알킬화된 DNA로부터 주로 3-메칠아데닌을 제거하는 유발성 효소를 고초균으로부터 DEAE-셀루로오즈와 DNA-셀루로오즈 크로마토그래피법을 사용하여 부분적으로 분리하고 이를 3-메칠아데닌 DNA 글라이코실라아제로 명명하였다. 이 효소는 N-메칠-N-니트로소유리아로 메칠화된 DNA 기질로부터 3-메칠아데닌과 3-메칠구아닌을 제거하였다. 이 때 3-메칠아데닌은 7-메칠구아닌 보다 30배나 빨리 제거되었다. 이 효소는 $O^6$-메칠구아닌은 제거시키지 못하였다. 이 효소의 활동도는 3-메칠아데닌이나 7-메칠구아닌에 의해 방해되지는 않았으며 스퍼미딘에 의해 그 활동도가 증가되었다. 이 효소의 분자량은 SDS 아크릴아미드 젤 전기영동법에 의하면 30,000 정도이었고, 셰파덱스 G-100의 젤 여과법에 따르면 23,000으로 나타났다. 효소의 등전점은 등전초점화 콜럼에서 4.7로 나타났다. 두개의 3-메칠아데닌 DNA 글라이코실라아제가 존재하는 대장균과는 달리 고초균에는 한 형태의 효소만 존재함을 확인하였다. 또한 고초균 3-메칠아데닌 DNA 보다 겹가닥 알킬화된 DNA를 선호하였다. 기질을 알킬화된 DNA를 사용했을 때 $K_m$값은 $5.15{ imes}10^{-8}M$이었다. 1 mM의 EDTA 존재하에 효소의 활동도는 약간 감소하였고 2mM $Mg^{2+}$와 $Ca^{2+}$의 존재하에 베이스의 제거가 증가되는 한편 2mM의 $Co^{2+}$와 $Mn^{2+}$은 효소의 활동도를 방해하였다. 이 효소반응의 pH 적정점은 pH6.7-7.5이었고 온도에 대해 특히 민감하였고 $37^{circ}C$에서 예민한 적정점을 나타내었다. 이 효소는 썰퍼하이드릴 그룹에 반응하는 N-메칠말레이미드와 p-클로로머큐리벤조에 의해 불활성화되었다.
An inducible enzyme which releases primarily 3-methyladenine from alkylated DNA was partially purified from Bacillus subtilis by using DEAE-cellulose and DNA-cellulose chromatography and designated as 3-methyladenine DNA glycosylase. It released 3-methyl-adenine and 7-methylguanine from DNA methylated with N-methyl-N-nitrosourea (MNU). 3-methyladenine (3-meA) was released 30 times faster than 7-methylguanine (7-meG). No detectable amount of $O^6$-methylguanine ($O^6$-meG) was released. The glycosylase activity was inhibited by neither free 3-meA nor 7-meG but was stimulated by spermidine. Apparent molecular weight was 30,000 on SDS polyacrylamide gel electrophoresis and 23,000 on Sephadex G-100 gel filtration. Its pI was 4.7 on column electrofocusing. Unlike the 3-methyladenine DNA glycosylases in Escherichia coli, no evidence for the presence of two different enzymes was found. The enzyme exhibited a preference for double-stranded alkylated DNA to the single stranded one. Apparent $K_m$ for substrate DNA was $5.15{ imes}10^{-8}M$. Addition of 1 mM EDTA slightly decreased the activity. Addition of 2 mM $Mg^{2+}$ and $Ca^{2+}$ stimulated base release, while 2 mM $Co^{2+}$ and $Mn^{2+}$ inhibited it. Optimum pH for the enzyme reaction was pH 6.7-7.5. The enzyme activity was quite sensitive to temperature and had a sharp optimum at $37^{circ}C$. The enzyme was inactivated by N-ethylmaleimide and p-chloromercuribenzoate which was known as a sulfhydryl reagents.
