$(NH_4)_2;SO_4$, 분획분리, DEAE-셀룰로즈 크로마토그라피, Sephadex G-200젤 여과법, Con A-Sepharose 흡착크로마토그라피 및 Sephadex G-200젤 여과법등을 이용하여 쥐의 자궁에서 아럴썰파타아제 A를 거의 순수한 상태로 정제하였다. 아랄쎌파타아제 A는 DEAE-셀룰로즈 column에 의하여 아릴썰파타아제 B와 Bm으로부터 분리되어졌고, DEAE-셀룰로즈 column으로 부터 0.2M NaCl 선형 농도증가에 의해서 흘러나왔다. 이 효소는 마지막 단계의 회수율이 8%였으며, 207배 정제되어졌으나 Disc-폴리아크릴아마이드 젤 영동법에 의하여 단일 단백질로 정제되지는 않았다. 아릴쎌파다아제 A는 비정상적인 시간에 따른 활동도 곡선을 나다냈다. 아릴썰파타아제 A는 $37^{circ}C$에서 10 분동안의 반응에서는 pH 적정점은 pH 5.2와 pH 5.6이었는데, 60분 동안의 반응에서는 pH 5.0과 pH 5.6으로 바뀌어졌다. ${SO_4}^{2-}$, ${SO_3}^{2-}$ 및 ${PO_4}^{2-}$는 강한 방해제로서 작용하며 그들의 Ki값은 각각 $4.3{ imes}10^{-3}M$, $6.6{ imes}10^{-5}M$ 및 $3.0{ imes}10^{-5}M$이었다. $P_2{O_7}^{2-}$와 $Cu^{2+}$ 이온은 아릴쎌파다아제 A 활성도를 방해하였으나 $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Ca^{2+}$와 ascorbic acid는 활성도를 오히려 증가시켰다. 반면에 $Ag^+$와 $Cl^-$이온은 효소의 활동에 전혀 영향을 미치지 않았다. 효소의 활성도는 $60^{circ}C$까지 온도의 증가에 따라 계속 증가되 었으며 70분 동안 $60^{circ}C$에서 82%의 활동도를 유지하였다. Sephadex G-200젤 여과법에 의하여 아랄쎌파타아제 A의 분자량은 pH 5.0 과 pH 7.2에서 모두 120,000 daltons으로 나타났다.
Arylsulfatase A (aryl sulfate sulfohydrolase; E.C. 3.1.6.1) from rat uterus was highly purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-200 gel filtration. Conconavalin A-Sepharose affinity chramatography, and second gel filtration on Sephadex G-200. Arylsulfatase A was separated from arylsulfatases B and Bm by DEAE-cellulose column where arylsulfatase A was eluted at 0.2 M of NaCl linear gradient. The enzyme was purified 207-fold with 8% recovery, but disc polyacrylamide-gel electrophoresis showed that the purified preparation was not homogeneous. Arylsulfatase A showed the anomalous time-activity relationship. The $K_m$ and $V_{max}$ were 6.8 mM and 15.6 nmol/min, respectively. Arylsulfatase A had two pH optima at pH 5.2 and 5.6 for 10 min incubation time, and these optima shifted to pH 5.0 and 5.6 with incubation time of 60 min. ${SO_4}^{2-}$, ${SO_3}^{2-}$, and ${PO_4}^{2-}$ were strong inhibitors with Ki values of $4.3{ imes}10^{-3}M$, $6.6{ imes}10^{-5}M$, and $3.0{ imes}10^{-5}M$, respectively. Pyrophosphate and $Cu^{2+}$ ion inhibited arylsulfatase A but $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Ca^{2+}$, and ascorbic acid activated the enzyme activity. Siver and $Cl^-$ ion did not affect the enzyme activity. Enzyme activity was increased to $60^{circ}C$ for 10 min and thermally stable at $60^{circ}C$ for 70 min with 82% of activity. By Sephadex G-200 gel filtration the molecular weight of arylsulfatase A was 120,000 at both pH 5.0 and 7.2.
