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매미나방 (Lymantria dispar)의 발생에 따른 조직 특이성 유약호르몬 에폭시드 가수분해효소 (Juvenile hormone epoxide hydrolase)의 정제와 특성
안기흥, 이경로 한국곤충학회 Korean journal of entomology 8 Pages
한국곤충학회 Korean journal of entomology 1997, Vol.27 No.4 297-304 (8 pages)
측정을 위해 혈림프, 지방체, 중장, 체벽을 분리하였고, 또한 세포 소분획별로는 세포질, 핵, 미토콘드리아, 마이크로솜을 각각 분리하여 비교하였다. 그 결과 조직별로는 혈림프의 JHEH가 거의 측정되지 않았고 지방체에서 가장 높게 나타났다. 세포 소분획에서는 마이크로솜에서 약 53%이상의 상대적 활성을 나타내었다. 마이크로솜의 유약호르몬 에폭시드 가수분해 효소를 정제하기 위해 DEAE-sephacel, sephacryl S-200, hydroxylapatite column등 칼럼 크로마토그래피법을 이용하여 약 190배의 활성을 가진 JHEH fraction을 얻었다. -
미국흰불나방(Hyphantria cunea) 유충 혈림프의 Ferritin 정제
김라애, 이승길, 윤치영 한국곤충학회 Korean journal of entomology 7 Pages
한국곤충학회 Korean journal of entomology 1996, Vol.26 No.2 135-141 (7 pages)
미국흰불나방(Hyphantria cunea)의 유충 혈림프로부터 열처리 (75$^{circ}C$)와 2회의 anion exchange chromatography에 의해 철저장단백질인 ferritin이 정제되었다. Ferritin은 열처리된 혈림프에서 QAE-Toyopearl 550 C column에 의해 1차로 분리되었으며, 2차로 FPLC system을 이용한 TSK-gel DEAE-650M column에서 정제되었다. 정제된 ferritin은 silver stain에 의해 단일 밴드로 나타났다. Ferritin의 분자량은 약 730 kDa이며, 26, 31, 32 kDa인 3종의 소단위로 이루어져 있다. -
붉은머리재주나방(Phalera minor)의 유충 혈림프로 부터 Ferritin의 정제와 특성
민철기, 윤치영 한국곤충학회 Korean journal of entomology 8 Pages
한국곤충학회 Korean journal of entomology 1995, Vol.25 No.3 245-252 (8 pages)
붉은머리재주나방(Phalera minor)의 유충 혈림프를 75$^{circ}C$에서 열처리하고, QAE Toyopearl 550C column과 TSK gel G 3000SW column을 이용한 column chromatography 방법으로 iron 저장단백질인 ferritin을 정제하였다. Ferritin은 분자량이 748kDa인 당단백질이었으며, 24, 31, 32kDa인 3종의 소단위로 이루어져 있었다. 또한 등전점은 5.8이었으며, tyrosine, isoleucine, leucine이 많이 함유되어 있었다. -
누에나방의 유충 혈림프로부터 항균단백질의 유도와 부분 정제
Jeong. Jun-Yong, Lim. Do-Seon, Kim. Woo-Kap, Kim. Hak-Ryul, Yoe. Sung-Moon 한국곤충학회 Korean journal of entomology 8 Pages
한국곤충학회 Korean journal of entomology 1995, Vol.25 No.2 109-116 (8 pages)
W-saline 그리고 잉크를 주입하여 항균활성도를 유도하였다. 이 중 그람음성균(E. coli 와 E. cloacae)에서 항균활성도가 가장 효과적으로 유도되었으며, 2일 경과 후 최고치에 도달하여 그 이후 급격히 감소하였다. 항균성 인자들은 비교적 열에 안정하며, trypsin에 민감한 염기성 단백질임이 확인되었다. 유도된 단백질들은 산성전기영동 하에서 3개의 밴드로 분리되었으며, 그 중 하나의 단백질을 CM-Sepharose column chromatography로 부분 정제하였다. 이러한 항균단백질들은 다양한 그람음성균과 그람양성균의 성장을 억제하였다. -
매미나방(Lymantria dispar)의 혈림프 exo-$eta$-N-acetylglucosaminidase 2의 정제와 특성
유정현, 윤치영, 여성문 한국곤충학회 Korean journal of entomology 9 Pages
한국곤충학회 Korean journal of entomology 1994, Vol.24 No.1 31-39 (9 pages)
매미나방 (Lymantria dispar)에서 4종의 $eta$-N-acetylglucosaminidase를 확인하였으며 이 중 exo-$eta$-N-acetylglucosaminidase 2(E2)를 column chromatography에 의해 분리, 정제하였다. 분자량은 27Kda, pI는 5.75, $ho$-nitrophenyl-N-acetyl-$eta$-D-glucosamine에 대한 Km 값은 2.5$ imes$$10^{-3}$M이었다. 또한 최적반응 pH는 5.5. 최적반응 온도는 7$0^{circ}C$이었으며, 7$0^{circ}C$까지 열안정성을 나타내었으나 그 이후 급격히 활성이 소실되었다. 정제된 효소는 $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Ca^{2+}$, $K^{+}$ 등에 의해... -
소의 뇌로부터 Inositol Triphosphate Kinase의 정제
김정희, 이재태, Kim. Jung-Hye, Lee. Jae-Tae 영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 13 Pages
