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쥐의 간 Cytosolic Aldehyde Reductase의 정제 및 특성에 관한 연구
김용덕, 주충노, Kim. Yong-Duk, Joo. Chung-No 생화학분자생물학회 한국생화학회지 8 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1993, Vol.26 No.6 525-532 (8 pages)
p-nitrobenzaldehyde에 대한 $K_m$값이 높은것(high $K_m$, ALR)은 황산암모늄 분별침전, DEAE-Sephacel, hydroxyapatite, blue sepharose CL-6B chromatography 방법을 이용하여 분리 정제하였고, $K_m$값이 낮은것(low $K_m$ ALR)은 활성이 적고 불안정하여 부분 정제하여 특성을 조사하였다. High $K_m$ ALR은 SDS-PAGE상에서 42,000 dalton의 단일띠로 나타났으며 superose 12 column을 이용한 FPLC gel filtration을 수행한 결과 분자량이 44,000 dalton의 monomer임이 확인되었다. High $K_m$, ALR의 최적 pH는 6.5, pI는 6.2이었고... -
생강 중에 존재하는 Tyrosinase의 정제 특성에 관한 연구
성찬기, 조성희, Sung. Chan-Ki, Cho. Sung-Hye 생화학분자생물학회 한국생화학회지 9 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1992, Vol.25 No.6 564-572 (9 pages)
의한 침전, Sephadex G-25와 DEAE-Sephacel column chromatography하여 isozyme $P_1$과 $P_2$ 그리고 $P_3$를 정제하였다. 정제된 Isozyme의 분자량은 SDS-PAGE와 HPLC에 의하여 $P_1$은 27,000으로 $P_2$는 20,000 그리고 $P_3$는 41,000 daltons으로 밝혀졌으며, 아미노산 조성은 $P_1$이 245로 $P_2$는 182 그리고 $P_3$는 373잔기로 이루어져 있었다. Isozyme $P_1$과 $P_2$ 그리고 $P_3$는 monohydroxyphenol류의 기질에 대하여 거의 활성이 없었으나, o-dihydroxyphenol류와 trihydroxyphenol류에서 높은 활성을 나타내었다.... -
Spirometra Plerocerocoid (sparganum) 의 분비 배설물에서 Cysteine Proteinase 정제 및 부분 특성
송철용, 최동호, Song. Chul-Yong, Choi. Dong-Ho 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1992, Vol.25 No.3 276-282 (7 pages)
배설물을 ion-exchange chromatography와 affinity chromatogrphy를 실시하여 cysteine proteinase를 순수 정제하였다. 정제된 효소의 최적 pH는 5.5이었고, 최적 mol 농도는 50 mM(50 mM sodium acetate, pH 5.5)이었다. 정제된 효소는 thiol-dependent이고, $4^{circ}C$와 $37^{circ}C$에서 24시간 동안 95%의 안전성올 보였다. 효소의 활성도는 저분자 합성기질인 CBZ-phe-arg-AFC에 대하여 활성이 높았다. 정제된 효소는 cysteine proteinase 특이 억제인자인 E-64, NEM, iodoacetic acid에 의해 활성이 완전히 억제되었고, serine... -
스파르가눔의 cysteine proteinase에 대한 단세포군 항체의 제조 및 특성 분석
송철용, 김동수, 최경희, Song. Chul-Y., Kim. Tong-S., Choi. Kyung-H. 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1992, Vol.25 No.3 262-268 (7 pages)
의존성을 나타냈으며 저분자 합성 기질인 CBZ-phe-arg-AFC에 대하여 활성이 높음을 나타내었다. 또한 단백질 분해효소 억제인자 중 cysteine proteinase 특이 억제 인자인 E-64, NEM, iodoacetic acid에 의하여 활성이 완전히 억제됨을 관찰할수 있었으며 정제된 cysteine proteinase의 분자량은 Ultrogel AcA 54 column chromatography로 측정하고 SDS-PAGE로 확인한 결과 28 kDa이었다. 스파르가눔 추출물로 면역 시킨 Balb/c 마우스의 비장세포와 myeloma 세포를 융합하여 Ig G1 subtype을 가진 항체를 분비하는 1개의 하이브리도마... -
HPLC 분리법을 이용한 chicken Apo A-I의 일차구조에 관한 연구
김태웅, 조현미, 김성완, 홍순주, Kim. Tae-Woong, Cho. Hyun-Mi, Kim. Sung-Wan, Hong. Sun-Joo 생화학분자생물학회 한국생화학회지 7 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1991, Vol.24 No.4 380-386 (7 pages)
apolipoprotein A-1의 완전한 일차구조를, trypsin, S. aureus V8 protease 및 cyanogen bromide를 이용하여 결정하였다. 0.1% TFA와 95% acetonitrile을 사용하여 Vydac $C_{18}$ column이 연결된 Waters HPLC를 사용하여 모든 peptide를 분리하였으며, 이 방법에 의해 분리된 대부분의 peak들은 순수하였다. Rechromatography 방법으로는 5 mM sodium phosphate와 90% acetonitrile의 두 buffer를 hypersil $C_{18}$ column에 이용하여 재분리하였다. Chicken apo A-l의 N-말단기는, 순수한 단백질의 직접적인 sequencing 방법에 의해... -
