효모의 질소대사에 관여하는 asparaginase II의 분비와 Nitrogen Catabolite Repression(NCR)의 조절작용을 효모 스페로플라스트를 이용하여 조사하였다. 즉 효모 스페로플라스트에서도 배지에 질소원이 부족하면 asparaginase II 생성의 억제가 제거되고, 그 억제의 제거에 필요한 시간과 효소의 생성량도 정상 효모 세포와 유사한 양상을 나타내었다. 또한 스페로플라스트에 의한 효모의 생성이 정상 세포와 동일하게 NCR의 조절기작에 의해 이루어짐이 밝혀졌다. 아울러 이 시스템을 이용하여 asparaginase II를 용이하게 정제할 수 있었으며, SDS-PAGE에서 정상세포와 동일한 두 개의 단백질 밴드를 얻었다.
We have studied the synthesis and secretion of the exoenzyme asparaginase II by yeast spheroplasts. When spheroplasts are starved for nitrogen they derepress the synthesis of asparaginase II. The time course of the derepression and the level of enzyme synthesis were comparable for spheroplast and whole cell cultures. Furthermore, spheroplast enzyme synthesis was as sensitive to nitrogen catabolite repression as was synthesis by whole cells. We have used the purification procedure in the spheroplast to show that two protein components resolved by SDS gel electrophoresis are associated with asparaginase II.
