수지상세포는 종양면역에서 필수적인 강력한 CTL 반응을 개시할 수 있는 유일한 세포이다 . 특히 외인성 종양항원에 대한 CTL 반응 유도는 활성화된 수지상세포의 IL-12 분비를 통한 CD4+ helper T세포의 cross-priming을 필요로 한다. 그러나 최근에 활성화된 수지상세포는 $Th_1$ 면역반응을 유도하지만 활성화 시간이 경과함에 따라 오히려 $Th_2$반응을 유도 할 수 있다. 따라서 본 연구에서는 OVA를 종양항원 모델로 설정하여 종양특이적인 CTL 반응을 형성하기 위한 최적의 수지상세포 활성화 조건을 조사하였다. 마우스 골수세포에 서 수지상세포로의 분화는 항원제시 기능을 위한 표면분자의 발현 측면에서 볼 때 배양 6일-7일 정도가 적합하였다. 수지상세포의 IL-12 생성능은 배양 6일 이상, OVA 항원 탑재 8시간 이상의 경우에 연이은 LPS 성숙자극으로 오히려 감소하는 경향을 보였다. 즉 배양 6일의 수지상세포에 OVA 항원 탑재를 8시간 수행한 경우(8-h DC)가 in vitro에서의 IL-12생성능, ex vivo에서의 세포내 $IFN-{gamma}$를 발현하는 CD8+ T세포의 증가 및 OVA 특이적인 세포독성효과 등에서 가장 좋은 결과를 보였다. 또한 in vivo에서 종양 치료 및 예방효과에서도 8-h DC로 면역한 경우에 가장 우수한 종양형성 억제 효과와 생존기간 연장효과를 보였다. 현재 대부분의 수지상 세포를 이용한 항종양 백신에서 항원 탑재반응을 24시간 동안 수행하고 있으나, 본 실험의 결과로 볼 때, 8시간의 in vitro 항원 탑재가 보다 효과적인 종양특이적 CTL 반응과 항종양 면역반응을 유도함을 알 수 있다. 결론적으로 본 연구를 통하여 8시간 이상의 항원접촉은 수지상세포의 기능적 활성능력을 오히려 고갈시킬 수 있음을 제시한다. sparfloxacin 과 같은 quinolone 계 항생물질은 tetracycline이나 erythromycin에 단독 혹은 모두에 저항성인 M. pneumoniae 균주에도 감수성이었으므로 이들 균에 의한 감염증의 치료에 이용할 수 있는 약제이었으나, ofloxacin, ciprofloxacin, clarithromycin 등의 약제 선택에는 항생물질에 대한 감수성검사를 실시하여 적절한 항생제를 선택하는 등의 각별한 주의가 요망된다.장하였다. 한편 그가 ${ulcorner}$소문대요(素門大要)${lrcorner}$를 저술하면서 저본(底本)으로 삼았던 것은 명대(明代)에 간행(刊行)된 고종덕목(顧從德本)이라고 할 수 있다. 이규준(李圭晙)은 고종덕목(顧從德本)을 저본(底本)으로 하여 ${ulcorner}$소문(素問)${lrcorner}$의 문장을 해석하였고, 아울러 교감(校勘)을 병행하였는데 그의 교감법(校勘法)은 일정한 판본(版本)에 근거한 것이 아니라 자신의 ${ulcorner}$소문(素問)${lrcorner}$ 에 대한 이해를 중심으로 교감(校勘)을 하였다. 또한 그는 훈고학 방면에서도 일정한 식견을 갖추고 있는 것으로 확인되었다. 마지막으로 ${ulcorner}$소문대요(素門大要)${lrcorner}$ 는 간행본(刊行本)과 수초본(手抄本)이 유행되고 있는데, 수초본(手抄本)의 경우 와전(訛傳)된 글자가 많으니 간행본(刊行本) 및 ${ulcorner}$소문(素問)${lrcorner}$의 원문과 대조하여 잘못된 글자를 바로잡을 필요가 있다..(鼎內之飯就是太陰陽明經). ${ulcorner}$령추음양계일월(靈樞陰陽緊日
Dendritic cells (DCs) are the only antigen presenting cells (APCs) capable of initiating immune responses, which is crucial for priming the specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) response and tumor immunity. Upon activation by DCs, CD4+ helper T cells can cross-prime CD8+ CTLs via IL-12. However, recently activated DCs were described to prime in vitro strong T helper cell type 1 $(Th_1)$ responses, whereas at later time points, they preferentially prime $Th_2$ cells. Therfore, we examined in this study the optimum kinetic state of DCs activation impacted on in vivo priming of tumor-specific CTLs by using ovalbumin (OVA) tumor antigen model. Bone-marrow-derived DCs showed an appropriate expression of surface MHC and costimulatory molecules after 6 or 7-day differentiation. The 6-day differentiated DCs pulsed with OVA antigen for 8 h (8-h DC) and followed by restimulation with LPS for 24 h maintained high interleukin (IL)-12 production potential, accompanying the decreased level in their secretion by delayed re-exposure time to LPS. Furthermore, immunization with 8-h DC induced higher intracellular $interferon(IFN)-{gamma}+/CD8+T$ cells and elicited more powerful cytotoxicity of splenocytes to EG7 cells, a clone of EL4 cells transfected with an OVA cDNA, than immunization with 24-h DC. In the animal study for the evaluation of therapeutic or protective antitumor immunity, immunization with 8-h DC induced an effective antitumor immunity against tumor of EG7 cells and completely protected mice from tumor formation and prolonged survival, respectively. The most commonly used and clinically applied DC-based vaccine is based on in vitro antigen loading for 24 h. However, our data indicated that antigen stimulation over 8 h decreased antitumor immunity with functional exhaustion of DCs, and that the 8-h DC would be an optimum activation state impacted on in vivo priming of tumor-specific CTLs and subsequently lead to induction of strong antitumor immunity.
