본 연구에서는 항암제와 면역 조절제로 널리 사용되는 차가버섯을 피부 미백제로 이용할 수 있는지 가능성을 알아보기 위해 멜라닌생성 저해 효과와 자외선 차단 작용과 관련된 여러 실험을 수행하였다. 메탄올을 이용해 차가버섯의 자실체에서 추출한 물질의 총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량은 각각 31.85 mg/g과 28.33 mg/g으로 측정되었다. B16/F10 melanoma와 NIH3T3 세포주에 추출물의 농도를 10~500 ${mu}g/mL$으로 처리한 세포생존율 시험에서 시험 세포주의 52% 이상이 생존하여 세포독성은 없는 것으로 확인되었다. DPPH 라디칼 소거 활성과 금속이온 제거능 등의 항산화 시험에서 추출물의 항산화 활성은 양성대조군인 tocopherol이나 BHT에 비해 낮았으나 추출물의 농도가 높아짐에 따라 항산화 활성은 비례적으로 증가하였다. 멜라닌 합성의 초기단계에 관여하는 티로시나아제와 L-DOPA에 차가버섯 메탄올 추출물과 양성대조군인 kojic acid와 arbutin을 각각 직접 처리하고 저해 효과를 측정한 결과 추출물은 양성 대조군인 kojic acid 및 arbutin에 비해 저해 효과가 매우 낮았다. B16/F10 Melanoma 세포에 추출물과 arbutin을 처리하고 세포내 티로시나아제의 저해 활성을 조사한 결과, 100 ${mu}g/mL$의 농도에서 추출물은 68.59%, arbutin은 58.36%의 활성이 저해되어 메탄올 추출물이 arbutin에 비해 티로시나아제 저해활성이 약 10% 높았다. 또한, B16/F10 melanoma 세포에 차가버섯 추출물과 arbutin을 처리하여 생성된 멜라닌의 양을 측정한 결과, 추출물과 arbutin을 처리한 모든 군에서 생성된 멜라닌의 양은 유사하였으며, 처리 농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 생성된 멜라닌의 양은 감소하였다. 따라서 차가버섯 메탄올 추출물은 세포 밖에서 직접 티로시나아제를 저해하는 작용은 양성 대조군에비해 매우 낮았으나 melanoma 세포내에서 티로시나아제와 멜라닌의 생성을 양성대조군과 대등하게 저해하여 피부에 미백효과를 나타낼 수 있을 것으로 사료된다. 또한 차가버섯 메탄올 추출물을 200-400 nm 파장에서 분광광도계를 이용하여 흡수스펙트럼을 측정한 결과, 280-350 nm의 자외선 영역에서 흡광도가 높아 자외선을 효율적으로 차단하는 것으로 나타났다.
This study was initiated to investigate the skin whitening activities of methanol extracts from fruiting bodies of I. obliquus. The total polyphenols and flavonoids contents of I. obliquus methanol extracts were 31.85 mg/g and 28.33 mg/g, respectively. The methanol extract of the mushroom treated on B16/F10 melanoma and NIH3T3 cell lines did not show cytotoxic activity. 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) free radical scavenging activity and chelating activity on ferrous ions of I. obliquus methanol extract were lower than those of positive control, tocopherol and BHT. The tyrosinase and L-DOPA inhibitory activities of the extract were lower than those of positive control, kojic acid and ascorbic acid. The tyrosinase and melanin synthesis inhibitory activities of the melanoma cells treated with the extract were comparable with positive control, arbutin. The experimental results suggested that methanol extract of I. obliquus contained inhibitory activities of tyrosinase and melanin synthesis in the B16/F10 melanoma cells by dose dependent manner. High ultra-violet absorption spectra in the range of 280-350 nm showed that I. obliquus extract could protect skin from UV radiation damage. Therefore, fruiting bodies of I. obliquus can be used for developing skin whitening, anti-UV and skin care agents.
