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박테리오파아지 P2-P4 시스템을 위한 tetracyclin resistance marker 함유 P4 유도체 벡터 플라스미드 조성
김경진, Kim. Kyoung-Jin 한국미생물학회 미생물학회지 5 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2003, Vol.39 No.2 118-122 (5 pages)
바이러스 조립 과정 기작 연구를 위한 좋은 재료인 박데리오파아지 P2-P4시스템에 이용될 벡터 플라스미드를 개발하기 위하여, P4 ash8 sid71을 출발 물질로 삼아 새로운 P4 유도체 벡터를 조성하였다. 유전자 재조합 기법을 써서 쉽게 선택 가능한 tetracyclin내성 유전자(tetR)를 도입하고 플라스미드P 4의 크기를 조절하였다. 이를 통해 얻어진 P4 ash8(sid7l) tetR은 12.09 kb의 크기를 가지며, 필요할 때 P2로 induction하면 생물학적 활성을 가지는 박데리오파아지로 전환 가능하였다. 전환된 파아지의 burst size를 결정하고, CsCi... -
식중독환자에서 분리한 Salmonella Enteritidis 다제내성 플라스미드의 내성유전자 집락의 구조해석
정서연, 손창규, 곽경탁, 김병천, 박완 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2002, Vol.38 No.4 299-305 (7 pages)
kb plasmid를 분리하였다. pCAST2 라고 명명한 이 다제내성 plasmid로부터 sulfonamide, streptomycin, tetracycline 내성유전자를 가지는 약 7 kb의 Sacl 단편을 클로닝 하였다. 이 7 kb 단편 염기서열의 내성유전자의 구조는 sulII-strA-strB-tetR-tetA의 집락으로 기존에 보고되지 않은 새로운 유전자 배열을 나타내었다. 본 연구에서는 내성유전자 집락을 검출할수 있는 primer를 제작하여 PCR 분석을 통해서 이들 구조를 탐지할 수 있는 방법을 제시하였다. 또한 PCR 분석을 통한 구조 비교로, 이 집락이 2002년 8월에 경북지역에서... -
Salmonella typhi KNIH100으로부터 aroA 유전자의 클로닝과 염기서열 분석
길영식, 신희정, 김영창 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2000, Vol.36 No.1 46-51 (6 pages)
5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthetase를 암호화하는 aroA 유전자를 포함하는 약 5.0 kb의 SalI절편을 pBluescriptII SK(+) vector와 aroA 돌연변이주인 E. coli CGSC2829를 이용하여 클로닝하였다. 그리고 이 클론을 pSAL80이라 명명하였다. 클로닝된 재조합 plasmid인 pSAL80에는 ATG 개시코돈과 TGA 종결코돈을 포함하는 1,284 염기로 구성된 aroA 유전자가 위치하고 있었으며, 다른 장내세균과 마찬가지로 serC와 하나의 오페론을 구성하고 있음을 밝혔다. 또한 S. typhi Ty2, S. typhimurium, 그리고 E. coli 등 다른 장내세균의... -
Bacillus circulans 기원의 Cellulolytic Xylanase 유전자의 대장균에서의 클로닝 및 발현
이동석, 김지연, 김한복 한국미생물학회 미생물학회지 7 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2000, Vol.36 No.3 196-202 (7 pages)
Bacillus circulans ATCC21367의 Cellulolytic Xylanase 유전자를 pUC19을 vector 로 하여 대장균내에서 클로닝 하였다. 재조합 plasmid pXL180은 B. circulans 로부터 유래 된 0.5 kb와 1.3 kb Pst I 절편으로 이루어진 총 1.8 kb 삽입 절편을 포함 하고 있었다. 1.3 kb 절편의 상류영역에 있는 0.5 kb 절편은 클로닝된 유전자의 정상 발현뿐만아니라 과잉 발 현에 대해서도 필수 불가결함을 확인하였다. 형질전환체는 모균 B. circulans에 의해 생산된 것보다 135배 이상 많은 xylanase를 생산하였다. 클로닝된 효소의 최적 pH와... -
Salmonella typhi KNIH100으로부터 aroD 유전자의 클로닝과 염기서열 분석
길영식, 전형규, 신희정, 김영창 한국미생물학회 미생물학회지 5 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 2000, Vol.36 No.3 187-191 (5 pages)
본 연구에서는 기 보고된Salmonella typhi KNH100의 염색체 DNA로부 터 방향족 아미노산의 생합성에 관여하는 효소인 3-dehydroquinate hydratase(3- dehydroquinate)를 암호화하는 aroD 유전자를 포함하는 약 3.2 kb의 Sal I 절편을 pSAL62 이라 명명하였다. 클로닝된 재조합 plasmid인 pSAL61에는 ATG 개시코돈과 TGA 종결코돈 을 포함하는 759 염기로 구성된 aroD 유전자가 위치하고 있었다. 또한 S. typhi Ty2, Shigella dysenteriae, 그리고 Escherichia coli 등 다른 장내 세균의 aroD 유전자와 상동성을... -
Aspergillus nidulans mtDNA의 자가복제절편