영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 1996, Vol.13 No.1 46-58 (13 pages)
조직으로 부터 새로운 정제방법을 개발하고 isozyme들의 특성을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 분쇄한 소의 뇌조직을 PEG로 단백침전하고 DEAE cellulose chromatography 하여 $InsP_3$ kinase I, II의 두 isozyme을 얻었으며, 각각의 isozyme 분획을 Matrix green gel 및 calmodulin-Affigel 15 column으로 chromatography하였다. Phenyl-TSK HPLC하여 정제하였으며 I은 3,103배, II는 2,310 배의 정제를 나타내었다. 정제 단계에서 specific activity를 비교해 볼 때 Matrix green gel chromatography가 DEAE cellulose에서 보다... -
소의 뇌로부터 GTP 결합단백질의 분리
김정희, Kim. Jung-Hye 영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 9 Pages
영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 1993, Vol.10 No.2 360-368 (9 pages)
1% cholate를 이용하여 세포막 단백질을 얻었으며 DEAE-Sephacel column chromatography를 시행하였다. 여기서 얻은 GTP 결합단백질은 다시 Ultrogel AcA 34 column chromatography, heptylamine-Sepharose column chromatography 순으로 실시하여 $GTP{gamma}S$와 결합하는 단백질 분획을 모았고 활성도와 일치하는 분획을 얻었다. 전기영동으로 관찰한 결과 $Go{alpha}$가 분자량 39,000 dalton. $G{eta}$가 36,000 dalton인 band를 확인하였고 나머지 다른 단백질도 함께 관찰되어 heptylamine-Sepharose 분획을 다시 DEAE-Sephacel... -
소의 자궁 및 고환에서 Phospholipase C의 분리 및 뇌 Isozyme과의 비교 연구
김정희, 이기녕, Kim. Jung-Hye, Lee. Ki-Yung 영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 9 Pages
영남의대학술지편집위원회 영남의대 학술지 1988, Vol.5 No.2 37-45 (9 pages)
및 고환에서 high performance liquid chromatography(HPLC)를 이용하여 phospholipase C(PLC)를 추출하였으며 뇌에서 3개의 isozyme(F-1, F-2, F-3), 자궁과 고환에서 각각 2개의 isozyme을 얻었고 HPLC에서의 retension time을 구하였다. Homogeneity 검사를 위하여 소 brain의 각 isozyme I, II 및 III에 대한 PLC-monoclonal antibody(Mab)를 affigel에 label 시켰고 결합능(binding capacity)는 73.8~97.5%였다. PLC-Mab와 자궁 및 고환의 PLC isozyme과의 homogeneity 검사에서 binding capacity는 자궁의 F-1은 PLC III가 주이며... -
녹용중의 Gangliosides 분리 및 분석
한나영, 전길자, Han. Na-Young, Jhon. Gil-Ja 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1994, Vol.27 No.5 459-465 (7 pages)
gangliosides 성분을 조사하였다. Folch-Suzuki 분배법에 의해 수용액층으로 분배된 당지질 성분을 Sephadex G-50 column chromatography와 투석으로 정제한 후 용매추출법을 이용하여 ganglioside 성분만을 분리하였다. DEAE-Sephadex A-25 column chromatography와 HP-TLC로 분석한 결과 녹용의 70% 에탄올 추출액에는 GM3, GM4가 주요 ganglioside이었으며 GM1과 GM2가 소량 존재하였으나, chloroform/methanol 추출물에는 GM1이 주요 ganglioside이었다. 녹용 30g중에 $0.437{mu}mol$의 ganglioside-bound sialic acid가 존재하였다. -
소의 간 미토콘드리아 Matrix Aldehyde Dehydrogenase의 정제 및 특성에 관한 연구
김선진, 주충노, Kim. Sun-Jin, Joo. Chung-No 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1994, Vol.27 No.5 386-392 (7 pages)
분획으로부터 aldehyde dehydrogenase(EC 1.2.1.3, ALDH)를 황산암모늄 분별침전, DEAE-Sephacel, hydroxyapatite, blue-Sepharose CL-6B column chromatography로 정제하였다. S-300 gel filtration 방법으로 측정한 이 효소의 분자량은 230,000 dalton이고, 이 효소의 subunit을 SDS-polyacrylamide gel 전기이동법으로 조사한 결과 동일한 subunit(분자량 : 57,400 dalton)으로 구성된 homotetramer임을 알 수 있었다. 이 효소의 최적 pH는 9.5였고, $25{sim}37^{circ}C$에서 매우 안정하였다. Acetaldehyde와 propionaldehyde에 대한...


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