대계는 전통 한의학에서 약용 물질로 널리 쓰이고 있으므로, 대계의 약침을 조제하여 항산화적 활성을 검증해 보았다. 실험의 재료로 쓰인 대계는 동국대학교 한의과대학 부속 한방 병원에서 구입하여 사용하였고 (경상북도 경주), 이를 약침액으로 조제한 후 동결 건조 방법으로 5.1 %의 분말을 회수 하였다. 대계 약침액의 항산화 능력을 측정하기 위하여 DPPH자유기의 소거능은 Gyamfi et al. 의 방법을 따랐고, superoxide radicals $(O_2^-{cdot})$ 소거능은 Gotoh et al.의 방법을 일부 수정하여 사용하였다. Hydroxyl radicals의 직접적인 소거능과 iron ions 사이의 관계는 deoxyribose assay를 통하여 검증하였다. 이상의 실험 결과에서 1) Non-site-specific scavenging assay (hydroxyl radicals, OH) 및 2) Site-specific scavenging assay (chelate iron ions) 그리고 3) 전산화 효과에서 모두 대계 약침액은 농도 의존적인 저해 효과를 보였으며, 특히 pro-oxidant 실험에서는 산화를 촉진하지 않는 것으로 나타났다. 끝으로 hydorxyl radical에 의하여 매개되는 DNA의 분절 효과를 적절하게 방어하는 것을 관찰할 수 있었다. 따라서 대계 약침액은 산화적 스트레스를 직접적으로 방어 하고, 다양한 산화적 손상에 의한 병증을 예방할 것으로 사료된다.
Objectives : Circium japonicum is a pharmacologically active used in traditional Korean medicine. An aqua-acupuncture solution of the Circium japonicum was assessed to determine the mechanism of its antioxidant activity. Materials : Circium japonicum was obtained from a Dongguk Korean Medicine Hospital (Kyung-ju, Kyungbuk). The freeze-dry powder was collected (yield 5.1%) for the aqua-acupuncture solution. Scavenging activity on DPPH free radicals by the Circium japonicum aqua-acupuncture solution (CJAS) was assessed according to the method followed by Gyamfi et al.. and then scavenging activity orl superoxide radicals $(O_2^-{cdot})$ was assessed by the method described by Gotoh et al. with slight modification. Deoxyribose assay to determine the rate constant for the reactions between either antioxidants and hydroxyl radicals or antioxidants and iron ions. We tested by; (1) Non-site-specific scavenging assay (hydroxyl radicals, OH), (2) Site-specific scavenging assay (chelate iron ions), and (3) Pro-oxidant effect of the CJAS on iron dependent hydroxyl radical generation. Finally, we determined hydroxyl radical-mediated DNA nicking formation. Conclusion : Our study demonstrated that CJAS has antioxidant activities and we investigated the potential effectiveness of CJAS in preventing oxidative stress-mediated disease further.
