충북, 충남, 강원도 일대에서 채취한 토양시료로부터 Bt 균주를 분리하고 이들 균주 중 세포내 내독소 단백질 결정체를 형성한 10개의 균주를 분리하여 균체생산수율과 살충력이 뛰어난 균주를 선발하기 위해서 배양 및 생물검정 시험을 수행하였다. 그 결과, 배추좀나방에 대한 살충력은 물론이고, 파밤나방과 담배거세미나방에 대한 살충력도 상대적으로 높고, 배추좀나방 저항성 계통에 대한 살충력이 우수하면서 균체량과 활성포자수가 많은 GB-413 균주를 최종 선발하였다. 선발된 균주의 상업적 생산 적용을 위해 배양특성 및 배양 공정 최적화 실험을 수행하였다. 탄소원인 초기 포도당 농도를 낮추어 포자형성이 유도되도록 배지조성을 변경하고 배양 중에 탄소원을 첨가하는 방식으로 배양공정을 변경한 결과, 포자형성율과 활성포자수가 증가하였고 포자형성시간 및 배양시간이 단축되었으며, 살충확성의 저하는 나타나지 않았다. 이렇게 최적화된 생산배지 및 공정을 5톤 발효조 배양에 최종 적용한 결과 유사한 배양결과를 얻어 상업화생산을 위한 대량배양의 가능성을 높여주었다.
This experiment was conducted to select prominent microorganisms with a good insecticidal activity among the ten species, which isolated from soil at the near of Chung-buk, Chung-nam, and Gang-won provinces and made protein crystal endotoxin. As a result, GB-413 strain was finally selected, which showed the high insecticidal activity against susceptible diamondback moth (Plutella xylostella), beet army worm (Spodoptera exigua) and tobacco cutworm (Spodoptera litura) as well as resistant diamondback moth strains. By modifying the cultivation process f.g. lowing the glucose concentration at early cultivation stage and adding the carbon after inducing the spores, the percentage of making spore as well as the number of active spore were increased and the time for cultivation and spore forming was reduced without a reduction of insecticidal activity. These results were not only applied successfully for the optimized cultivation process for a fermentation tank containing five tons capacity, but also improved the possibility of mass cultivation for commercial production.
