담배거세미나방(Spodoptera litura)유충의 혈림프내에 존재하는 phenoloxidase는 전기영 동상에서 단일의 단백질형태로 존재하는 것으로 나타났다. 또한, 이 효소는 기질반응을 이용한 파장 430nm에서의 dopachrome 축적을 통해 L-dopa를 O-dopaquinone으로 전환시키는 diphenoloxidase activity를 가지고 있음이 확인되었다. 이 효소는 L-dopa를 기질로 할 때 pH8.0에서 최적의 활성을 나타내었고, 7$0^{circ}C$까지의 열안정성을 보였다. L-dopa에 대한 Km값은 pH 7.4 조건하에서 약 1.5mM로 나타났고, 등전점은 약 8.2로 판명되었다. PTU, EGTA, EDTA등을 사용한 효소활성의 억제실험에서 PTU의 경우 약 12 $mu$M에서 50%정도의 저해효과를 나타내었는데 이것으로 보아 phenoloxidase의 활성에는 구리이온이 중요 한 역할을 하는 것으로 보여진다. 또한, phenoloxidase는 일부 알코올류와 유기물질들의 첨가 그리고 여러환경 조건에 따라 활성의 변화를 보이는데, 이것으로 보아 phenoloxidase 효소계에는 체내에서 비활성형의 phenoloxidase 형태로 존재하다가 외부자극에 의하여 활성형으로 전환되는 효소활성계를 최소한 하나 이상 포함하는 것으로 생각된다.
For studies of non-self recognition in insects, we investigated the phenoloxidase (PO) system from the larval haemolymph of Spodoptera litura. PO is present in haemolymph and detected as an intense band with high molecular weight by electrophoresis. The enzyme catalysed the oxidation of other di-phenols, besides dopa. The enzyme activity was stable up to 70$^{circ}C$ and showed a pH optimum 8.0 in the reaction mixture containing L-dopa. The Km value fer PO was 1.5 mM at pH 7.4 and pI value was 8.2. PTU, the specific inhibitor for dopamin ${eta}$-hydroxylase, strongly inhibited the PO activity: half maximal inhibition by PTU occurred at 12 ${mu}$M, suggesting that Cu$^$2+/ is important for the activity of PO. While PO can be activated by organic solvents, heat treatment or other environmental effect, suggesting in vivo conversion system that inactive PO might be changed to active PO by external stimulus.
