사람의 ${alpha}_1$-proteinase inhibitor (${alpha}_1-PI$)에 대한 단일클론 항체의 생산 및 분석을 위하여 사람의 혈장을 재료로 추출법, Cibacron blue F3GA-agarose, DEAE-cellulose, Concanavalin A-Sepharose 4B, Sephadex G-100 등의 크로마토그라피 방법으로 ${alpha}_1-PI$를 분리하였다. 분리 한 ${alpha}_1-PI$는 alkaline polyacrylamide gel electrophoresis 및 SDS-PAGE 에서 단일 밴드로 나타났고, 또 immunoelectrophoresis에서도 anti-human serum 및 anti-${alpha}_1-PI$에 대해 단일 침전 arc를 나타내어 순수분리되었음을 확인하였다. 정상인 혈장 500 ml로부터 분리된 ${alpha}_1-PI$의 회수율은 약 37 %로서 52.41 mg이었고, 트립신 저해능의 비활성도는 14.29 unit/mg protein이었다. 이와같이 하여 순수정제된 ${alpha}_1-PI$를 CNBr로 처리하여 3 가지의 $CNBr^-$ 펩티드 분획인 FrI (아미노산 잔기 64-220), Fr II (아미노산 잔기 243-351) 및 Fr III (아미노산 잔기 1-63)을 각각 분리하였다.
For the preliminary step to make and characterize the monoclonal antibodies against human alpha-I-proteinase inhibitor (${alpha}_1-PI$), the ${alpha}_1-PI$molecules were isolated from 500 ml of normal human serum through the procedures including salt precipitation, Cibacron blue F3GA-agarose, DEAE-cellulose, concanavalin A-Sepharose and Sephadex G-100 gel chromatography. The isolated ${alpha}_1-PI$ proparation showed a single band both on polyacrylamide gel electrophoresis and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and also a single precipitin arc against anti-normal human serum and anti-human ${alpha}_1-PI$) antiserum on immunoelectrophoresis. The recovery of $a_1$-PI was 52.42 mg total and the specific activity of this protein was 14.29 unit/mg of protein. The CNB-c1eaved peptide fragments (Fr I: 64-220: Fr II: 243-351; Fr III: 1-63) were also isolated to homogeneity.
