브롬화 시안으로 활성화시킨 Sepharose 4B에 쥐 뇌로부터 정제한 arylsulfatase A단량체를 고정화시켰다. 효소의 99%까지 고정화 시킬 수 있었으며 본래의 효소와 고정화된 효소의 일반적 성질을 비교하였다. 고정후에도 효소활성이 잘 보존되었으며, Km 값의 증가 및 pH와 열에 대한 효소안정도의 향상이외에는 효소의 일반적 성질은 거의 변하지 않았다. 이는 Sepharose 4B에 공유결합으로 고정되는 효소의 활성부위가거의 영향을 받지 않고 있음을 나타낸다. 특히 고정화된 효소도 수소이온 농도변화에 따른 최적점이 두 개로 나타나는데, 이는 단량체-이량체 결속현상으로 만은 설명되지 못함을 암시해주고 있다.
Rat brain arylsulfatase A monomer was immobilized to CNBr-activated Sepharose 4B. The coupling of the enzyme could be accomplished up to the degree of 99%. The general properties of the immobilized arylsulfatase A were compared with those of the soluble enzyme. The enzymatic activity of the enzyme was conserved well by immobilization and the catalytic properties of the immobilized enzyme were similar to the soluble one except the increased Km value and the improvement of stabilities toward heat and pH. Thus the covalent coupling of the enzyme to Sepharose 4B did not affect vitally the functional groups of the active site of the enzyme. The two-pH optima profile of the immobilized enzyme imply that the multiple pH optima of the arylsulfatase A could not be explained solely by the monomer-dimer association.
