성숙한 쥐의 자궁에서 $eta$-N-acetyl-D-glucosaminidase A를 정제 하고 그 성질을 조사하였다. $eta$-N-acetyl-D-glucosaminidase A는 암모니움 설페이트로 분리 한 뒤, DEAE-cellulose 컬럼, CM-cellulose 컬럼, Sephadex G-200 컬럼과 Concanavalin A-Sepharose 컬럼을 사용하여 정제한다. 이 효소는 443배로 정제되었고 최종적으로 24.5%의 수득률을 나타냈다. 잘 정제펀 효소는 전기 영동법에 의해 한개의 띠를 나타내었다. Sephadex G-200 컬럼에 의해 분자량을 측정한 결과 분자량은 119,000이었다. 이 효소는 pH 4.5에서 가장 큰 활동도를 나타냈고, Km 값은 1.7 mM로 나타났다. 이 효소는 $55^{circ}C$에서 열에 매우 불안정함을 나타냈다. N-Acetyl-D-glucosamine, $alpha$-methyl-D-mannoside, 초산이온, sulfite 이온은 이 효소의 활동도를 억제하고, NaCl 과소의 serum albumin은 활동도를 높여 주었다. 70%의 암모니움 설페이트 속에서 $-26^{circ}C$로 7달 동안 얼린 효소는 93%의 활동도를 나타냈다.
$eta$-N-acetyl-D-glucosaminidase A (EC 3.2.1.30) was highly purified from the well matured rat uterus using the following sequence of steps; ammonium sulphate fractionation. DEAE-cellulose. CM-cellulose. Sephadex G-200, and Concanavalin A-Sepharose chromatographies. The specific activity of the purified enzyme was 4.9 units per mg of protein with 443 fold purification and, 24.5% yield of the enzyme activity. Disc gel electrophoresis showed one major protein band. The molecular weight of $eta$-N-acetyl-D-glucosaminidase A was 119,000 by Sephadex G-200 chromatography. The enzyme had optimum activity at pH 4.5. Sodium chloride and bovine serum albumin activated the enzyme activity but $eta$-N-acetyl-D-glucosamine, $alpha$-methyl-D-mannoside, acetate, and sulphite inhibited the enzyme. The Km value was 1.7 mM with p-nitrophenyl-N-acetyl-$eta$-D-glucosaminide as substrate. $eta$-N-Acetyl-D-glucosaminidase A from rat uterus was unstable at $55^{circ}C$. The crude enzyme obtained by ammonium sulfate fractionation was highly stable, showing 93% activity after 7 months at $-26^{circ}C$.