장승환, 한동민, 장광엽 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1999, Vol.35 No.3 218-225 (8 pages)
ANRI 의 일부를 포함한 pILJ16-4.5는 삽입벡터인 pILJ16보다 170배 정도 높은 형질전환 효율을 보였으며, S.cerevisiae와 마찬가지로 plasmid 상태로 회수가능했다. A.nidulans 페소내에서 2-3 copy 정도로 염색체와는 별개로 존재하는 것으로 나타났으며, 재형질전환능력도 있었다. ANRI은 미토콘드리아의 DNA에서 유래한 절편으로 밝고, ARS 공통절편과 유사한 절편도 11곳에 존재한다. $Phi$X174와 SV40 DNA에서 gyrase 가 결합하는 부위의 공통편인 YRTGNYNNY도 6곳에 존재하며, ColE1에서 gyrase가 결합하는 b site와 일치하는... -
Pseudomonas sp. DJ77 균주에서 Extradiol Dioxygenase를 암호화하는 phnQ 유전자의 클로닝과 대장균에서의 발현
신희정, 박용춘, 민경희, 김치경, 임재윤, 김영창 한국미생물학회 미생물학회지 5 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1997, Vol.33 No.1 22-26 (5 pages)
게놈 library로부터 phenanthrene 분해에 관련된 유전자를 포함하는 약 5-kb의 XhoI 절편을 pBLUESCRIPT SK(+)로 클로닝하였으며, 이 재조합 plasmid를 pUPX5라 명명하였다. 이 재조합 균주에 catechol과 2,3-dihydroxybiphenyl 용액을 분무하면 노란색의 meta-cleavage 화합물이 생성됨을 관찰 할 수 있었다. 그리고 효소 활성을 측정한 결과 catechol에서보다 2,3-dihydroxybiphenyl에 더 큰 활성을 나타냈다. 이 부분에 존재하는 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase 유전자의 위치를 결정하고, 이 유전자를 phnQ라 명명하였다. -
전분발효 효모에서의 외래 $alpha$-Amylase 유전자의 세포분열시 안정성 증진
김정희, 김근, 최영길, Kim. Jung-Hee, Kim. Keun, Choi. Yong-Keel 한국미생물학회 미생물학회지 9 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.4 271-279 (9 pages)
효모 균주를 개발하기 위하여 glucoamylase를 분비하는 Saccharomyces diastaticus hybrid 균주에 쥐의 침샘 유래의 ${alpha}$-amylase cDNA 유전자를 plasmid vector를 이용하여 도입하였다. 이 균주로부터 효소생산에 필요한 유전자를 잃어버림이 없이 안정하게 분비할 수 있도록 하기 위하여 $alpha$-amylase 유전자를 효모의 염색체에 삽입시키기 위한 integrating plasmid vector인 YIpMS$Delta$R(LEU2)를 제작하였다. 이 vector의 효모형질전환에 있어 원형(circular)상태와 제한 효소 XbaI으로 처리된 직선화된(linearized) 상태의... -
Campylobacter jejuni의 groEL 유전자 산물의 대장균에서의 Chaperon효과
임채일, 김치경, 이길재, Lim. Chae-Il, Kim. Chi-Kyung, Lee. Jae-Kil 한국미생물학회 미생물학회지 6 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.1 47-52 (6 pages)
C. jejuni의 groEL 유전자를 pWE15 cosmid를 이용하여 recombinant plasmid pLC1을 만들고, 이를 E. coli B178 groEL44 ts mutant에 형질전환시켜 E. coli LC1을 얻었다. 이 pLC1에는 groEL 유전자가 존재하는 5.7kb인 insert DNA가 포함되어 있었고, 그로부터 subcloning한 pLC101에는 groEL을 포함하는 4.0kb의 DNA가 삽입되어 있었다. 이 recombinant plasmid들이 형질전환된 E. coli LC1과 LC101 균주에서는 C. jejuni의 GroEL 단백질이 과다 생산되었다. C. jejuni의 groEL이 cloning된 E. coli LC1은 42${circ}C$에서의 생장능력이... -
Staphylococcus aureus에서 분리된 유발성 ${eta}$-Lactamase 유전자의 유전적 구성
김영선, 민경일, 변우현, Kim. Young-Sun, Min. Kyung-Il, Byeon. Woo-Hyeon 한국미생물학회 미생물학회지 8 Pages
한국미생물학회 미생물학회지 1994, Vol.32 No.1 20-27 (8 pages)
유발성 발현을 하는 ${eta}$-lactamase(bla) 유전자를 확인, 분리하였다. Cloning에 이어 결정된 염기서열을, S. aureus 에서는 지금까지는 plasmid상에서만 분리, 보고되어 있는 bla 유전자들의 염기서열과 비교하였다. 본 bla 유전자의 구조유전자 부분인 843base의 염기서열은 기 발표된 pPC1, pl258, pS1, pI1071, pUB101, pl3796 및 pI3804 유래의 bla 유전자들 중 pPC1, pI258 및 pS1상에 존재하는 bla 구조유전자의 염기서열과 완전히 일치하였고 나머지 것들과도 매우 높은 상동성(99%)을 유지하고 있었다. Bla구조 유전자의...