0.3M)를 준비하고 $0^{circ}C$에서 정자를 sugardyddor에 노출시켜 $37^{circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력, 생존력 및 기형정도를 관찰하였다. 본 실험결과 개 정조상체유래의 정자는 냉각온도가 감소할수록 정자의 기능이 급격하게 감소하여 냉각에 민감하게 나타났다.(P<0.05), 특히 정자의 활력이 다른 정자의 기능, 생존력과 첨체고유성에 비해 냉각에 민감하게 나타났다. 정자를 $0^{circ}C$와 $4^{circ}C$에서 서로 다른 시간(5, 10, 15, 30분) 동안 냉각하였을 때 30분 동안 냉각된 정자가 그 외의 시간 동안 냉각된 정자에 비해 생존력이 저하되었다. (P<0.05). 이상의 결과 개 정소상체유래의 정자는 냉각에 비교적 민감하였으며 정자의 냉각에 대한 민감성을 완화시키는 첨가제로 단당류뿐만 아니라 다당류에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
Dog spermatozoa were recovered from the caudae epididymides of 23 domestic dogs which were 11 pure breed and 12 mix-breed dogs ranging in age from 0.6 to 3 years. The experimental designs were as follows: 1) the effect of chilling to 0. 10 or 37$^{circ}C$. 2) the kinetics of chilling injury at 0 or 4$^{circ}C$, and 3) the effect of sugars at $0^{circ}C$. Viable spermatozoa were recovered by percoll gradient separation and adjusted to 5${ imes}$10$^{7}$ spermatozoa/ml. In experiment 1, spermatozoa were diluted with 0.33 M glucose supplemented with 3% BSA (G-BSA) at 1:2 dilution. Spermatozoa were loaded into straws and exposed at 0, 10 or 37$^{circ}C$ for 30 min. In experiment 2, spermatozoa were prepared as the experiment 1 and exposed for 0.5, 5, 15, or 30 min at 0 or 4$^{circ}C$. In experiment 3, spermatozoa were diluted with different sugars (0.33 M galactose, glucose, fructose, mannitol, lactose, sucrose, raffinose) and cooled to $0^{circ}C$ for 30 min. Sperm membrane integrity, motility and acrosome integrity were assayed after rewarming at 37$^{circ}C$ for 5 min. Sperm motility and membrane integrity abruptly decreased with decreasing temperature but acrosome integrity gradually decreased (P<0.05). Sperm motility was more sensitive to cold shock than membrane integrity and acrosome integrity. Spermatozoa cooled to $0^{circ}C$ were more damaged than those at 4$^{circ}C$. Sperm motility was not different among exposed times at both. 0 and 4$^{circ}C$. However, membrane integrity of spermatozoa exposed for 30 min at both 0 and 4$^{circ}C$ was significantly lower (P<0.05). Spermatozoa diluted in 0.33 M fructose or galactose showed lower motility and higher morphological abnormality with coiled tail at $0^{circ}C$. These sperm characteristics were strongly related. These results indicate that dog epididymal spermatozoa are relatively sensitive to rapid cooling and higher morphological abnormality at $0^{circ}C$ was shown in spermatozoa diluted in fructose and galactose.
