We examined the effects of EGTA and verapamil on phorbol ester-and forskolin-stimulated LH releases and LHβ subunit mRNA levels in order to verify the role of extracellular Ca++ on PKC- or cAMP-induced increases in LH release and LHβ subunit mRNA levels in cultured anterior pituitary cells of rat. Forskolin-stimulated LHβ subunit mRNA levels as well as LH release were all suppressed by prevention of Ca++ mobilization from extracellular environment, after the treatment of EGTA as a Ca++ chelator or verapamil as a Ca++ channel blocker. PMA-stimulated LHβ subunit mRNA levels were also suppressed by the treatment of EGTA and verapamil, while PMA-induced LH release was not affected. From the present study, it is, therefore, suggested that PKC activation and cAMP elevation all stimulate LHβ subunit mRNA levels and these are extracellular Ca++-dependent. However, LH releases by PKC activation and cAMP increase seem to be different each other. LH release by PKC activation is thought to be independent of extracellular Ca++. On the other hand, cAMP stimulated-LH release is thought to be dependent on the entry of extracellular Ca++.
흰쥐 뇌하수체 전엽배양세포에서 PKC나 cAMP에 의한 LH 분비와 LHβsubunit mRNA 증가과정에서 세포외 Ca++의 역할을 검증하기 위하여 phorbol ester와 forskolin에 의해 촉진된 LH 분비와 LHβ subunit mRNA 수준에 미치는 EGTA와 verapamil의 영향을 조사하였다. Forskolin에 의해 촉진된 LH 분비와 LHβ subunit mRNA 수준은 Ca++ chelator인 EGTA나 Ca++ 채널차단제인 verapamil의 처리로 세포외부로부터 Ca++의 이동을 억제시켰을때 모두 감소하였다. PMA에 의해 유도된 LH 분비는 EGTA와 verapamil 처리에 의해 영향을 받지 않았으나 PMA에 의해 촉진된 LHβ subunit mRNA는 억제되었다. 따라서 본 연구에 의하면 PKC 활성화나 세포내 cAMP 농도 증가는 LHβ subunit mRNA 수준을 증가시키며 이러한 과정은 세포외 Ca++ 의존적인 것으로 생각된다. 그러나 PKC 활성화나 cAMP 증가에 의한 세포외 Ca++의 역할이 서로 다른 양상을 보인다. PKC 활성화에 의한 LH 분비는 세포외 Ca++에 비의존적이나 cAMP에 의해 촉진된 LH 분비는 세포외 Ca++ 유입의 영향을 받는 것으로 사료된다.
