Kinesin-1은 2개의 장쇄(KHCs, 또는 KIF5s)와 2개의 단쇄(KLCs)가 결합한 복합체로 되어 있다. 본 연구에서 효모 two-hybrid system을 이용하여 중추신경계의 신경세포에서 주로 발현되는 KIF5A와 결합하는 단백질을 탐색한 결과 phosphatidylinositol-3,5-bisphosphate ($PI(3,5)P_2$)의 5번 위치 인산을 제거하는 탈인산화효소 Fig4(Sac3)를 분리하였다. KIF5A는 Fig4의 C-말단과 결합함을 효모 two-hybrid assay로 확인하였다. Fig4는 KIF5A의 C-말단과 결합하지만, 두 개의 다른 장쇄인 KIF5B와 KIF5C 그리고 KLC1와는 결합하지 않았다. 단백질 간 결합을 glutathione S-transferase pull-down assay와 공동면역침강으로 추가 검증하였다. 생쥐의 뇌 파쇄액을 KIF5A 항체로 면역 침강한 결과 Fig4가 같이 침강하였다. 이러한 결과들은 kinesin-1이 Fig4와 결합한 단백질 복합체 혹은 운반체를 세포 내에서 운반함을 시사한다.
Kinesin-1 consists of two heavy chains (KHCs), also called KIF5s, and two light chains (KLCs) that form a heterotetrameric complex. Here, we demonstrate the binding of a neuronal KHC, KIF5A, to the carboxyl (C)-terminal tail region of Fig4 (also known as Sac3), a phosphatase that removes the 5-phosphate from phosphatidylinositol-3,5-bisphosphate ($PtdIns(3,5)P_2$). Fig4 bound to the C-terminal region of KIF5A but not to other KHCs (KIF5B and KIF5C) and KLC1 in yeast two-hybrid assays. The interaction was further confirmed in a glutathione S-transferase pull-down assay and by co-immunoprecipitation. Anti-KIF5A antibody co-immunoprecipitated Fig4 with KIF5A from mouse brain extracts. These results suggest that kinesin-1 could transport the Fig4-associated protein complex or cargo in cells.
