- 과량 생산된 대장균 laccase의 정제 및 특성
- ㆍ 저자명
- 홍준혁,김현정,김우연,Hong. June-Hyuk,Kim. Hyun-Jung,Kim. Woo-Yeon
- ㆍ 간행물명
- 한국응용생명화학회지
- ㆍ 권/호정보
- 2007년|50권 2호|pp.107-110 (4 pages)
- ㆍ 발행정보
- 한국응용생명화학회
- ㆍ 파일정보
- 정기간행물| PDF텍스트
- ㆍ 주제분야
- 기타
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일반적 대장균 배지 조건에서는 발현되지 않는 대장균 K-12의 laccase gene(yacK)을 PCR로 증폭한 후 pET28c에 클로닝하여 과량 발현시켰다. 과량 생산된 laccase를 His-affinity 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. SDS-PAGE 방법으로 확인한 과량 발현된 단백질의 분자량은 약 55,000이었으며, guaiacol 용액과 agar 배지에서 역가를 보여주었고 최적 온도는 65$^{circ}C$, 최적 pH는 5이었다.
The putative laccase gene, yacK of Escherichia coli, K-12 is not expressed in lab culture conditions. The laccase gene was amplified by PCR and subcloned into pET28a vector. The laccase overproduced in E. coli harboring pET28a was purified by His-affinity column chromatography. The purified laccase, which has the apparent molecular weight of 55,000 on the SDS-polyacrylamide gel showed enzyme activity on the guaiacol solution and agar plate. Optimum temperature and pH were around 65$^{circ}C$ and 5.0, respectively.