유전자 재조합 대장균으로부터 인간 Interferon-${eta}$의 정제
이진규, 이석재, 최문기, 정광회, 신광순, 백승복, Lee. Jin-Kyu, Lee. Seok-Jae, Choe. Moon-Kee, Chung. Kwang-Hoe, Shin. Kwang-Soon, Paik. Sung-Bok 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1990, Vol.23 No.2 166-171 (6 pages)
Blue Sepharose CL-6B column chromatography, HPLC gel filtration 방법 등을 이용하여 대장균으로부터 정제하였다. 정제된 IFN-${eta}$의 specific activity는 $3.1{ imes}10^8$ IU/mg이었고 정제도는 1,902이었다. 정제된 IFN-${eta}$는 환원된 상태와 환원되지 않은 상태에서 SDS polyacrylamide gel electrophoresis 한 결과 모두 단일 띠로 나타났으며 분자량은 18,000 dalton이었다. N-말단 아미노산을 조사한 결과 재조합 인간 IFN-${eta}$는 천연형 인간IFN-${eta}$와 같이 N-말단이 methionine임이 밝혀졌다. 전자 현미경을... -
Corynebacterium glutamicum의 glutamate dehydrogenase의 정제 및 성질
박미선, 최순영, 김성진, 민경희, Park. Mee-Sun, Choi. Soon-Young, Kim. Sung-Jin, Min. Kyung-Hee 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1989, Vol.22 No.2 122-127 (6 pages)
Corynebacterium glutamicum의 glutamate dehydrogenase를 ammonium sulfate 분획, DEAE-cellulose column chromatography, ultragel ACA-34, DEAE-sphacel, HPLC(TSK-gel)를 사용하여 분리 정제하였다. HPLC gel 여과에 의한 이 효소의 분자량은 400,000이었으며, SDS-PAGE에 의한 subunits의 분자량은 $63,000{pm}5,000$이었다. 분자량 측정의 결과로 glutamate dehydrogenase는 동일한 분자량을 가진 subunits가 6개 있음을 암시하여 주었다. 이 효소의 최적 pH는 8.0이었고, 최적 효소 활성에 대한 ${alpha}$-ketoglutarate, $NH_4Cl$... -
꽃게(Portunus trituberculatus) 헤모시아닌의 CNBr-peptide에 관한 연구
김상복, 유병선, 이강석, Kim. Sang-Bog, Yoo. Byung-Sun, Lee. Kang-Suk 생화학분자생물학회 한국생화학회지 5 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1989, Vol.22 No.2 113-117 (5 pages)
C5는 $Cu^{++}$가 결합된채 분리되었다. Sephadex G-50 에서 용출된 각 분획을 DEAE-cellulose column chromatography를 이용하여 peptide C4와 peptide C5를 순수분리하였다. 순수분리된 peptide C4와 peptide C5 및 꽃게 헤모시아닌에 대한 아미노산 조성을 본 결과 꽃게 헤모시아닌은 Aspartic acid와 Glutamic acid 함량이 높은 것으로 밝혀졌다. Peptide C4의 경우는 몇 개 아미노산을 제외하고는 꽃게 헤모시아닌과 큰 차이가 없었으나 $Cu^{++}$를 함유하고 있는 peptide C5는 Lysine 함량이 특히 높은 강한 염기성으로 나타냈다. -
진주조 미토콘드리아 용성분획의 신종 토포아이소머레이즈 : 그의 분리와 동정
임용표, 김병동, Lim. Yong-Pyo, Kim. Byung-Dong 생화학분자생물학회 한국생화학회지 8 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1988, Vol.21 No.4 357-364 (8 pages)
SF column chromatography, 그리고 polyacrylamide gel electrophoresis에 의하여 분리되었다. 이 효소는 이가 양이온들 ($Mg^{++}$, $Mn^{++}$, $Zn^{++}$, $Co^{++}$ 및 $Ca^{++}$)을 필요로 하나 ATP는 필요로 하지 않는다. 이 효소는 고농도의 일가 몇 이가 양이온들, EDTA, SDS, 그리고 spermidine에 의해 억제된다. 이 효소의 분자량은 약 70,000으로 추정된다. 이 효소는 박테리아의 topoisomerase I과는 달리 사다리 중간산물을 만들지 않으며, 고분자량 multimer도 생산하므로 topoisomerase와 recombinase의 복합기능 단백질로... -
소뇌에서 Protein Carboxyl Methyltransferase Isoenzymes의 분리 및 특성에 관한 연구
황영미, 전길자, Whang. Young-Mi, Jhon. Gil-Ja 생화학분자생물학회 한국생화학회지 6 Pages
생화학분자생물학회 한국생화학회지 1988, Vol.21 No.3 233-238 (6 pages)
1,000배 정제하였다. 소뇌의 cytosol을 70% ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, SAH-Sepharose 4B affinity chromatography 방법으로 정제하였으며, 정제된 효소용액을 HPLC (DEAE-5PW column)로 분석하여 3종류의 isoenzymes을 분리하였고 용출되는 순서에 따라 PCMI, PCMII, PCMIII으로 명명하였다. 더욱 정제된 효소용액으후 2차 전기영동한 결과 isoelectric point가 각각 6.25, 6.20, 5.80이었고 분자량은 모두 28,000이었다. 이 HPLC 분석방법은 소량의 사료로도 3개의 isoenzymes을 분리할 수 있는...